人(ren)非(fei)小(xiao)細胞肺(fei)癌(ai)細胞 細胞株(zhu)

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為(wei)了(le)更(geng)好(hao)地(di)進(jin)行科學(xue)研究(jiu)，細胞分化(hua)觀察(cha)，您(nin)需(xu)要高水準(zhun)高品(pin)質(zhi)的(de)培(pei)養(yang)細胞。乾思(si)是妳優先的(de)選擇(ze)，大(da)促，意(yi)想不到的(de)折(zhe)扣，人(ren)非(fei)小(xiao)細胞肺(fei)癌(ai)細胞|細胞購買。

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人(ren)非(fei)小(xiao)細胞肺(fei)癌(ai)細胞|細胞株(zhu)

人(ren)非(fei)小(xiao)細胞肺(fei)癌(ai)細胞 【培(pei)養(yang)指(zhi)南】

對(dui)於(yu)貼(tie)壁(bi)細胞，傳代(dai)可(ke)參(can)考以(yi)下(xia)方(fang)法(fa)：

1. 棄(qi)去(qu)培(pei)養(yang)上清，用(yong)不(bu)含鈣(gai)、鎂(mei)離子(zi)的(de)PBS潤洗(xi)細胞1-2次。

2. 加2ml消(xiao)化(hua)液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)於(yu)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，置(zhi)於(yu)37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中消(xiao)化(hua)1-2分鐘(zhong)，然後(hou)在(zai)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)Ⅱ型(xing)肺(fei)泡(pao)上(shang)皮(pi)細胞|細胞消化(hua)情況，若(ruo)細胞大部分(fen)變(bian)圓(yuan)並(bing)脫落，迅(xun)速拿回操(cao)作(zuo)臺，輕(qing)敲(qiao)幾下培(pei)養(yang)瓶後(hou)加少(shao)量(liang)培(pei)養(yang)基終(zhong)止(zhi)消化(hua)。

3. 按(an)6-8ml/瓶(ping)補(bu)加培(pei)養(yang)基，輕(qing)輕(qing)打(da)勻後(hou)吸(xi)出，在(zai)1000RPM條(tiao)件下(xia)離(li)心4分(fen)鐘(zhong)，棄(qi)去(qu)上清液，補(bu)加1-2mL培(pei)養(yang)液後(hou)吹勻。

4. 將細胞懸液按(an)1：2到1：5的(de)比例分(fen)到新(xin)的(de)含8ml培(pei)養(yang)基的(de)新(xin)皿(min)中或(huo)者瓶(ping)中。

對於(yu)懸(xuan)浮(fu)細胞，傳代(dai)可(ke)參(can)考以(yi)下(xia)方(fang)法(fa)：

方(fang)法壹：收(shou)集細胞，1000RPM條件下(xia)離(li)心4分(fen)鐘(zhong)，棄(qi)去(qu)上清液，補(bu)加1-2mL培(pei)養(yang)液後(hou)吹勻，將細胞懸液按(an)1：2到1：5的(de)比例分(fen)到新(xin)的(de)含8ml培(pei)養(yang)基的(de)新(xin)皿(min)中或(huo)者瓶(ping)中。

方法二：可(ke)選(xuan)擇(ze)半(ban)數換(huan)液(ye)方(fang)式，棄(qi)去(qu)半數培(pei)養(yang)基後(hou)，將剩余細胞懸起，將(jiang)細胞懸液按(an)1：2到1：3的(de)比例分(fen)到新(xin)的(de)含8ml培(pei)養(yang)基的(de)新(xin)皿(min)中或(huo)者瓶(ping)中。

人(ren)非(fei)小(xiao)細胞肺(fei)癌(ai)細胞 【細胞凍存】

待(dai)細胞生長(chang)狀態(tai)良(liang)好(hao)時，可(ke)進(jin)行293/HEK-293細胞|細胞凍存。貼(tie)壁(bi)細胞凍存時(shi)，棄(qi)去(qu)培(pei)養(yang)基後(hou)加入少(shao)量(liang)胰(yi)酶(mei)，細胞變(bian)圓(yuan)脫落後(hou)，加(jia)入約1ml含血(xue)清的(de)培(pei)養(yang)基後(hou)加入凍存(cun)管中，再添(tian)加(jia)10%DMSO後進(jin)行凍(dong)存。懸浮(fu)細胞凍存時(shi)，應(ying)將(jiang)細胞收(shou)集，1000RPM條(tiao)件下(xia)離(li)心4分(fen)鐘(zhong)，少(shao)量(liang)保(bao)存上(shang)清液(防止(zhi)細胞吸(xi)走)，加(jia)入部分(fen)新(xin)鮮培(pei)養(yang)基，加(jia)入到凍(dong)存(cun)管中，在(zai)凍(dong)存(cun)管中加入10%DMSO後進(jin)行凍(dong)存。

人(ren)非(fei)小(xiao)細胞肺(fei)癌(ai)細胞 【復蘇(su)的(de)原則(ze)】

快(kuai)速融(rong)化(hua)：必須(xu)將凍(dong)存(cun)在(zai)-196℃液(ye)氮(dan)中(zhong)的(de)細胞快速融(rong)化(hua)至(zhi)37℃，使(shi)人(ren)非(fei)小(xiao)細胞肺(fei)癌(ai)細胞|細胞外(wai)凍存(cun)時(shi)的(de)冰晶迅(xun)速融(rong)化(hua)，避免(mian)冰晶緩慢(man)融(rong)化(hua)時進(jin)入細胞形成再結晶，對細胞造(zao)成損害(hai)。

人(ren)非(fei)小(xiao)細胞肺(fei)癌(ai)細胞 乾思(si)|復旦(dan)細胞庫全國(guo)各(ge)地(di)均可(ke)發(fa)貨(huo)，全國(guo)統壹價(jia)格(ge)，本公(gong)司(si)出售(shou)的(de)所有細胞僅供(gong)科研(yan)使(shi)用(yong)。

人(ren)非(fei)小(xiao)細胞肺(fei)癌(ai)細胞 【註(zhu)意(yi)事項(xiang)】

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1. 收(shou)到細胞後，若(ruo)發(fa)現(xian)幹(gan)冰已揮(hui)發幹(gan)凈(jing)、凍(dong)存管瓶蓋(gai)脫落、破(po)損及(ji)細胞有汙染，請立即(ji)與(yu)我們(men)。

2. 所(suo)有動物(wu)細胞均視為(wei)有潛(qian)在(zai)的(de)生物(wu)危(wei)害(hai)性，必須(xu)在(zai)二級生物(wu)安(an)全(quan)臺內操(cao)作(zuo)，並(bing)請註(zhu)意(yi)防護(hu)，所有廢(fei)液(ye)及(ji)接(jie)觸(chu)過(guo)此(ci)細胞的(de)器(qi)皿(min)需(xu)要滅(mie)菌(jun)後(hou)方能丟棄(qi)。

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小徐20180323