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技(ji)術資訊
肺癌(ai)是全(quan)球發(fa)病(bing)率和死亡率最高的(de)癌(ai)癥(zheng)之壹,主(zhu)要分為非小細胞(bao)肺癌(ai)(NSCLC)和小細胞(bao)肺癌(ai)(SCLC)兩(liang)大類(lei)。盡(jin)管肺癌(ai)的治療已(yi)有(you)壹定進展,但由(you)於其復雜(za)的(de)分子機制、早期(qi)無明顯癥(zheng)狀及(ji)易發生(sheng)轉(zhuan)移的(de)特(te)性,使得(de)肺癌(ai)的早期(qi)診(zhen)斷和(he)有效治(zhi)療依然(ran)面(mian)臨巨(ju)大(da)挑戰(zhan)。深入(ru)理解人(ren)肺癌(ai)細胞的分子機制,對提(ti)高肺癌(ai)治療效果具有(you)重(zhong)要意義。壹、人(ren)肺癌(ai)細胞的分子機制1、基(ji)因突(tu)變與驅(qu)動(dong)基(ji)因的(de)變化(hua)肺癌(ai)的發生(sheng)與(yu)多(duo)種基(ji)因突(tu)變密切(qie)相關,尤(you)其是EGFR(表皮(pi)生(sheng)長因(yin)子受體)、ALK(間(jian)變性淋巴瘤激酶(mei))、ROS1等驅(qu)動(dong)基(ji)因的(de)突(tu)變是非(fei)小...
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大鼠成(cheng)肌(ji)細(xi)胞是研究肌(ji)肉(rou)發育、再(zai)生(sheng)及(ji)疾(ji)病的重(zhong)要(yao)工具,其選擇與(yu)應用需結合實驗目(mu)標與(yu)細胞(bao)特(te)性綜合(he)考(kao)量。以(yi)下(xia)從細(xi)胞(bao)系選擇、培(pei)養(yang)技(ji)術及(ji)研究應用三(san)方面(mian)展開說明。壹、細胞系(xi)選擇:L6細(xi)胞系的(de)優(you)勢(shi)L6細(xi)胞系源(yuan)自大鼠骨(gu)骼肌(ji),因(yin)其易於培(pei)養(yang)、遺傳操(cao)作簡(jian)便,成(cheng)為肌(ji)肉(rou)研究領域的(de)經典(dian)模(mo)型(xing)。該(gai)細(xi)胞(bao)系(xi)具有(you)以(yi)下(xia)特(te)點:分化(hua)能(neng)力:在(zai)低血清(qing)條(tiao)件下(xia)可(ke)自發分化(hua)為多(duo)核肌(ji)管,模擬(ni)肌(ji)肉(rou)發育過(guo)程(cheng),適用於研究肌(ji)纖(xian)維形(xing)成(cheng)機制。代謝(xie)特(te)性:高表達GLUT4葡(pu)萄(tao)糖轉(zhuan)運蛋白,常(chang)用於胰島素敏感性及(ji)糖(tang)尿(niao)病(bing)相關研究。遺傳穩(wen)定性:低代次冷凍保存(cun)並(bing)...
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肝癌是(shi)全(quan)球範(fan)圍內最常(chang)見的(de)惡(e)性腫瘤之(zhi)壹,尤其在(zai)亞洲(zhou)地區(qu),肝癌的(de)發(fa)生(sheng)率較(jiao)高。盡(jin)管近(jin)年來肝癌治(zhi)療(liao)手(shou)段(duan)取得(de)了壹定進展,但由(you)於其高度(du)的(de)抗(kang)藥(yao)性和腫瘤的(de)異(yi)質性,肝癌的(de)治(zhi)療效果仍(reng)然(ran)不理想(xiang)。人(ren)肝癌細(xi)胞(bao)的抗藥性機制復雜(za)且(qie)多(duo)樣,直(zhi)接(jie)影(ying)響了(le)臨(lin)床(chuang)治療(liao)效果和(he)預後(hou)。因此,深入(ru)了解其抗藥性機制,並(bing)探(tan)討其對治療(liao)的(de)影(ying)響,已(yi)成(cheng)為肝癌研究的壹個重要(yao)方向。壹、人(ren)肝癌細(xi)胞(bao)的抗藥性機制1、藥物(wu)外排(pai)泵(beng)的過度(du)表達藥物外排(pai)泵(beng)是細胞(bao)膜上(shang)的壹種重要(yao)跨膜運(yun)輸(shu)蛋白,能(neng)夠將藥物(wu)從細(xi)胞(bao)內排(pai)出(chu),導(dao)致藥物(wu)在(zai)細胞(bao)內的濃(nong)度(du)下(xia)降,進而降低藥物(wu)的療效...
