hFOB 1.19細胞_選(xuan)購指(zhi)南(nan)

　　細胞作(zuo)為(wei)生(sheng)命(ming)組(zu)成(cheng)的zui小(xiao)單元，研(yan)究其相關的生(sheng)物(wu)行為(wei)及(ji)其規律(lv)與本(ben)質，對於揭示(shi)生(sheng)命(ming)的奧秘(mi)，探(tan)索疾(ji)病(bing)的機理(li)與治療(liao)手(shou)段(duan)，提高人(ren)類的生(sheng)存壽命(ming)與質量(liang)，都有(you)著重(zhong)要的意義(yi)。對(dui)細胞的研(yan)究是(shi)壹(yi)個(ge)復雜的工程，細胞在(zai)人(ren)體(ti)內(nei)處(chu)於復雜的微(wei)環(huan)境之(zhi)中，包括(kuo)溫(wen)度(du)、氧(yang)氣濃度(du)、生(sheng)物(wu)因子(zi)濃(nong)度(du)、機械(xie)作(zuo)用(yong)、細胞間相互(hu)作(zuo)用(yong)、細胞基(ji)質間相互(hu)作(zuo)用(yong)等(deng)，同(tong)時(shi)，細胞體(ti)積(ji)微(wei)小(xiao)、種類多樣，在細胞水(shui)平(ping)進(jin)行細胞識(shi)別(bie)、代謝(xie)物(wu)檢測(ce)、內(nei)部(bu)組(zu)分(fen)分(fen)析(xi)、細胞結(jie)構(gou)與功能表征、細胞間相互(hu)作(zuo)用(yong)分(fen)析(xi)等工作(zuo)也(ye)都(dou)有(you)著(zhe)很(hen)大的難度(du)。hFOB 1.19細胞，上(shang)海乾(qian)思(si)生(sheng)物(wu)公(gong)司細胞近(jin)3000種，來源(yuan)於美(mei)國ATCC,細胞都(dou)是經(jing)過嚴(yan)格(ge)質(zhi)量(liang)控(kong)制，在(zai)中國大陸努(nu)力搭(da)建(jian)正(zheng)牌細胞與國內(nei)廣大科研(yan)人(ren)員(yuan)之間的溝(gou)通橋梁。為(wei)您提供hFOB 1.19細胞外(wai)，還有更(geng)多相關實驗(yan)產(chan)品(pin)，標準品(pin)，細胞株(zhu)和(he)實驗(yan)技術服務(wu)等等(deng)前期(qi)後(hou)續(xu)服務(wu)。

　　1. hFOB 1.19細胞液(ye)體培(pei)養(yang)基(ji)的保(bao)存是冷(leng)藏(zang)好(hao)？還是冷(leng)凍(dong)好(hao)？

　　要(yao)冷(leng)藏(zang)！！因為(wei)液(ye)體(ti)培(pei)養基(ji)經冷(leng)凍(dong)後再(zai)經(jing)溶(rong)化(hua)時(shi)，其溶液的pH值(zhi)會發(fa)生(sheng)改(gai)變，溶(rong)液往(wang)往變堿(jian)，某些成分(fen)溶(rong)解也會受到(dao)影響對(dui)細胞生(sheng)長不(bu)利(li)。故液體培(pei)養基(ji)壹(yi)定(ding)要存放在(zai)冷(leng)藏(zang)箱中，通常液體(ti)培(pei)養基(ji)在冷(leng)藏(zang)條(tiao)件下(xia)可存放6個(ge)月(yue) ~ 壹(yi)年(nian)。

　　2.hFOB 1.19細胞 液(ye)體培(pei)養(yang)基(ji)中谷氨酰胺(an)的作(zuo)用(yong)，及(ji)使(shi)用(yong)方法。

