NCTC clone 929細(xi)胞(bao) 細胞株

雙十二(er)來(lai)了

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對於貼壁細(xi)胞，傳(chuan)代(dai)可參考以(yi)下(xia)方法(fa)：

1. 棄去(qu)培(pei)養上(shang)清(qing)，用(yong)不(bu)含(han)鈣(gai)、鎂離(li)子(zi)的(de)PBS潤(run)洗(xi)細胞1-2次(ci)。

2. 加(jia)2ml消化(hua)液(ye)(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)於(yu)培養瓶(ping)中(zhong)，置於(yu)37℃培(pei)養(yang)箱中(zhong)消化(hua)1-2分(fen)鐘(zhong)，然後在(zai)顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀察Ⅱ型(xing)肺泡(pao)上皮(pi)細胞(bao)|細胞(bao)消化情(qing)況，若細胞(bao)大(da)部分(fen)變圓(yuan)並脫(tuo)落(luo)，迅速(su)拿(na)回操(cao)作臺，輕敲(qiao)幾(ji)下培養瓶後加(jia)少(shao)量(liang)培(pei)養(yang)基終止(zhi)消(xiao)化(hua)。

3. 按(an)6-8ml/瓶補(bu)加(jia)培養(yang)基，輕輕打勻後吸(xi)出(chu)，在(zai)1000RPM條件(jian)下離(li)心(xin)4分(fen)鐘，棄去(qu)上(shang)清(qing)液，補(bu)加(jia)1-2mL培養(yang)液(ye)後吹(chui)勻。

4. 將(jiang)細(xi)胞懸液按(an)1：2到(dao)1：5的(de)比(bi)例(li)分到(dao)新的(de)含(han)8ml培(pei)養基的(de)新(xin)皿(min)中(zhong)或(huo)者瓶中(zhong)。

對於(yu)懸(xuan)浮(fu)細胞，傳(chuan)代(dai)可參考以(yi)下(xia)方法(fa)：

方法(fa)壹(yi)：收集(ji)細(xi)胞(bao)，1000RPM條件(jian)下離(li)心(xin)4分(fen)鐘，棄去(qu)上(shang)清(qing)液，補(bu)加(jia)1-2mL培養(yang)液(ye)後吹(chui)勻，將(jiang)細(xi)胞懸液按(an)1：2到(dao)1：5的(de)比(bi)例(li)分到(dao)新的(de)含(han)8ml培(pei)養基的(de)新(xin)皿(min)中(zhong)或(huo)者瓶中(zhong)。

方法(fa)二(er)：可選擇半數(shu)換(huan)液(ye)方式，棄去(qu)半(ban)數培(pei)養基後，將(jiang)剩(sheng)余(yu)細胞(bao)懸起，將(jiang)細胞懸(xuan)液(ye)按(an)1：2到(dao)1：3的(de)比(bi)例(li)分到(dao)新的(de)含(han)8ml培(pei)養基的(de)新(xin)皿(min)中(zhong)或(huo)者瓶中(zhong)。

3)細胞(bao)凍存(cun)：待(dai)細(xi)胞(bao)生長狀態良好(hao)時(shi)，可進行Ⅱ型(xing)肺泡(pao)上皮(pi)細胞(bao)|細胞(bao)凍存(cun)。貼壁細(xi)胞凍存(cun)時(shi)，棄去(qu)培(pei)養基後加(jia)入少(shao)量(liang)胰(yi)酶(mei)，細胞(bao)變圓(yuan)脫落後，加(jia)入約(yue)1ml含血(xue)清(qing)的(de)培(pei)養(yang)基後加(jia)入凍存(cun)管(guan)中(zhong)，再(zai)添加(jia)10%DMSO後進行凍存(cun)。懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞凍存(cun)時(shi)，應將細胞收(shou)集(ji)，1000RPM條(tiao)件(jian)下離(li)心(xin)4分(fen)鐘，少(shao)量(liang)保存上(shang)清(qing)液(防止細(xi)胞吸(xi)走(zou))，加(jia)入部分(fen)新(xin)鮮(xian)培養(yang)基，加(jia)入到(dao)凍存(cun)管(guan)中(zhong)，在(zai)凍存(cun)管(guan)中(zhong)加(jia)入10%DMSO後進行凍存(cun)。

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1. 收到(dao)細胞(bao)後，若發(fa)現幹(gan)冰已(yi)揮發(fa)幹(gan)凈、凍存(cun)管(guan)瓶(ping)蓋(gai)脫(tuo)落、破損及細(xi)胞有汙(wu)染(ran)，請立即與我(wo)們。

2. 所有動物(wu)細胞(bao)均(jun)視(shi)為有潛在(zai)的(de)生(sheng)物(wu)危害性，必須(xu)在(zai)二級(ji)生物(wu)安全臺內操(cao)作，並請註意(yi)防護(hu)，所有廢液(ye)及接觸(chu)過此細(xi)胞(bao)的(de)器(qi)皿(min)需要(yao)滅菌(jun)後方能(neng)丟棄。

此外，近期*活動(dong)時(shi)間內(nei)，歡迎在(zai)線選(xuan)購，如若存在(zai)任(ren)何(he)疑(yi)問(wen)，，我(wo)們有專業客服為(wei)您提供服務(wu)。

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小(xiao)徐20171130