CHO倉鼠(shu)卵(luan)巢細胞(bao)是(shi)生物(wu)技(ji)術(shu)中(zhong)常用(yong)的(de)哺(bu)乳(ru)動物(wu)細(xi)胞(bao)系之壹,廣(guang)泛(fan)應用(yong)於(yu)重組(zu)蛋(dan)白的(de)生(sheng)產(chan)。因其(qi)優(you)異的(de)生物(wu)學特性(xing)、較(jiao)高的生(sheng)產(chan)能(neng)力(li)以(yi)及(ji)對(dui)哺(bu)乳(ru)動物(wu)藥(yao)物(wu)的(de)生(sheng)產(chan)支持,成(cheng)為(wei)了(le)大規模生產治(zhi)療性(xing)蛋(dan)白、疫(yi)苗(miao)、單克(ke)隆(long)抗(kang)體等(deng)生物(wu)制(zhi)品(pin)的(de)主要(yao)平臺(tai)。
1、單克(ke)隆(long)抗(kang)體的(de)生產(chan):被(bei)廣(guang)泛(fan)應用(yong)於(yu)單(dan)克(ke)隆(long)抗(kang)體的(de)生產(chan)。單克(ke)隆(long)抗(kang)體是(shi)目(mu)前(qian)治療癌癥(zheng)、自(zi)身(shen)免(mian)疫(yi)性(xing)疾(ji)病(bing)、傳(chuan)染病等的重要(yao)藥物(wu),因其(qi)能(neng)有(you)效(xiao)地生(sheng)產(chan)復雜(za)的抗(kang)體分子(zi)而(er)成(cheng)為(wei)主要(yao)的生(sheng)產(chan)平臺(tai)。多(duo)種商(shang)業(ye)化(hua)的單克(ke)隆(long)抗(kang)體,如(ru)赫賽汀、阿達(da)木(mu)單(dan)抗(kang)等,均(jun)是通(tong)過CHO細胞生(sheng)產(chan)的。
2、重組(zu)蛋(dan)白的(de)生(sheng)產(chan):除了(le)抗(kang)體還(hai)被(bei)用(yong)於(yu)生(sheng)產(chan)多種重組(zu)蛋(dan)白,如(ru)酶(mei)類(lei)、激素、血液(ye)制(zhi)品(pin)等(deng)。例如,重組(zu)人(ren)胰島素、EPO(紅細(xi)胞生成(cheng)素)等治療性(xing)蛋(dan)白質,通常通(tong)過(guo)CHO細胞(bao)表達(da)和(he)生產(chan)。在(zai)這(zhe)些(xie)蛋(dan)白的(de)生(sheng)產(chan)過(guo)程中,能(neng)夠提供(gong)必要(yao)的後(hou)修(xiu)飾(shi)和(he)穩定性(xing),使(shi)得(de)這(zhe)些(xie)蛋(dan)白在(zai)臨床(chuang)應用(yong)中(zhong)表(biao)現(xian)出優(you)異的(de)生物(wu)學活性(xing)。
3、疫(yi)苗(miao)的生(sheng)產(chan):在(zai)疫(yi)苗(miao)生產(chan)中(zhong)也(ye)有重要(yao)應用(yong)。某些(xie)疫(yi)苗(miao)(如基(ji)於(yu)重組(zu)蛋(dan)白的(de)疫(yi)苗(miao))可以(yi)通(tong)過(guo)CHO細(xi)胞(bao)系統(tong)生(sheng)產。例如,某些(xie)流(liu)感(gan)疫(yi)苗(miao)和(he)乙(yi)型(xing)肝炎(yan)疫(yi)苗(miao)的生(sheng)產(chan)過(guo)程中(zhong),起(qi)到了(le)重要(yao)作(zuo)用(yong)。

為(wei)了(le)提高重組(zu)蛋(dan)白的(de)生(sheng)產(chan)效(xiao)率(lv),科(ke)研(yan)人(ren)員采用(yong)了(le)多種方(fang)法(fa)來優(you)化(hua)CHO倉(cang)鼠(shu)卵(luan)巢細胞(bao)。這(zhe)些(xie)方(fang)法(fa)包(bao)括:
1、選(xuan)擇高效的(de)啟(qi)動子(zi)和(he)表達(da)載(zai)體:使用(yong)強(qiang)啟(qi)動子(zi)來驅(qu)動目(mu)標(biao)基(ji)因的表達(da),選(xuan)擇合(he)適(shi)的(de)表達(da)載(zai)體(如pcDNA3、pCMV等)以(yi)提(ti)高目(mu)標(biao)蛋(dan)白的(de)表(biao)達(da)水(shui)平。
2、細(xi)胞培養條件(jian)的優(you)化(hua):通(tong)過優(you)化(hua)培養基(ji)配(pei)方(fang)、pH、溫度(du)、氧(yang)氣(qi)濃(nong)度等條件(jian),能(neng)夠提高生長(chang)速率(lv)和(he)蛋(dan)白表(biao)達(da)水(shui)平。
3、基(ji)因編(bian)輯(ji)技術:CRISPR/Cas9等基(ji)因編(bian)輯(ji)技術的應用(yong),使(shi)得(de)可(ke)以(yi)定向(xiang)修(xiu)改(gai)基(ji)因,提高其(qi)穩(wen)定性(xing)和(he)生產(chan)能(neng)力(li)。例(li)如(ru),可(ke)以(yi)通(tong)過(guo)刪(shan)除細(xi)胞內的某些(xie)基(ji)因,避免其(qi)與(yu)目(mu)標(biao)蛋(dan)白發生(sheng)不必(bi)要(yao)的相(xiang)互(hu)作(zuo)用(yong),從(cong)而(er)提(ti)高蛋(dan)白的(de)純(chun)度(du)和(he)產量(liang)。
4、培養系統(tong)的(de)改(gai)進(jin):采用(yong)懸(xuan)浮(fu)培養、無血清培養等現(xian)代(dai)培養技術(shu),使(shi)得能(neng)夠在(zai)大(da)規(gui)模(mo)生(sheng)產中獲得更(geng)高的產(chan)量(liang)並降(jiang)低成(cheng)本(ben)。
CHO倉鼠(shu)卵(luan)巢細胞(bao)在(zai)重組(zu)蛋(dan)白生(sheng)產(chan)中(zhong)的(de)應用(yong)具有(you)廣(guang)泛(fan)的前(qian)景。由(you)於(yu)其(qi)出色(se)的(de)表(biao)達(da)能(neng)力(li)、後(hou)修(xiu)飾(shi)功能(neng)和(he)低免(mian)疫(yi)原(yuan)性(xing),已(yi)經(jing)成(cheng)為(wei)生物(wu)制(zhi)藥(yao)行(xing)業(ye)中(zhong)的重要(yao)平臺(tai)。隨(sui)著(zhe)基(ji)因工(gong)程(cheng)技術、細胞(bao)培養技術(shu)和(he)發酵技術(shu)的(de)不斷(duan)進(jin)步(bu),將繼(ji)續在(zai)抗(kang)體、疫(yi)苗(miao)和(he)重組(zu)蛋(dan)白生(sheng)產(chan)等(deng)領(ling)域發揮著(zhe)重要(yao)作(zuo)用(yong)。