MLE-12細胞(bao) 細胞(bao)株(zhu)

雙十(shi)二來了(le)

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MLE-12細胞(bao)|上(shang)海乾思生物(wu)公(gong)司

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公(gong)司不(bu)僅有(you)大量的細胞(bao)，還(hai)提供(gong)MLE-12細胞(bao)的(de)全(quan)程(cheng)後期(qi)服務(wu)，可以向專業人士咨(zi)詢(xun)詳細的MLE-12細胞(bao)|細胞(bao)培(pei)養條(tiao)件，凍(dong)存(cun)方(fang)法(fa)，及(ji)相關(guan)培(pei)養技(ji)術。

對(dui)於(yu)貼(tie)壁細胞(bao)，傳(chuan)代(dai)可參考(kao)以下(xia)方(fang)法(fa)：

1. 棄去培(pei)養上(shang)清，用(yong)不含鈣(gai)、鎂離(li)子(zi)的PBS潤(run)洗(xi)細胞(bao)1-2次(ci)。

2. 加(jia)2ml消化(hua)液(ye)(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)於(yu)培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於(yu)37℃培(pei)養箱(xiang)中(zhong)消化(hua)1-2分鐘，然(ran)後在顯微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察(cha)Ⅱ型(xing)肺泡上(shang)皮細胞(bao)|細胞(bao)消(xiao)化(hua)情況，若細胞(bao)大部分變(bian)圓(yuan)並脫(tuo)落(luo)，迅(xun)速(su)拿回操作臺(tai)，輕敲(qiao)幾下(xia)培(pei)養瓶(ping)後加(jia)少(shao)量(liang)培(pei)養基(ji)終(zhong)止消(xiao)化(hua)。

3. 按6-8ml/瓶(ping)補(bu)加(jia)培(pei)養基(ji)，輕輕打(da)勻(yun)後吸出(chu)，在1000RPM條(tiao)件下(xia)離心4分鐘，棄去上(shang)清液(ye)，補(bu)加(jia)1-2mL培(pei)養液(ye)後吹勻(yun)。

4. 將(jiang)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)按(an)1：2到1：5的比(bi)例分到新(xin)的含8ml培(pei)養基(ji)的新(xin)皿(min)中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶(ping)中(zhong)。

對於(yu)懸(xuan)浮(fu)細胞(bao)，傳(chuan)代(dai)可參考(kao)以下(xia)方(fang)法(fa)：

方(fang)法(fa)壹(yi)：收集(ji)細胞(bao)，1000RPM條(tiao)件下(xia)離心4分鐘，棄去上(shang)清液(ye)，補(bu)加(jia)1-2mL培(pei)養液(ye)後吹勻(yun)，將(jiang)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)按(an)1：2到1：5的比(bi)例分到新(xin)的含8ml培(pei)養基(ji)的新(xin)皿(min)中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶(ping)中(zhong)。

方(fang)法(fa)二：可選擇(ze)半(ban)數換(huan)液(ye)方(fang)式(shi)，棄去半(ban)數培(pei)養基(ji)後，將(jiang)剩余細胞(bao)懸(xuan)起(qi)，將(jiang)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)按(an)1：2到1：3的比(bi)例分到新(xin)的含8ml培(pei)養基(ji)的新(xin)皿(min)中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶(ping)中(zhong)。

3)細胞(bao)凍(dong)存(cun)：待(dai)細胞(bao)生(sheng)長(chang)狀(zhuang)態良好時(shi)，可進行Ⅱ型(xing)肺泡上(shang)皮細胞(bao)|細胞(bao)凍(dong)存(cun)。貼(tie)壁細胞(bao)凍(dong)存(cun)時(shi)，棄去培(pei)養基(ji)後加(jia)入少(shao)量(liang)胰(yi)酶，細胞(bao)變(bian)圓(yuan)脫(tuo)落(luo)後，加(jia)入約(yue)1ml含血清的培(pei)養基(ji)後加(jia)入凍(dong)存(cun)管中(zhong)，再添(tian)加(jia)10%DMSO後進行凍存(cun)。懸(xuan)浮(fu)細胞(bao)凍(dong)存(cun)時(shi)，應(ying)將(jiang)細胞(bao)收集(ji)，1000RPM條(tiao)件下(xia)離心4分鐘，少(shao)量(liang)保(bao)存(cun)上(shang)清液(ye)(防(fang)止細胞(bao)吸(xi)走(zou))，加(jia)入部(bu)分新(xin)鮮培(pei)養基(ji)，加(jia)入到凍存(cun)管中(zhong)，在凍(dong)存(cun)管中(zhong)加(jia)入10%DMSO後進行凍存(cun)。

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1. 收到細胞(bao)後，若發(fa)現(xian)幹(gan)冰已揮發幹凈(jing)、凍存(cun)管瓶(ping)蓋脫(tuo)落(luo)、破(po)損(sun)及(ji)細胞(bao)有(you)汙(wu)染，請立即與我們(men)。

2. 所有(you)動物(wu)細胞(bao)均(jun)視(shi)為(wei)有(you)潛(qian)在(zai)的生(sheng)物(wu)危(wei)害性(xing)，必(bi)須在二級生(sheng)物(wu)安(an)全(quan)臺(tai)內操作，並請註(zhu)意防(fang)護(hu)，所有(you)廢(fei)液(ye)及(ji)接觸(chu)過(guo)此(ci)細胞(bao)的(de)器(qi)皿(min)需要(yao)滅菌(jun)後方(fang)能(neng)丟棄。

此(ci)外，近(jin)期(qi)*活(huo)動時(shi)間(jian)內，歡迎(ying)在線選(xuan)購(gou)，如(ru)若存(cun)在(zai)任(ren)何疑問，，我們(men)有(you)專業客服為(wei)您(nin)提(ti)供(gong)服務(wu)。

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上(shang)海乾思生物(wu)公(gong)司

小(xiao)徐(xu)20171130