人主(zhu)動脈血(xue)管平滑(hua)肌(ji)細(xi)胞

迷人的實驗，放(fang)心(xin)的選(xuan)擇(ze)

我(wo)司細(xi)胞近3000種，來(lai)源(yuan)於(yu)美國(guo)ATCC,細(xi)胞都(dou)是經(jing)過(guo)嚴(yan)格質量控(kong)制(zhi)，在(zai)中國(guo)大陸努力(li)搭建(jian)正(zheng)牌細(xi)胞與(yu)國(guo)內廣(guang)大科(ke)研人員之間(jian)的溝通橋梁(liang)。為(wei)您(nin)提供(gong)人主(zhu)動脈血(xue)管平滑(hua)肌(ji)細(xi)胞外，還(hai)有(you)更多(duo)相(xiang)關實(shi)驗產品，標準品，細(xi)胞株和實(shi)驗技(ji)術服務(wu)等(deng)等前(qian)期(qi)後(hou)續服務(wu)。

人主(zhu)動脈血(xue)管平滑(hua)肌(ji)細(xi)胞的產品介紹(shao)

由(you)我(wo)司*銷(xiao)售。

細(xi)胞株

　　Q1. 培養用液(ye)pH對(dui)細(xi)胞生(sheng)長(chang)的影響(xiang)

　　由(you)於(yu)，大(da)多(duo)數細(xi)胞適(shi)宜pH為(wei)7.2~7.4，偏離(li)此(ci)範圍(wei)對(dui)細(xi)胞將產生有(you)害(hai)的影響(xiang)。各(ge)種細(xi)胞對(dui)pH的要求也(ye)不(bu)*相同，原(yuan)代(dai)培養細(xi)胞壹般(ban)對(dui)pH變動耐受差(cha)，無(wu)限(xian)細(xi)胞系(xi)耐受力(li)強。

　　但總(zong)體(ti)來(lai)說(shuo)，細(xi)胞耐酸性比耐堿(jian)性強壹些(xie)，偏酸環境(jing)中更利(li)於(yu)細(xi)胞生(sheng)長(chang)。因(yin)此(ci)，我(wo)們(men)在(zai)配(pei)制(zhi)培養用液(ye)時(shi)，可(ke)把液(ye)體的pH稍微(wei)調得(de)偏酸壹些(xie)。液(ye)體在(zai)經過(guo)0.10um或0.22um濾膜過(guo)濾時(shi)，溶(rong)液(ye)的pH還(hai)會向(xiang)上浮(fu)動0.2左右。

　　Q2. 液(ye)體培養基中谷氨(an)酰(xian)胺(an)的作用，及使(shi)用方(fang)法。

　　幾(ji)乎(hu)所有(you)的細(xi)胞對(dui)谷氨(an)酰(xian)胺(an)有(you)較高(gao)的要求，細(xi)胞需(xu)要(yao)谷氨(an)酰(xian)胺(an)合(he)成(cheng)蛋白(bai)質，在(zai)缺少(shao)谷氨(an)酰(xian)胺(an)時(shi)，細(xi)胞生(sheng)長(chang)不良(liang)而(er)死(si)亡(wang)。所(suo)以，各(ge)種培養液(ye)中都(dou)含有(you)較大量的谷氨(an)酰(xian)胺(an)。谷氨(an)酰(xian)胺(an)在(zai)溶(rong)液(ye)中很不穩定，應(ying)置-20 ?C冰凍(dong)保存，用前(qian)加(jia)入培養基中。加有谷氨(an)酰(xian)胺(an)的液(ye)體培養基4 ?C 冰箱(xiang)儲(chu)存兩周(zhou)以上(shang)時(shi)，應(ying)重(zhong)新(xin)加(jia)入(ru)原(yuan)來(lai)量的谷氨(an)酰(xian)胺(an)。基(ji)礎(chu)醫(yi)學細(xi)胞中(zhong)心(xin)在(zai)其服務(wu)項目(mu)中配(pei)制(zhi)分裝了高(gao)濃(nong)度（100倍）的谷氨(an)酰(xian)胺(an)溶(rong)液(ye)（1ml/支(zhi)）。每(mei)支(zhi)1ml的谷氨(an)酰(xian)胺(an)加(jia)到(dao)99ml*培養基中，其終(zhong)濃(nong)度為2mM/ml培養基。包裝為粉(fen)紅色，-24?C保存。

