人(ren)肝(gan)內膽(dan)管上皮細胞 細胞(bao)株(zhu)

上海(hai)乾(qian)思(si)生物——人(ren)肝(gan)內膽(dan)管上皮細胞|細胞(bao)系(xi)|細(xi)胞株(zhu)|腫瘤(liu)細(xi)胞，公(gong)司不(bu)僅有大量(liang)的細(xi)胞(bao)，還(hai)提(ti)供(gong)人(ren)肝(gan)內膽(dan)管上皮細胞的全(quan)程後期服(fu)務(wu)，可(ke)以向(xiang)專(zhuan)業(ye)人(ren)士咨詢(xun)詳(xiang)細(xi)的人(ren)肝(gan)內膽(dan)管上皮細胞|細胞(bao)培(pei)養(yang)條(tiao)件，凍存方法，及(ji)相(xiang)關(guan)培(pei)養(yang)技(ji)術。

為了更好(hao)地(di)進行(xing)科學(xue)研究(jiu)，細胞(bao)分化觀(guan)察(cha)，您需(xu)要高水(shui)準(zhun)高品(pin)質的培(pei)養(yang)細胞(bao)。乾(qian)思(si)是妳(ni)優(you)先的選(xuan)擇(ze)，大促，意(yi)想(xiang)不(bu)到(dao)的折(zhe)扣，人(ren)肝(gan)內膽(dan)管上皮細胞|細胞(bao)購(gou)買(mai)。

的人(ren)肝(gan)內膽(dan)管上皮細胞是專(zhuan)業(ye)的技(ji)術支(zhi)撐(cheng)的體(ti)現。我公(gong)司有專業(ye)的細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)員和(he)人(ren)肝(gan)內膽(dan)管上皮細胞|乾(qian)思(si) 復旦細胞(bao)庫，目(mu)前(qian)庫(ku)容有各(ge)類細胞(bao)，有各(ge)類腫瘤(liu)細(xi)胞、耐(nai)藥(yao)細(xi)胞株(zhu)、原(yuan)代(dai)細胞(bao)株(zhu)等(deng)。可(ke)以進行(xing)常(chang)規的細(xi)胞(bao)實驗(yan)，MTT、PI染(ran)色(se)、Annexin V、細(xi)胞(bao)遷移(yi)、細胞(bao)轉染(ran)等(deng)檢(jian)測(ce)。

人(ren)肝(gan)內膽(dan)管上皮細胞

人(ren)肝(gan)內膽(dan)管上皮細胞|細胞(bao)株(zhu)

人(ren)肝(gan)內膽(dan)管上皮細胞 【培(pei)養(yang)指南】

對於(yu)貼壁細(xi)胞(bao)，傳代(dai)可(ke)參考(kao)以下(xia)方(fang)法：

1. 棄(qi)去(qu)培(pei)養(yang)上清(qing)，用不(bu)含(han)鈣(gai)、鎂(mei)離子的PBS潤(run)洗(xi)細胞1-2次(ci)。

2. 加(jia)2ml消化液(ye)(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)於(yu)培(pei)養(yang)瓶(ping)中，置於(yu)37℃培(pei)養(yang)箱中(zhong)消化1-2分(fen)鐘(zhong)，然(ran)後在(zai)顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)Ⅱ型(xing)肺泡(pao)上(shang)皮細(xi)胞(bao)|細(xi)胞消(xiao)化情(qing)況，若細(xi)胞(bao)大部分變圓(yuan)並脫落，迅(xun)速(su)拿回操作臺(tai)，輕(qing)敲(qiao)幾下(xia)培(pei)養(yang)瓶(ping)後加(jia)少(shao)量培(pei)養(yang)基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶(ping)補加(jia)培(pei)養(yang)基，輕(qing)輕(qing)打(da)勻(yun)後吸出，在(zai)1000RPM條(tiao)件下(xia)離心4分鐘，棄(qi)去(qu)上清液(ye)，補(bu)加(jia)1-2mL培(pei)養(yang)液(ye)後吹勻(yun)。

4. 將(jiang)細胞懸液(ye)按1：2到(dao)1：5的比例分(fen)到(dao)新的含(han)8ml培(pei)養(yang)基的新皿中(zhong)或者(zhe)瓶(ping)中。

