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雙十(shi)二(er)來(lai)了(le)

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公(gong)司不(bu)僅有大量的細(xi)胞(bao)，還提(ti)供mMMSC細(xi)胞(bao)的全(quan)程後(hou)期(qi)服(fu)務(wu)，可(ke)以向(xiang)專(zhuan)業(ye)人(ren)士(shi)咨詢詳(xiang)細(xi)的mMMSC細(xi)胞(bao)|細(xi)胞(bao)培養條(tiao)件(jian)，凍存(cun)方法(fa)，及(ji)相關培養技(ji)術(shu)。

對(dui)於(yu)貼(tie)壁細(xi)胞(bao)，傳代(dai)可(ke)參(can)考(kao)以下方(fang)法(fa)：

1. 棄去(qu)培養上清(qing)，用不(bu)含(han)鈣、鎂離(li)子的PBS潤(run)洗(xi)細(xi)胞(bao)1-2次。

2. 加(jia)2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)於(yu)培養瓶中，置於(yu)37℃培養箱(xiang)中消(xiao)化1-2分(fen)鐘(zhong)，然(ran)後(hou)在顯(xian)微(wei)鏡下觀(guan)察Ⅱ型肺泡上皮(pi)細(xi)胞(bao)|細(xi)胞(bao)消化情況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞(bao)大部分(fen)變圓並(bing)脫落，迅速拿(na)回操作(zuo)臺，輕敲幾(ji)下培養瓶後(hou)加(jia)少(shao)量培養基(ji)終止消(xiao)化。

3. 按6-8ml/瓶補加(jia)培養基(ji)，輕輕打勻(yun)後(hou)吸出(chu)，在1000RPM條(tiao)件(jian)下離(li)心(xin)4分(fen)鐘(zhong)，棄(qi)去(qu)上清(qing)液，補加(jia)1-2mL培養液(ye)後(hou)吹(chui)勻。

4. 將細(xi)胞(bao)懸液按1：2到1：5的比例分(fen)到(dao)新的含(han)8ml培養基(ji)的新皿中或者瓶中。

對(dui)於(yu)懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞(bao)，傳代(dai)可(ke)參(can)考(kao)以下方(fang)法(fa)：

方法(fa)壹：收(shou)集細(xi)胞(bao)，1000RPM條件下離(li)心(xin)4分(fen)鐘(zhong)，棄(qi)去(qu)上清(qing)液，補加(jia)1-2mL培養液(ye)後(hou)吹(chui)勻，將細(xi)胞(bao)懸液按1：2到1：5的比例分(fen)到(dao)新的含(han)8ml培養基(ji)的新皿中或者瓶中。

方(fang)法(fa)二(er)：可(ke)選擇半數換液(ye)方(fang)式(shi)，棄去(qu)半(ban)數培養基(ji)後(hou)，將剩余細(xi)胞(bao)懸起，將細(xi)胞(bao)懸液按1：2到1：3的比例分(fen)到(dao)新的含(han)8ml培養基(ji)的新皿中或者瓶中。

3)細(xi)胞(bao)凍存(cun)：待細(xi)胞(bao)生長狀(zhuang)態良好(hao)時，可(ke)進行Ⅱ型肺泡上皮(pi)細(xi)胞(bao)|細(xi)胞(bao)凍存(cun)。貼(tie)壁細(xi)胞(bao)凍存(cun)時，棄(qi)去培養基(ji)後(hou)加(jia)入(ru)少(shao)量胰(yi)酶(mei)，細(xi)胞(bao)變圓脫落後(hou)，加(jia)入(ru)約1ml含(han)血(xue)清(qing)的培養基(ji)後(hou)加(jia)入(ru)凍存(cun)管(guan)中，再(zai)添(tian)加10%DMSO後(hou)進行凍存(cun)。懸浮(fu)細(xi)胞(bao)凍存(cun)時，應(ying)將細(xi)胞(bao)收(shou)集，1000RPM條(tiao)件(jian)下離(li)心(xin)4分(fen)鐘(zhong)，少(shao)量保(bao)存上清(qing)液(防(fang)止細(xi)胞(bao)吸走(zou))，加入(ru)部(bu)分(fen)新鮮培養基(ji)，加(jia)入(ru)到(dao)凍存(cun)管(guan)中，在凍存(cun)管(guan)中加(jia)入(ru)10%DMSO後(hou)進行凍存(cun)。

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1. 收(shou)到細(xi)胞(bao)後(hou)，若(ruo)發(fa)現幹(gan)冰已(yi)揮發(fa)幹(gan)凈、凍存(cun)管(guan)瓶蓋脫落、破損及(ji)細(xi)胞(bao)有汙染，請(qing)立(li)即與我(wo)們。

2. 所(suo)有動物細(xi)胞(bao)均視為有(you)潛在的生物(wu)危(wei)害(hai)性(xing)，必須在二(er)級生物(wu)安(an)全(quan)臺內(nei)操作(zuo)，並請(qing)註意防(fang)護，所(suo)有(you)廢(fei)液及(ji)接(jie)觸(chu)過此細(xi)胞(bao)的器皿需(xu)要(yao)滅(mie)菌後(hou)方(fang)能(neng)丟棄。

此(ci)外，近期*活(huo)動時間(jian)內(nei)，歡(huan)迎在線(xian)選(xuan)購，如若(ruo)存(cun)在任何(he)疑(yi)問，，我(wo)們有(you)專(zhuan)業(ye)客(ke)服(fu)為您提(ti)供服(fu)務(wu)。

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小徐20171130