人肺巨細(xi)胞癌（PG）的高(gao)轉(zhuan)移亞(ya)系

　　Q3.細(xi)胞計(ji)數(shu)及存活(huo)測(ce)試
1、原(yuan)理：
(1)計算(suan)細(xi)胞數(shu)目(mu)可用血(xue)球(qiu)計(ji)數(shu)盤(pan)或是Coultercounter粒子(zi)計(ji)數器(qi)自(zi)動計數。
(2)血(xue)球(qiu)計(ji)數(shu)盤(pan)壹般(ban)有二(er)個(ge)chambers，每(mei)個(ge)chamber中(zhong)細(xi)刻9個(ge)1mm2大(da)正(zheng)方形，其中(zhong)4個(ge)角(jiao)落(luo)之正(zheng)方形再細(xi)刻16個(ge)小(xiao)格，深(shen)度均為0.1mm。當(dang)chamber上(shang)方(fang)蓋(gai)上(shang)蓋玻片(pian)後(hou)，每(mei)個(ge)大(da)正(zheng)方形之體積(ji)為(wei)1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使(shi)用時(shi)，計(ji)數每(mei)個(ge)大(da)正(zheng)方形內之細(xi)胞數(shu)目(mu)，乘(cheng)以稀(xi)釋倍(bei)數(shu)，再乘(cheng)以104，即(ji)為(wei)每(mei)ml中(zhong)之細(xi)胞數(shu)目(mu)。
(3)存活(huo)測(ce)試之步驟(zhou)為dyeexclusion，利(li)用染(ran)料(liao)會滲入(ru)死細(xi)胞中(zhong)而(er)呈色，而活(huo)細(xi)胞因(yin)細(xi)胞膜(mo)完(wan)整，染(ran)料(liao)無(wu)法滲入(ru)而不會呈(cheng)色。壹般(ban)使(shi)用藍(lan)色之trypan blue染(ran)料(liao)，如(ru)果細(xi)胞不(bu)易(yi)吸(xi)收trypan blue，則(ze)用紅色之Erythrosin bluish。計算(suan)細(xi)胞活(huo)率(lv)：活(huo)細(xi)胞數(shu)/(活(huo)細(xi)胞數(shu)+死(si)細(xi)胞數(shu))×100%。計(ji)數應(ying)在(zai)臺盼(pan)蘭染(ran)色後(hou)數分鐘內(nei)完(wan)成(cheng)，隨時(shi)間(jian)延長，部分活(huo)細(xi)胞也(ye)開(kai)始(shi)攝取(qu)染(ran)料(liao);因(yin)為(wei)臺(tai)盼(pan)蘭對(dui)蛋白質有(you)很(hen)強的親(qin)和(he)力(li)，用不(bu)含血(xue)清的稀釋液(ye)，可以使(shi)染(ran)色計數(shu)更為(wei)準確(que)。

　人胚腎293細(xi)胞

　　Q4.細(xi)胞特性
在(zai)細(xi)胞培養之前(qian)，我(wo)們要了(le)解(jie)壹下妳(ni)所(suo)要養(yang)細(xi)胞的基本(ben)特性，這(zhe)點可以從細(xi)胞的產品說(shuo)明(ming)書或者(zhe)從ATCC細(xi)胞庫(ku)查詢(xun)。除此之外我們(men)還(hai)要(yao)知(zhi)道每(mei)管細(xi)胞的數量(liang)，建(jian)議分裂或傳(chuan)代(dai)的比例(li)，和(he)已知(zhi)細(xi)胞的傳(chuan)代(dai)代(dai)次等信息。

