人/鼠(shu)雜(za)交骨(gu)髓瘤細胞(bao) 細胞(bao)株(zhu)

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為(wei)了更好地進(jin)行科學(xue)研(yan)究，細胞(bao)分(fen)化觀察，您需要高(gao)水(shui)準高品質的培養細胞(bao)。乾(qian)思(si)是(shi)妳優(you)先(xian)的選(xuan)擇(ze)，大(da)促(cu)，意(yi)想(xiang)不到(dao)的折扣，人(ren)/鼠(shu)雜(za)交骨(gu)髓瘤細胞(bao)|細胞(bao)購買。

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人/鼠(shu)雜(za)交骨(gu)髓瘤細胞(bao) 【培養(yang)指南】

對於(yu)貼壁細胞(bao)，傳(chuan)代(dai)可參(can)考以(yi)下(xia)方法(fa)：

1. 棄去培養上清(qing)，用不含(han)鈣(gai)、鎂離(li)子的PBS潤洗細胞(bao)1-2次。

2. 加2ml消(xiao)化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)於(yu)培(pei)養瓶中，置於(yu)37℃培(pei)養箱(xiang)中消(xiao)化1-2分(fen)鐘(zhong)，然後(hou)在(zai)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察Ⅱ型肺(fei)泡(pao)上皮細胞(bao)|細胞(bao)消(xiao)化情況，若細(xi)胞(bao)大部分(fen)變圓並脫落，迅速拿回操(cao)作(zuo)臺(tai)，輕敲(qiao)幾下(xia)培養(yang)瓶後(hou)加少(shao)量培(pei)養(yang)基(ji)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化。

3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕(qing)輕打勻後(hou)吸(xi)出(chu)，在(zai)1000RPM條件下(xia)離(li)心4分(fen)鐘(zhong)，棄去上清(qing)液，補加1-2mL培養液後(hou)吹(chui)勻。

4. 將細胞(bao)懸液按(an)1：2到(dao)1：5的比例(li)分(fen)到新(xin)的含(han)8ml培養(yang)基(ji)的新皿中或(huo)者瓶中。

對於(yu)懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞(bao)，傳(chuan)代(dai)可參(can)考以(yi)下(xia)方法(fa)：

方(fang)法(fa)壹：收(shou)集細胞(bao)，1000RPM條件下(xia)離(li)心4分(fen)鐘(zhong)，棄去上清(qing)液，補加1-2mL培養液後(hou)吹(chui)勻，將細胞(bao)懸液按(an)1：2到(dao)1：5的比例(li)分(fen)到新(xin)的含(han)8ml培養(yang)基(ji)的新皿中或(huo)者瓶中。

方法(fa)二：可選(xuan)擇(ze)半數換(huan)液方(fang)式(shi)，棄去半數培(pei)養(yang)基(ji)後(hou)，將(jiang)剩余細胞(bao)懸起(qi)，將細(xi)胞(bao)懸液按(an)1：2到(dao)1：3的比例(li)分(fen)到新(xin)的含(han)8ml培養(yang)基(ji)的新皿中或(huo)者瓶中。

人/鼠(shu)雜(za)交骨(gu)髓瘤細胞(bao) 【細胞(bao)凍(dong)存(cun)】

待(dai)細(xi)胞(bao)生長(chang)狀態良(liang)好(hao)時(shi)，可(ke)進(jin)行293/HEK-293細(xi)胞(bao)|細胞(bao)凍(dong)存(cun)。貼壁細胞(bao)凍(dong)存(cun)時(shi)，棄去培養基(ji)後(hou)加入少(shao)量胰(yi)酶，細胞(bao)變圓脫落後(hou)，加入約(yue)1ml含(han)血清(qing)的培養基後(hou)加入凍(dong)存(cun)管(guan)中，再(zai)添(tian)加10%DMSO後(hou)進(jin)行凍(dong)存(cun)。懸(xuan)浮(fu)細胞(bao)凍(dong)存(cun)時(shi)，應將細胞(bao)收(shou)集，1000RPM條件下(xia)離(li)心4分(fen)鐘(zhong)，少(shao)量保存(cun)上清(qing)液(防(fang)止(zhi)細胞(bao)吸(xi)走(zou))，加入部分(fen)新鮮(xian)培(pei)養基，加入到凍(dong)存(cun)管(guan)中，在(zai)凍(dong)存(cun)管(guan)中加入10%DMSO後(hou)進(jin)行凍(dong)存(cun)。

人(ren)/鼠(shu)雜(za)交骨(gu)髓瘤細胞(bao) 【復蘇(su)的原則(ze)】

快速(su)融(rong)化：必須將凍(dong)存(cun)在(zai)-196℃液氮(dan)中(zhong)的細胞(bao)快速(su)融(rong)化至(zhi)37℃，使人(ren)/鼠雜(za)交骨(gu)髓瘤細胞(bao)|細胞(bao)外(wai)凍(dong)存(cun)時(shi)的冰晶迅速融(rong)化，避免冰晶緩(huan)慢(man)融(rong)化時進(jin)入細胞(bao)形成(cheng)再結(jie)晶，對細(xi)胞(bao)造(zao)成(cheng)損害(hai)。

人(ren)/鼠(shu)雜(za)交骨(gu)髓瘤細胞(bao) 乾(qian)思(si)|復(fu)旦(dan)細(xi)胞(bao)庫(ku)全(quan)國各(ge)地均可(ke)發貨(huo)，全國(guo)統(tong)壹價(jia)格，本(ben)公司(si)出(chu)售(shou)的所有(you)細(xi)胞(bao)僅供科研使(shi)用(yong)。

人/鼠雜(za)交骨(gu)髓瘤細胞(bao) 【註意(yi)事項】

乾(qian)思(si)生(sheng)物(wu)實驗室專業(ye)人(ren)士提醒(xing)廣大(da)科研實驗者，購買人/鼠雜(za)交骨(gu)髓瘤細胞(bao)培養(yang)，註意(yi)事項：

1. 收(shou)到細胞(bao)後(hou)，若發現(xian)幹(gan)冰已(yi)揮(hui)發幹(gan)凈(jing)、凍(dong)存(cun)管(guan)瓶蓋脫落、破損(sun)及細(xi)胞(bao)有(you)汙(wu)染(ran)，請(qing)立即與我(wo)們。

2. 所(suo)有(you)動(dong)物(wu)細(xi)胞(bao)均視(shi)為有(you)潛(qian)在(zai)的生物(wu)危(wei)害(hai)性(xing)，必須在二級生物(wu)安(an)全(quan)臺(tai)內(nei)操作(zuo)，並請註意(yi)防(fang)護(hu)，所(suo)有(you)廢液及接(jie)觸(chu)過此(ci)細胞(bao)的器(qi)皿需要滅菌後(hou)方(fang)能丟棄。

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小(xiao)徐20180323