　　幾(ji)乎(hu)所有(you)的細胞對(dui)谷氨酰胺(an)有較(jiao)高的要求，細胞需(xu)要谷氨酰胺(an)合(he)成(cheng)蛋(dan)白(bai)質(zhi)，在缺(que)少(shao)谷氨酰胺(an)時(shi)，細胞生(sheng)長不(bu)良(liang)而死亡。所以(yi)，各種培養液中都含有較(jiao)大量(liang)的谷氨酰胺(an)。谷氨酰胺(an)在溶(rong)液中很(hen)不(bu)穩(wen)定(ding)，應(ying)置(zhi)-20 ?C冰(bing)凍(dong)保(bao)存，用前加入培(pei)養(yang)基(ji)中。加有谷氨酰胺(an)的液體(ti)培(pei)養基(ji)4 ?C 冰箱儲存兩周(zhou)以上(shang)時(shi)，應(ying)重(zhong)新(xin)加入原來(lai)量(liang)的谷氨酰胺(an)。基(ji)礎醫學細胞中心在其服務(wu)項目中配(pei)制(zhi)分(fen)裝(zhuang)了高(gao)濃(nong)度(du)（100倍(bei)）的谷氨酰胺(an)溶液(ye)（1ml/支）。每支(zhi)1ml的谷氨酰胺(an)加到(dao)99ml*培(pei)養基(ji)中，其終(zhong)濃度(du)為(wei)2mM/ml培(pei)養(yang)基(ji)。包裝(zhuang)為(wei)粉(fen)紅色(se)，-24?C保(bao)存。

　　3. hFOB 1.19細胞 培(pei)養用(yong)液(ye)pH對(dui)細胞生(sheng)長的影響

　　由於，大多數細胞適(shi)宜pH為(wei)7.2~7.4，偏(pian)離(li)此範(fan)圍(wei)對(dui)細胞將(jiang)產(chan)生(sheng)有(you)害(hai)的影響。各種細胞對(dui)pH的要求也(ye)不(bu)*相同(tong)，原代(dai)培養(yang)細胞壹(yi)般(ban)對(dui)pH變(bian)動(dong)耐受差，無(wu)限細胞系(xi)耐受(shou)力(li)強(qiang)。

　　但(dan)總(zong)體(ti)來說，細胞耐(nai)酸(suan)性比(bi)耐堿(jian)性(xing)強(qiang)壹(yi)些，偏酸(suan)環(huan)境中更利於細胞生(sheng)長。因此(ci)，我們(men)在(zai)配(pei)制(zhi)培養用液時(shi)，可(ke)把液(ye)體(ti)的pH稍(shao)微(wei)調得(de)偏(pian)酸(suan)壹(yi)些。液體在經(jing)過0.10um或0.22um濾膜過濾時(shi)，溶(rong)液的pH還會向(xiang)上浮動(dong)0.2左(zuo)右。

　　4.hFOB 1.19細胞 細胞傳(chuan)代消(xiao)化(hua)時(shi)所用(yong)胰酶濃(nong)度(du)越高(gao)越好(hao)嗎(ma)？

　　不(bu)見(jian)得！因為(wei)胰蛋(dan)白(bai)酶(mei)溶液的消(xiao)化(hua)能力是(shi)和(he)溶液(ye)的pH、溫度(du)、胰酶濃(nong)度(du)及(ji)溶(rong)液(ye)中是否含有(you)Ca++, Mg++離(li)子(zi)和(he)血清等(deng)因素(su)有關。通常情況下(xia)，pH 8.0 , 溫度(du) 37 oC 其作(zuo)用(yong)能力zui強(qiang)。另外(wai)，鈣、鎂(mei)離(li)子(zi)及(ji)血清均(jun)能大大降(jiang)低(di)其消(xiao)化(hua)能力。我們(men)每次進(jin)行傳(chuan)代消(xiao)化(hua)前，壹(yi)定(ding)要用D-Hanks液(ye)或(huo)PBS液(ye)反(fan)復沖(chong)洗(xi)細胞培(pei)養瓶，以便(bian)於將(jiang)含血清的培養(yang)基(ji)沖(chong)洗(xi)幹凈，這樣就(jiu)能大大提高消(xiao)化(hua)液的消(xiao)化(hua)能力。本(ben)中心通常使用(yong)的消(xiao)化(hua)液濃度(du)為(wei)：

　　（1）０.０５％胰蛋(dan)白(bai)酶(mei)＋０.０２％ＥＤＴＡ；

　　（2）０.２５％胰蛋(dan)白(bai)酶(mei)＋０.０３％ＥＤＴＡ。

　　（3）0.25% 胰蛋(dan)白(bai)酶(mei)

　　溶(rong)液(ye)ｐＨ８.０～９.０；使(shi)用Ｄ－Ｈａｎｋ液配(pei)制(zhi)。

　　多數細胞傳(chuan)代消(xiao)化(hua)可使用(yong)０.０５％胰蛋(dan)白(bai)酶(mei)＋０.０２％ＥＤＴＡ這種消(xiao)化(hua)液。

　　購買(mai)上海(hai)乾思生(sheng)物(wu)細胞註意事項(xiang)（乾(qian)思生(sheng)物(wu)）發(fa)布(bu)

