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          白(bai)介素8ELISA試劑盒 這些妳必須知(zhi)道!

          更新時間:2018-10-19      點(dian)擊次(ci)數:419

          白(bai)介素8ELISA試劑盒 這些妳必須知(zhi)道!

          ●分(fen)子實驗(yan)中常(chang)用(yong)生化(hua)試劑原理匯總● 1.溶菌酶:它是糖苷(gan)水(shui)解(jie)酶,能(neng)水(shui)解(jie)菌體細(xi)胞壁(bi)的主(zhu)要化(hua)學成分(fen)肽聚(ju)糖中的β-1,4糖(tang)苷(gan)鍵(jian),因(yin)而具有溶菌的作用。當溶液中pH小(xiao)於8時(shi),溶菌酶作用受(shou)到(dao)抑(yi)制。葡(pu)萄(tao)糖(tang):增(zeng)加(jia)溶液的粘(zhan)度(du),維持滲透(tou)壓(ya),防(fang)止(zhi)DNA受(shou)機(ji)械(xie)剪(jian)切力(li)作用而降(jiang)解(jie)。 EDTA:(1)螯合(he)Mg2+、Ca2+等(deng)金屬(shu)離(li)子,抑(yi)制脫(tuo)氧核(he)糖(tang)核(he)酸酶對(dui)DNA的降(jiang)解(jie)作用(DNase作用時需(xu)要壹(yi)定(ding)的金屬(shu)離(li)子作輔(fu)基(ji));(2)EDTA的存(cun)在(zai),有利於溶菌酶的作用,因(yin)為溶菌酶的反(fan)應(ying)要求(qiu)有較低(di)的離(li)子強(qiang)度(du)的環(huan)境。 2.NaOH-SDS液: NaOH:核酸在(zai)pH大(da)於5,小(xiao)於9的溶液中,是穩(wen)定(ding)的。但當pH>12或(huo)pH<3時,就會引(yin)起(qi)雙(shuang)鏈之間氫鍵(jian)的解(jie)離(li)而變(bian)性。在(zai)溶液II中的NaOH濃度為(wei)0.2mo1/L,加(jia)抽(chou)提液時,該系(xi)統(tong)的pH就高達12.6,因(yin)而促使染(ran)色體DNA與(yu)質(zhi)粒(li)DNA的變(bian)性。 SDS:SDS是離(li)子型(xing)表(biao)面活(huo)性劑。它主(zhu)要功能(neng)有:(1)溶解(jie)細(xi)胞膜上的脂(zhi)質(zhi)與(yu)蛋(dan)白(bai),因(yin)而溶解(jie)膜蛋(dan)白(bai)而(er)破壞細(xi)胞膜。(2)解(jie)聚細(xi)胞中的核(he)蛋(dan)白(bai)。(3)SDS能(neng)與蛋(dan)白(bai)質(zhi)結合(he)成為R-O-SO3-…R+-蛋(dan)白(bai)質(zhi)的復(fu)合(he)物(wu),使蛋(dan)白(bai)質(zhi)變(bian)性而沈(chen)澱下來。但是SDS能(neng)抑(yi)制核(he)糖(tang)核酸酶的作用,所以在(zai)以後的提取過(guo)程(cheng)中,必(bi)須(xu)把它去(qu)除(chu)幹凈,防(fang)止(zhi)在(zai)下壹(yi)步操(cao)作中(用(yong)RNase去(qu)除(chu)RNA時(shi))受(shou)到(dao)幹擾(rao)。 3. 3mol/L NaAc(pH4.8)溶液: NaAc的水(shui)溶液呈堿性,為了調(tiao)節pH至(zhi)4.8,必須(xu)加(jia)入大(da)量的冰(bing)醋(cu)酸。所(suo)以該溶液實際(ji)上是NaAc-HAc的緩沖液(ye)。用pH4.8的NaAc溶液是為了把pH12.6的抽(chou)提液,調回(hui)pH至(zhi)中性,使變(bian)性的質(zhi)粒(li)DNA能(neng)夠復(fu)性,並能(neng)穩(wen)定(ding)存在(zai)。而高(gao)鹽的3mol/L NaAc有利於變(bian)性的大(da)分(fen)子染色體DNA、RNA以及SDS-蛋(dan)白(bai)復(fu)合(he)物(wu)凝(ning)聚(ju)而沈(chen)澱之。前(qian)者是因(yin)為中和(he)核(he)酸(suan)上的電(dian)荷(he),減少相斥力(li)而(er)互相聚(ju)合(he),後(hou)者是因(yin)為鈉鹽與SDS-蛋(dan)白(bai)復(fu)合(he)物(wu)作用後,能(neng)形成較小(xiao)的鈉(na)鹽形式(shi)復合(he)物(wu),使沈(chen)澱更*。 4.為什(shen)麽(me)用(yong)無水(shui)乙醇(chun)沈澱DNA?用無水(shui)乙醇(chun)沈澱DNA,這是實驗(yan)中常(chang)用(yong)的沈(chen)澱DNA的方法(fa)。乙醇(chun)的優點(dian)是可以任(ren)意比(bi)和水(shui)相混(hun)溶,乙醇(chun)與核(he)酸不(bu)會起(qi)任(ren)何化(hua)學反應,對(dui)DNA很安全(quan),因(yin)此是理想(xiang)的沈(chen)澱劑。 DNA溶液是DNA以水(shui)合(he)狀態(tai)穩(wen)定(ding)存在(zai),當加(jia)入乙醇(chun)時,乙醇(chun)會奪去DNA周(zhou)圍的水(shui)分(fen)子,使DNA失水(shui)而(er)易於聚(ju)合(he)。壹(yi)般(ban)實(shi)驗(yan)中,是加(jia)2倍體積的無(wu)水(shui)乙醇(chun)與DNA相混(hun)合(he),其(qi)乙醇(chun)的終含量占(zhan)67%左(zuo)右。因(yin)而也可改用(yong)95%乙醇(chun)來替代無水(shui)乙醇(chun)(因(yin)為無水(shui)乙醇(chun)的價格(ge)遠遠比(bi)95%乙醇(chun)昂貴)。但是加(jia)95%的乙醇(chun)使總體積增(zeng)大(da),而DNA在(zai)溶液中有壹定(ding)程度(du)的溶解(jie),因(yin)而DNA損(sun)失也(ye)增(zeng)大(da),尤其(qi)用多(duo)次乙醇(chun)沈澱時,就會影(ying)響(xiang)收(shou)得(de)率(lv)。折中的做(zuo)法(fa)是初次(ci)沈澱DNA時可用95%乙醇(chun)代替無水(shui)乙酵(jiao),後(hou)的沈(chen)澱步驟要使用(yong)無水(shui)乙醇(chun)。也可以用0.6倍體積的異(yi)丙醇(chun)選擇性沈澱DNA。壹般在(zai)室溫(wen)下放置15-30分(fen)鐘即可。