對於(yu)懸浮細胞(bao)，傳代(dai)可(ke)參考(kao)以下(xia)方(fang)法：

方(fang)法壹：收集(ji)細(xi)胞，1000RPM條(tiao)件下(xia)離心4分鐘，棄(qi)去(qu)上清液(ye)，補(bu)加(jia)1-2mL培(pei)養(yang)液(ye)後吹勻(yun)，將(jiang)細胞懸液(ye)按1：2到(dao)1：5的比例分(fen)到(dao)新的含(han)8ml培(pei)養(yang)基的新皿中(zhong)或者(zhe)瓶(ping)中。

方法(fa)二：可(ke)選擇半數(shu)換液(ye)方(fang)式(shi)，棄(qi)去(qu)半數培(pei)養(yang)基後，將剩(sheng)余(yu)細胞(bao)懸起(qi)，將細胞(bao)懸液(ye)按1：2到(dao)1：3的比例分(fen)到(dao)新的含(han)8ml培(pei)養(yang)基的新皿中(zhong)或者(zhe)瓶(ping)中。

人(ren)肝(gan)內膽(dan)管上皮細胞 【細胞(bao)凍存】

待(dai)細(xi)胞生長(chang)狀(zhuang)態(tai)良(liang)好(hao)時，可(ke)進行(xing)293/HEK-293細(xi)胞|細胞(bao)凍存。貼壁細(xi)胞(bao)凍存時，棄去(qu)培(pei)養(yang)基後加(jia)入少(shao)量胰酶(mei)，細(xi)胞變圓(yuan)脫落後，加(jia)入約(yue)1ml含(han)血清(qing)的培(pei)養(yang)基後加(jia)入凍存管中，再(zai)添加(jia)10%DMSO後進行(xing)凍存。懸浮細胞(bao)凍存時，應將(jiang)細胞收(shou)集，1000RPM條(tiao)件下(xia)離心4分鐘，少(shao)量保(bao)存上清液(ye)(防(fang)止細胞(bao)吸走)，加(jia)入部分新鮮培(pei)養(yang)基，加(jia)入到(dao)凍存管中，在(zai)凍存管中加(jia)入10%DMSO後進行(xing)凍存。

人(ren)肝(gan)內膽(dan)管上皮細胞 【復蘇(su)的原(yuan)則(ze)】

快(kuai)速融(rong)化：必(bi)須(xu)將凍存在(zai)-196℃液(ye)氮(dan)中(zhong)的細(xi)胞(bao)快速(su)融化至(zhi)37℃，使(shi)人(ren)肝(gan)內膽(dan)管上皮細胞|細胞(bao)外(wai)凍存時的冰(bing)晶迅(xun)速(su)融化，避免冰(bing)晶緩(huan)慢(man)融(rong)化時進入(ru)細(xi)胞形(xing)成再(zai)結晶，對細(xi)胞(bao)造成(cheng)損(sun)害。

人(ren)肝(gan)內膽(dan)管上皮細胞 乾(qian)思(si)|復旦細胞(bao)庫全(quan)國(guo)各(ge)地均(jun)可(ke)發貨(huo)，全(quan)國(guo)統(tong)壹價格，本(ben)公(gong)司出售(shou)的所有細胞(bao)僅供科研使(shi)用。

人(ren)肝(gan)內膽(dan)管上皮細胞 【註(zhu)意事(shi)項(xiang)】

乾(qian)思(si)生物實驗(yan)室專(zhuan)業(ye)人(ren)士提(ti)醒廣(guang)大(da)科研實驗(yan)者，購(gou)買(mai)人(ren)肝(gan)內膽(dan)管上皮細胞培(pei)養(yang)，註(zhu)意事(shi)項(xiang)：

1. 收(shou)到(dao)細胞後，若發(fa)現幹(gan)冰(bing)已(yi)揮(hui)發(fa)幹(gan)凈、凍存管瓶(ping)蓋脫落、破損(sun)及細(xi)胞(bao)有汙染(ran)，請立即(ji)與(yu)我(wo)們。

2. 所有動(dong)物細(xi)胞(bao)均(jun)視為有潛(qian)在(zai)的生(sheng)物危(wei)害(hai)性(xing)，必須在(zai)二級生(sheng)物安全(quan)臺(tai)內操作，並請註(zhu)意防(fang)護，所有廢(fei)液(ye)及(ji)接觸過(guo)此(ci)細(xi)胞(bao)的器(qi)皿(min)需要(yao)滅菌後方能(neng)丟(diu)棄(qi)。

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人(ren)肝(gan)內膽(dan)管上皮細胞

您的需(xu)求(qiu)，就是(shi)我們的工作要(yao)求，我(wo)們會全(quan)心為您服(fu)務(wu)。

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小(xiao)徐(xu)20180323