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壹、關鍵步(bu)驟(zhou)組織(zhi)取(qu)材與處(chu)理取(qu)材於(yu)胃(wei)組織(zhi)肌(ji)層(ceng),需剝離黏(nian)膜(mo)、外膜及(ji)結締組織(zhi),保留(liu)中(zhong)層(ceng)環(huan)形(xing)肌(ji)。用含雙(shuang)抗(kang)的(de)PBS清(qing)洗3次,去(qu)除(chu)血(xue)汙及(ji)雜(za)質(zhi)。若懷(huai)疑汙(wu)染(ran),可(ke)置於(yu)含青鏈(lian)黴素(su)的(de)混合液中(zhong)浸泡(pao)30~60分鐘。組織(zhi)塊(kuai)剪切(qie)與消(xiao)化(hua)將(jiang)組織(zhi)剪成(cheng)1mm³小塊,采(cai)用兩(liang)步(bu)消(xiao)化(hua)法(fa):先(xian)加0.2%膠(jiao)原(yuan)酶(mei)-Ⅱ於(yu)37℃消(xiao)化(hua)1小時(shi),待組織(zhi)呈(cheng)絮狀後(hou),再加(jia)0.25%胰蛋白酶(mei)消(xiao)化(hua)15~30分鐘,期(qi)間(jian)每隔(ge)10分鐘搖動壹次。消(xiao)化(hua)後(hou)通過(guo)200目(mu)濾網過(guo)濾(lv),收(shou)集(ji)濾液(ye)。細胞(bao)接(jie)種與培(pei)養(yang)濾(lv)液(ye)1000rpm離心5分鐘,棄(qi)上(shang)清,用含15%FBS的D...
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C6/36蚊子細胞(bao)是病(bing)毒(du)學(xue)研究中(zhong)常(chang)用的昆蟲(chong)細(xi)胞系之壹,特(te)別是(shi)在(zai)研究蚊媒(mei)病毒(du)方面(mian)有著(zhe)廣泛(fan)應用。由於其對多(duo)種蚊(wen)媒(mei)病毒(du)的(de)高效感受性、易於培(pei)養(yang)和(he)穩(wen)定的特(te)性,成(cheng)為了病(bing)毒(du)學(xue)實(shi)驗室中(zhong)的重(zhong)要工具。以(yi)下(xia)是C6/36蚊(wen)子細胞(bao)在(zai)病毒(du)學(xue)研究中(zhong)的主(zhu)要應用。壹、病毒(du)培(pei)養(yang)與(yu)病(bing)毒(du)學(xue)研究被廣泛(fan)用於蚊媒(mei)病毒(du)的(de)培(pei)養(yang)與(yu)擴(kuo)增,尤其是那些(xie)需要蚊子細胞(bao)作為培養(yang)基(ji)的病(bing)毒(du)。與(yu)哺(bu)乳動物(wu)細(xi)胞系不同,它對(dui)蚊(wen)媒(mei)病毒(du)有(you)更高的(de)敏感性,因此,它(ta)們常(chang)用於研究病毒(du)在(zai)蚊子體內的復制機制、感染(ran)途徑(jing)和(he)病毒(du)的(de)傳(chuan)播(bo)方式。例(li)如(ru),廣泛(fan)用於登(deng)革(ge)熱(re)病(bing)毒(du)(DEN...
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