　　壹(yi)、客(ke)戶(hu)收到(dao)細胞先(xian)不(bu)開蓋(gai)，放在(zai)培(pei)養箱靜置若(ruo)幹小(xiao)時(shi)後(hou)（看細胞密(mi)度(du)而定(ding)）在倒置顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察細胞生(sheng)長情況，並對細胞進(jin)行不(bu)同(tong)倍(bei)數拍(pai)照（建(jian)議(yi)受收細胞時(shi)的培養(yang)基(ji)拍(pai)壹(yi)張(zhang)照片(pian)，觀察培(pei)養(yang)基(ji)的顏色和(he)是否(fou)有(you)漏(lou)液情(qing)況，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)拍(pai)細胞100X，200X各壹(yi)張(zhang)），排除細胞本(ben)身汙染(ran)的情況；

　　收到(dao)細胞未(wei)開封(feng)，出現(xian)汙染狀(zhuang)況我們(men)負(fu)責(ze)免(mian)費(fei)發(fa)送(song)壹(yi)株(zhu)細胞。

　　二(er)、如(ru)為(wei)貼(tie)壁(bi)細胞，請(qing)在顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察細胞密(mi)度(du)：

　　1. 未(wei)超(chao)過80%匯合(he)度(du)時(shi)，用(yong)75%酒精（建(jian)議(yi)配(pei)置(zhi)75%酒精的水(shui)也是(shi)滅(mie)菌超(chao)純水(shui)，噴灑(sa)整個(ge)瓶消(xiao)毒(du)後(hou)放到(dao)超(chao)菌臺(tai)內(nei)，嚴(yan)格(ge)無(wu)菌操作(zuo)；然(ran)後(hou)打開蓋(gai)子(zi)，先(xian)把培養基(ji)吸出10ml左(zuo)右，放在(zai)離(li)心管(guan)裏(li)，然(ran)後(hou)瓶口(kou)過火（嚴(yan)禁直(zhi)接傾倒），這樣可(ke)以(yi)保(bao)證不(bu)汙(wu)染，再(zai)用(yong)10ml的移(yi)液(ye)管(guan)，將(jiang)剩余(yu)的培液(ye)全(quan)部(bu)吸出，放於離(li)心管(guan)中，培養瓶中只剩余10ml左(zuo)右培(pei)液(ye)就可(ke)以了。培養16hr(時(shi)間根(gen)據細胞生(sheng)長情況調整）之(zhi)後，傳(chuan)代(dai)或(huo)者凍(dong)存。

　　2. 超(chao)過80%匯合(he)度(du)時(shi)，請(qing)按細胞培(pei)養條(tiao)件傳(chuan)代(dai)培(pei)養。具體(ti)步(bu)驟(zhou)如(ru)下(xia)：

　　1) 棄(qi)去(qu)培養(yang)液，用(yong)3ml PBS（不(bu)含(han)鈣，鎂(mei)離(li)子(zi)）洗(xi)1-2次；

　　2) 加1ml消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於T25培養(yang)瓶中，倒轉放於37度(du)培養(yang)箱1-3分(fen)鐘(zhong)預熱(re)，然(ran)後(hou)又(you)將(jiang)培養(yang)瓶倒轉大約30秒後，在倒置顯(xian)微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察細胞消(xiao)化(hua)情況，若細胞大部(bu)分(fen)變(bian)圓(yuan)分(fen)散，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下(xia)培養培(pei)養瓶，細胞隨即脫落下(xia)來；

　　3) 加入6-8ml*培(pei)養(yang)基(ji)，吸出，分(fen)到(dao)新(xin)的培養(yang)瓶中，按要求分(fen)瓶。

　　三(san)、如(ru)為(wei)懸(xuan)浮(fu)細胞，吸出培(pei)養液(ye)，1000轉(zhuan)/分(fen)鐘(zhong)離(li)心5分(fen)鐘(zhong)，吸出上(shang)清，管(guan)底(di)細胞用(yong)新(xin)鮮培養(yang)基(ji)懸(xuan)浮(fu)細胞後(hou)移(yi)回(hui)培養瓶。

　　註意：換(huan)液時(shi)壹(yi)半(ban)用(yong)我們(men)的培養(yang)基(ji)，壹(yi)半(ban)用(yong)妳(ni)們(men)的，以免(mian)細胞不(bu)適(shi)應(ying)而造成生(sheng)長不(bu)好(hao)。