          白(bai)介素8ELISA試劑盒

          人類(lei)成纖(xian)維細(xi)胞(多(duo)種種(zhong)屬(shu))實(shi)驗(yan)科研認(ren)可品牌

          白(bai)介素8ELISA試劑盒

          檢(jian)測(ce)範(fan)圍:歡(huan)迎QQ或(huo)電(dian)話(hua)索(suo)取(qu)原版(ban)說明(ming)書(shu).
          產(chan)品(pin)規(gui)格(ge):96T/48T。
          主(zhu)要成分(fen):酶標板(ban),試劑,標準品等(deng)
          經營(ying)種類(lei):進(jin)口(kou)分(fen)裝和(he)原裝、國(guo)產
          性狀:盒裝液(ye)體
          試劑盒保存:2-8℃低溫保存。
          標本:血清(qing)、細(xi)胞上清(qing)液(ye)、尿(niao)液(ye)、體液(ye)、灌洗(xi)液、腦脊(ji)髓(sui)、心房水(shui)、胸(xiong)房水(shui)、組(zu)織(zhi)等(deng)。
          ELISA常用(yong)的方法(fa):雙(shuang)抗(kang)體夾心(xin)法(fa)、間接法(fa)、競(jing)爭法(fa)以及BAS-ELISA等(deng)。
          預期應用:ELISA法(fa)定(ding)量(liang)測(ce)定血(xue)清(qing)、、細(xi)胞培(pei)養上清(qing)或(huo)其(qi)它相關(guan)生物(wu)液(ye)體中的含量。

           