　　Q5.準備培養基
復蘇細(xi)胞時(shi)需(xu)要準備合(he)適(shi)的培養基，血(xue)清和(he)細(xi)胞生(sheng)長(chang)所需的添加(jia)劑(ji)。大部分培養細(xi)胞所(suo)用的培養體系，可以在(zai)訂(ding)購細(xi)胞系(xi)時(shi)獲(huo)得(de)。
雖然大多數細(xi)胞系(xi)可(ke)以在(zai)不止壹種培養基中生長，但是(shi)當(dang)培養基改變時(shi)，細(xi)胞的性質(zhi)也(ye)會變化。因(yin)此(ci)，使(shi)用細(xi)胞庫(ku)推(tui)薦的培養基來(lai)培養細(xi)胞會獲(huo)得(de)的效果(guo)。

　　Q6.開(kai)啟(qi)凍(dong)存管
1.準備壹個(ge)培養瓶(ping)，加入(ru)適(shi)宜細(xi)胞培養的培養基，液(ye)體體積(ji)按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書的推(tui)薦配(pei)置，並平衡(heng)培養基的溫(wen)度和pH（CO2）。　
2.在(zai)37℃水浴中(zhong)或細(xi)胞的正(zheng)常生長(chang)溫(wen)度下將凍(dong)存管輕輕搖動(dong)。解(jie)凍(dong)要快(kuai)，約(yue)2分鐘或直到(dao)冰晶(jing)融化即(ji)可(ke)。
3.從水浴中(zhong)取(qu)出(chu)凍(dong)存管並用浸(jin)泡(pao)或噴灑(sa)70%乙醇的方式(shi)來(lai)消毒(du)。進(jin)壹步(bu)的操作(zuo)均(jun)需在(zai)無菌操(cao)作臺中(zhong)嚴(yan)格無菌條(tiao)件(jian)下進(jin)行(xing)。
4.擰開(kai)凍(dong)存管的管帽並將內容(rong)物(wu)轉(zhuan)移到(dao)壹個(ge)含(han)有(you)9 ml推(tui)薦培養基的無菌(jun)離(li)心(xin)管中。通過(guo)溫(wen)和離(li)心(xin)（125×g 10 min）除去(qu)冷凍(dong)保護(hu)劑(ji)（DMSO）。棄(qi)去(qu)上清，並用1或2 ml*培養基重懸細(xi)胞。將這(zhe)些(xie)細(xi)胞懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移到(dao)含(han)有*培養基的培養瓶(ping)中並輕輕搖動(dong)以*混(hun)勻。
5.培養24小(xiao)時(shi)後(hou)檢查細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)並在(zai)需要時(shi)進(jin)行(xing)傳(chuan)代(dai)。

　　Q7. 培養用液(ye)pH對(dui)細(xi)胞生(sheng)長(chang)的影響(xiang)

　　由(you)於(yu)，大(da)多(duo)數細(xi)胞適(shi)宜pH為(wei)7.2~7.4，偏離(li)此(ci)範圍(wei)對(dui)細(xi)胞將產生有(you)害(hai)的影響(xiang)。各(ge)種細(xi)胞對(dui)pH的要求也(ye)不(bu)*相同，原(yuan)代(dai)培養細(xi)胞壹般(ban)對(dui)pH變動耐受差(cha)，無(wu)限(xian)細(xi)胞系(xi)耐受力(li)強。

　　但總(zong)體(ti)來(lai)說(shuo)，細(xi)胞耐酸性比耐堿(jian)性強壹些(xie)，偏酸環境(jing)中更利(li)於(yu)細(xi)胞生(sheng)長(chang)。因(yin)此(ci)，我(wo)們(men)在(zai)配(pei)制(zhi)培養用液(ye)時(shi)，可(ke)把液(ye)體的pH稍微(wei)調得(de)偏酸壹些(xie)。液(ye)體在(zai)經過(guo)0.10um或0.22um濾膜過(guo)濾時(shi)，溶(rong)液(ye)的pH還(hai)會向(xiang)上浮(fu)動0.2左右。

　　質量可(ke)靠，售後(hou)有保(bao)障（編輯(ji)：tanxi）