人腸上(shang)皮細胞 細胞株

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人腸上(shang)皮細胞

人腸上(shang)皮細胞|細胞株

人腸上(shang)皮細胞 【培(pei)養(yang)指(zhi)南(nan)】

對於(yu)貼(tie)壁細胞，傳(chuan)代(dai)可參考以下(xia)方(fang)法：

1. 棄(qi)去培(pei)養(yang)上(shang)清，用不(bu)含(han)鈣、鎂離子的PBS潤洗(xi)細胞1-2次。

2. 加2ml消(xiao)化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)於(yu)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，置於(yu)37℃培(pei)養(yang)箱中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2分鐘(zhong)，然(ran)後(hou)在顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀(guan)察Ⅱ型肺泡(pao)上(shang)皮細胞|細胞消化(hua)情(qing)況(kuang)，若細胞大(da)部(bu)分變(bian)圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落(luo)，迅速(su)拿(na)回(hui)操(cao)作臺(tai)，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下(xia)培(pei)養(yang)瓶(ping)後加少(shao)量(liang)培(pei)養(yang)基終(zhong)止(zhi)消化(hua)。

3. 按(an)6-8ml/瓶補(bu)加培(pei)養(yang)基，輕(qing)輕(qing)打勻(yun)後(hou)吸出(chu)，在1000RPM條(tiao)件下(xia)離(li)心4分鐘(zhong)，棄(qi)去上(shang)清液，補(bu)加1-2mL培(pei)養(yang)液後(hou)吹(chui)勻(yun)。

4. 將(jiang)細胞懸液按(an)1：2到(dao)1：5的比例分到(dao)新(xin)的含8ml培(pei)養(yang)基的新皿(min)中(zhong)或(huo)者瓶中(zhong)。

對(dui)於(yu)懸(xuan)浮細胞，傳(chuan)代(dai)可參考以下(xia)方(fang)法：

方(fang)法壹(yi)：收(shou)集(ji)細胞，1000RPM條件(jian)下(xia)離(li)心4分鐘(zhong)，棄(qi)去上(shang)清液，補(bu)加1-2mL培(pei)養(yang)液後(hou)吹(chui)勻(yun)，將(jiang)細胞懸液按(an)1：2到(dao)1：5的比例分到(dao)新(xin)的含8ml培(pei)養(yang)基的新皿(min)中(zhong)或(huo)者瓶中(zhong)。

方(fang)法二：可選擇(ze)半(ban)數換液方(fang)式(shi)，棄(qi)去半數培(pei)養(yang)基後，將(jiang)剩(sheng)余(yu)細胞懸起(qi)，將細胞懸液按(an)1：2到(dao)1：3的比例分到(dao)新(xin)的含8ml培(pei)養(yang)基的新皿(min)中(zhong)或(huo)者瓶中(zhong)。

人腸上(shang)皮細胞 【細胞凍存】

待細胞生長(chang)狀態良好時，可進(jin)行293/HEK-293細胞|細胞凍存。貼(tie)壁細胞凍存時，棄(qi)去培(pei)養(yang)基後加入(ru)少(shao)量(liang)胰酶(mei)，細胞變(bian)圓(yuan)脫(tuo)落(luo)後，加入(ru)約1ml含(han)血清(qing)的培(pei)養(yang)基後加入(ru)凍存管(guan)中(zhong)，再添加10%DMSO後(hou)進行凍存。懸(xuan)浮細胞凍存時，應將細胞收(shou)集(ji)，1000RPM條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心4分鐘(zhong)，少(shao)量(liang)保存上(shang)清液(防止(zhi)細胞吸走)，加入(ru)部(bu)分新(xin)鮮培(pei)養(yang)基，加入(ru)到(dao)凍(dong)存管(guan)中(zhong)，在(zai)凍(dong)存管(guan)中(zhong)加入(ru)10%DMSO後進(jin)行凍存。

人腸上(shang)皮細胞 【復蘇(su)的原則(ze)】

快(kuai)速(su)融(rong)化(hua)：必(bi)須(xu)將(jiang)凍存在(zai)-196℃液氮(dan)中(zhong)的細胞快(kuai)速(su)融(rong)化(hua)至37℃，使(shi)人腸上(shang)皮細胞|細胞外凍(dong)存時的冰(bing)晶迅速(su)融(rong)化(hua)，避免冰(bing)晶緩(huan)慢融(rong)化(hua)時進入(ru)細胞形(xing)成再結晶，對細胞造(zao)成損(sun)害。

人腸上(shang)皮細胞 乾思(si)|復旦(dan)細胞庫(ku)全(quan)國(guo)各(ge)地均(jun)可(ke)發貨(huo)，全(quan)國(guo)統(tong)壹(yi)價格(ge)，本(ben)公司出(chu)售的所有細胞僅供(gong)科(ke)研使(shi)用。

人腸上(shang)皮細胞 【註意(yi)事(shi)項】

乾(qian)思生物(wu)實驗(yan)室專業(ye)人士提醒廣(guang)大(da)科(ke)研實驗(yan)者，購買(mai)人腸上(shang)皮細胞培(pei)養(yang)，註意(yi)事(shi)項：

1. 收(shou)到(dao)細胞後，若發現(xian)幹(gan)冰(bing)已(yi)揮發幹(gan)凈(jing)、凍存管(guan)瓶蓋脫(tuo)落(luo)、破損(sun)及(ji)細胞有汙染，請立即與(yu)我們(men)。

2. 所(suo)有動(dong)物細胞均視為(wei)有潛在的生物(wu)危害性(xing)，必須(xu)在(zai)二級生物(wu)安全(quan)臺內(nei)操(cao)作，並(bing)請註意(yi)防護(hu)，所有廢液及(ji)接(jie)觸過此(ci)細胞的器皿(min)需要滅菌後(hou)方(fang)能丟棄(qi)。

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您(nin)的需求(qiu)，就是我們(men)的工(gong)作要求(qiu)，我們(men)會(hui)全(quan)心為(wei)您(nin)服(fu)務(wu)。

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小徐(xu)20180323