　　四(si)、細胞出(chu)現問(wen)題(ti)，可(ke)重(zhong)發(fa)的情況有哪(na)些？判定(ding)標準是什麽？

　　（1）細胞運(yun)輸途(tu)中遭(zao)遇(yu)的各種問題，細胞丟(diu)失(shi)、破(po)損(sun)、漏液(ye)等，重(zhong)發(fa)；

　　（2）凍(dong)存的細胞復蘇(su)後，絕大多數細胞未(wei)存活，重(zhong)發(fa)；

　　（3）存活的細胞靜(jing)置24小(xiao)時(shi)後(hou)，絕大多數細胞未(wei)存活，重(zhong)發(fa)；

　　（4）凍(dong)存的細胞復蘇(su)後或存活的細胞靜(jing)置4小(xiao)時(shi)後(hou)並且(qie)未(wei)開封(feng)，出現(xian)汙染，重(zhong)發(fa)；

　　（5）視(shi)具體(ti)情(qing)況而定(ding)。

　　五(wu)、細胞出(chu)現問(wen)題(ti)，不(bu)予(yu)以重(zhong)發(fa)的情況有哪(na)些？

　　（1）客(ke)戶(hu)造成細胞汙(wu)染，不(bu)重(zhong)發(fa)；

　　（2）客(ke)戶(hu)不(bu)正(zheng)確操作(zuo)致(zhi)細胞狀(zhuang)態不(bu)好(hao)，不(bu)重(zhong)發(fa)；

　　（3）細胞狀(zhuang)態不(bu)好(hao)，未(wei)提供細胞培(pei)養前3天照片(pian)的，不(bu)重(zhong)發(fa)；

　　（4）細胞培(pei)養時(shi)經(jing)其它(ta)處(chu)理(li)的，不(bu)重(zhong)發(fa)；

　　（5）細胞收到(dao)2天內(nei)，未(wei)告(gao)知(zhi)，不(bu)重(zhong)發(fa)；

　　（6）視(shi)具體(ti)情(qing)況而定(ding)。

　　六(liu)、售後服務(wu)政策

　　Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等(deng)品(pin)牌；部(bu)分(fen)產(chan)品(pin)現貨(huo)，超(chao)低比價(jia)，另(ling)常備(bei)  Trizol  DMSO  lipo2000    lipo3000  SC-2004  SC-2005常備(bei)現貨(huo) ；貨(huo)期(qi)短(duan)，價(jia)格(ge)優，售後齊全(quan)。

　　細胞汙(wu)染問(wen)題(ti)，請(qing)在收到(dao)產(chan)品(pin)48小(xiao)時(shi)內(nei)，給我們(men)提出真(zhen)實的實驗(yan)結(jie)果；細胞活(huo)性問(wen)題(ti)，請(qing)在收到(dao)產(chan)品(pin)7天內(nei)給我們(men)提出真(zhen)實的實驗(yan)結(jie)果，我們(men)調(tiao)查核實後予免(mian)費(fei)調(tiao)換(huan)，不(bu)收取(qu)任(ren)何費用。

　　需(xu)要(yao)客(ke)戶(hu)提供hFOB 1.19細胞細胞培(pei)養說明、細胞操作(zuo)處(chu)理(li)方法、細胞質(zhi)量(liang)問題(ti)反(fan)饋(kui)表。

　　如(ru)用(yong)戶(hu)收到(dao)細胞8-30天之內(nei)，因處(chu)理(li)不(bu)當(dang)造成細胞死亡或汙(wu)染(ran)，我公司(si)將(jiang)優惠(hui)價(jia)重(zhong)新(xin)提供壹(yi)株(zhu)原細胞

　　hFOB 1.19細胞質(zhi)量(liang)可靠，售(shou)後有保(bao)障

　　★我庫(ku)細胞近(jin)3000種，來源(yuan)於美(mei)國ATCC,細胞都(dou)是經(jing)過嚴(yan)格(ge)質(zhi)量(liang)控(kong)制。

　　凍(dong)存細胞時(shi)間為(wei)5-7個(ge)工作(zuo)日，活(huo)細胞為(wei)7-15個(ge)工作(zuo)日。

　　★由於細胞庫(ku)現(xian)有(you)細胞類目多，為(wei)了(le)不(bu)出(chu)現混亂錯誤，需要(yao)了(le)解(jie)hFOB 1.19細胞相關細胞價(jia)格(ge)及(ji)詳(xiang)細資料請(qing)老(lao)師，對(dui)您造成的不(bu)便(bian)還請(qing)見諒(liang)！

（編輯(ji)：tanxi）