人膽管(guan)癌細胞 細胞株(zhu)

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人膽管(guan)癌細胞

人膽管(guan)癌細胞|細胞株(zhu)

人膽管(guan)癌細胞 【培(pei)養(yang)指(zhi)南】

對於(yu)貼壁細胞，傳(chuan)代(dai)可參(can)考(kao)以(yi)下(xia)方(fang)法：

1. 棄去(qu)培(pei)養(yang)上(shang)清，用(yong)不(bu)含(han)鈣、鎂(mei)離子(zi)的PBS潤(run)洗細胞1-2次。

2. 加2ml消(xiao)化(hua)液(ye)(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)於(yu)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，置於(yu)37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2分(fen)鐘，然後在(zai)顯微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)Ⅱ型(xing)肺泡(pao)上(shang)皮細胞|細胞消(xiao)化(hua)情(qing)況(kuang)，若(ruo)細胞大(da)部(bu)分變(bian)圓並脫落(luo)，迅(xun)速拿(na)回(hui)操作臺，輕敲(qiao)幾(ji)下(xia)培(pei)養(yang)瓶(ping)後加少(shao)量培(pei)養(yang)基終止(zhi)消(xiao)化(hua)。

3. 按6-8ml/瓶補加培(pei)養(yang)基，輕(qing)輕打勻(yun)後吸(xi)出，在(zai)1000RPM條(tiao)件下(xia)離心(xin)4分鐘(zhong)，棄去(qu)上(shang)清液(ye)，補加1-2mL培(pei)養(yang)液(ye)後吹勻。

4. 將細胞懸液按1：2到(dao)1：5的比例(li)分(fen)到(dao)新的含(han)8ml培(pei)養(yang)基的新(xin)皿(min)中(zhong)或者(zhe)瓶(ping)中(zhong)。

對於(yu)懸浮細胞，傳(chuan)代(dai)可參(can)考(kao)以(yi)下(xia)方(fang)法：

方(fang)法壹(yi)：收(shou)集細胞，1000RPM條(tiao)件下(xia)離心(xin)4分鐘(zhong)，棄去(qu)上(shang)清液(ye)，補加1-2mL培(pei)養(yang)液(ye)後吹勻，將細胞懸液按1：2到(dao)1：5的比例(li)分(fen)到(dao)新的含(han)8ml培(pei)養(yang)基的新(xin)皿(min)中(zhong)或者(zhe)瓶(ping)中(zhong)。

方(fang)法二：可選擇半(ban)數換(huan)液方(fang)式，棄(qi)去(qu)半(ban)數培(pei)養(yang)基後，將剩(sheng)余(yu)細胞懸起，將細胞懸液按1：2到(dao)1：3的比例(li)分(fen)到(dao)新的含(han)8ml培(pei)養(yang)基的新(xin)皿(min)中(zhong)或者(zhe)瓶(ping)中(zhong)。

人膽管(guan)癌細胞 【細胞凍(dong)存(cun)】

待細胞生(sheng)長狀態(tai)良(liang)好時(shi)，可進行293/HEK-293細胞|細胞凍(dong)存(cun)。貼壁細胞凍(dong)存(cun)時(shi)，棄(qi)去(qu)培(pei)養(yang)基後加入少(shao)量胰酶，細胞變(bian)圓脫落(luo)後，加入約(yue)1ml含(han)血(xue)清的培(pei)養(yang)基後加入凍存(cun)管(guan)中(zhong)，再(zai)添(tian)加10%DMSO後進行凍存(cun)。懸浮細胞凍(dong)存(cun)時(shi)，應(ying)將細胞收(shou)集，1000RPM條(tiao)件下(xia)離心(xin)4分鐘(zhong)，少(shao)量保(bao)存(cun)上(shang)清液(ye)(防(fang)止(zhi)細胞吸(xi)走(zou))，加入部(bu)分新(xin)鮮培(pei)養(yang)基，加入到(dao)凍存(cun)管(guan)中(zhong)，在(zai)凍(dong)存(cun)管(guan)中(zhong)加入10%DMSO後進行凍存(cun)。

人膽管(guan)癌細胞 【復蘇的原(yuan)則】

快(kuai)速融化(hua)：必須將凍存(cun)在(zai)-196℃液(ye)氮(dan)中(zhong)的細胞快(kuai)速融化(hua)至37℃，使人膽管(guan)癌細胞|細胞外凍(dong)存(cun)時(shi)的冰晶(jing)迅(xun)速融化(hua)，避(bi)免(mian)冰晶(jing)緩慢(man)融化(hua)時(shi)進(jin)入細胞形(xing)成再(zai)結(jie)晶(jing)，對細胞造(zao)成損(sun)害。

人膽管(guan)癌細胞 乾(qian)思|復旦細胞庫(ku)全國各(ge)地(di)均(jun)可發貨，全國統(tong)壹(yi)價格，本公(gong)司出售(shou)的所(suo)有(you)細胞僅(jin)供(gong)科(ke)研(yan)使用。

人膽管(guan)癌細胞 【註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang)】

乾(qian)思生(sheng)物實(shi)驗(yan)室專業人士提(ti)醒(xing)廣大(da)科研(yan)實(shi)驗(yan)者(zhe)，購(gou)買人膽管(guan)癌細胞培(pei)養(yang)，註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang)：

1. 收(shou)到(dao)細胞後，若(ruo)發(fa)現(xian)幹冰已(yi)揮發(fa)幹凈(jing)、凍存(cun)管(guan)瓶蓋脫落(luo)、破損(sun)及細胞有(you)汙染，請立即(ji)與(yu)我們。

2. 所(suo)有(you)動(dong)物細胞均(jun)視為有(you)潛(qian)在(zai)的生(sheng)物危害性(xing)，必須在(zai)二(er)級生(sheng)物安(an)全臺內操作，並(bing)請註意(yi)防(fang)護(hu)，所(suo)有(you)廢液及接(jie)觸過(guo)此(ci)細胞的器(qi)皿(min)需(xu)要(yao)滅菌後方(fang)能丟棄。

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人膽管(guan)癌細胞

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小徐20180323