          白(bai)介素8ELISA試劑盒

          人胚(pei)胎腸(chang)粘膜組(zu)織(zhi)來源(yuan)細(xi)胞

          ●控制和(he)消(xiao)除(chu)誤(wu)差(cha)的方法(fa):● 誤(wu)差(cha)的大(da)小(xiao),直接關系到(dao)分(fen)析結果的精密(mi)度和(he)準確度。減少誤差(cha)的措(cuo)施有如(ru)下幾種: 1、正確選取(qu)樣(yang)品(pin)量(liang)樣品量(liang)的多(duo)少與分(fen)析結果的準確度關系(xi)很大(da)。在(zai)常量(liang)分(fen)析中,滴定量(liang)或(huo)重量過(guo)多(duo)或(huo)過(guo)少都(dou)直接影(ying)響(xiang)準確度。在(zai)比(bi)色分(fen)析中,含量與(yu)吸(xi)光度之間往(wang)往(wang)只在(zai)壹定(ding)範(fan)圍內呈線(xian)性關系(xi)。這就要求(qiu)測(ce)定時(shi)讀(du)數在(zai)此範(fan)圍內,以提高準確度。通過(guo)增(zeng)減取樣量或(huo)改變(bian)稀(xi)釋倍數(shu)可以達到(dao)此目(mu)的。 2、增(zeng)加(jia)平行測(ce)定次(ci)數(shu)減少偶然(ran)誤差(cha)測(ce)定次(ci)數(shu)越多(duo),則(ze)平均值就越接(jie)近(jin)真實值,偶然(ran)誤差(cha)亦(yi)可抵(di)消(xiao),所以分(fen)析結果就越可靠。壹(yi)般要求(qiu)每(mei)個(ge)樣(yang)品的測(ce)定次(ci)數(shu)不(bu)應少於兩次,如(ru)要更(geng)的測(ce)定,分(fen)析次(ci)數應(ying)更多(duo)些。 3、對(dui)照試驗(yan)對(dui)照試驗(yan)是檢(jian)查系(xi)統誤(wu)差(cha)的有效(xiao)方法(fa)。在(zai)進行對(dui)照試驗(yan)時,常常(chang)用(yong)已知(zhi)結果的試樣與(yu)被(bei)測(ce)試樣壹(yi)起(qi)按*相同的步驟操(cao)作,或由不(bu)同單(dan)位(wei)、不(bu)同人(ren)員(yuan)進行測(ce)定,後(hou)將(jiang)結果進(jin)行比(bi)較。這(zhe)樣可以抵(di)消(xiao)許多不(bu)明(ming)了因(yin)素引(yin)起(qi)的誤(wu)差(cha)。 4、空白(bai)試驗(yan)在(zai)進行樣品(pin)測(ce)定過(guo)程(cheng)的同時(shi),采(cai)用(yong)*相同的操(cao)作方法(fa)和(he)試劑,惟獨不(bu)加(jia)被測(ce)定的物(wu)質(zhi),進(jin)行空白(bai)試驗(yan)。在(zai)測(ce)定值中扣(kou)除(chu)空(kong)白(bai)值,就可以抵(di)消(xiao)由於試劑中的雜(za)質(zhi)幹擾(rao)等(deng)因(yin)素造(zao)成的系(xi)統(tong)誤(wu)差(cha)。 5、校正儀(yi)器和標定溶液各種計(ji)量測(ce)試儀(yi)器,如(ru)實驗(yan)室電(dian)子天平、旋光儀(yi)、分(fen)光光(guang)度計(ji),以及移(yi)液(ye)管、滴定管、容(rong)量(liang)瓶等(deng),在(zai)的分(fen)析中必(bi)須(xu)進(jin)行校準,並在(zai)計算(suan)時采(cai)用(yong)較正值。各種(zhong)標準溶液(尤其(qi)是容易變(bian)化(hua)的試劑)應(ying)按規(gui)定(ding)定(ding)期標定,以保證標準溶液的濃度和(he)質(zhi)量(liang)。 6、嚴格(ge)遵(zun)守(shou)操(cao)作規程分(fen)析方法(fa)所(suo)規(gui)定(ding)的技(ji)術條件要嚴格(ge)遵(zun)守(shou)。經國(guo)家(jia)或(huo)主(zhu)管部(bu)門(men)規(gui)定的分(fen)析方法(fa),在(zai)未經有關部(bu)門(men)同意(yi)下(xia),不(bu)應隨意改動。

          高(gao)品(pin)質(zhi)實(shi)驗(yan)ELISA試劑盒挑選,點(dian)擊進(jin)入人腎(shen)透(tou)明(ming)細(xi)胞癌(ai)細(xi)胞查(zha)看更(geng)多(duo)。

          白(bai)介素8ELISA試劑盒

          編輯:小(xiao)檀(tan)20181019

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