人宮(gong)頸(jing)鱗狀細(xi)胞癌 細胞株

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為了(le)更(geng)好(hao)地進行(xing)科學研究(jiu)，細(xi)胞分(fen)化(hua)觀(guan)察(cha)，您需(xu)要高(gao)水準高品(pin)質的培(pei)養細(xi)胞。乾思(si)是妳優(you)先(xian)的選(xuan)擇，大(da)促(cu)，意想(xiang)不到(dao)的折扣，人宮(gong)頸(jing)鱗狀細(xi)胞癌|細胞購買。

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人宮(gong)頸(jing)鱗狀細(xi)胞癌

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人宮(gong)頸(jing)鱗狀細(xi)胞癌 【培(pei)養指(zhi)南(nan)】

對(dui)於貼(tie)壁(bi)細胞，傳代可(ke)參考以下(xia)方法(fa)：

1. 棄去培(pei)養上清(qing)，用(yong)不含鈣、鎂(mei)離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加2ml消(xiao)化(hua)液(ye)(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)於培(pei)養瓶(ping)中，置(zhi)於37℃培(pei)養箱(xiang)中消(xiao)化(hua)1-2分(fen)鐘，然後(hou)在(zai)顯(xian)微(wei)鏡下觀(guan)察(cha)Ⅱ型肺(fei)泡(pao)上皮(pi)細(xi)胞|細胞消(xiao)化(hua)情況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞大部分(fen)變圓並脫落(luo)，迅速拿(na)回操(cao)作臺，輕敲幾(ji)下(xia)培(pei)養瓶(ping)後(hou)加(jia)少量(liang)培(pei)養基(ji)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)。

3. 按(an)6-8ml/瓶(ping)補(bu)加培(pei)養基(ji)，輕輕打勻後(hou)吸(xi)出(chu)，在(zai)1000RPM條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心4分(fen)鐘，棄去上清(qing)液(ye)，補(bu)加(jia)1-2mL培(pei)養液(ye)後(hou)吹(chui)勻。

4. 將細胞懸液(ye)按(an)1：2到(dao)1：5的比(bi)例(li)分(fen)到(dao)新的含8ml培(pei)養基(ji)的新皿(min)中或(huo)者(zhe)瓶中(zhong)。

對於懸浮(fu)細(xi)胞，傳代可(ke)參考以下(xia)方法(fa)：

方法(fa)壹(yi)：收集細胞，1000RPM條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心4分(fen)鐘，棄去上清(qing)液(ye)，補(bu)加(jia)1-2mL培(pei)養液(ye)後(hou)吹(chui)勻，將細胞懸液(ye)按(an)1：2到(dao)1：5的比(bi)例(li)分(fen)到(dao)新的含8ml培(pei)養基(ji)的新皿(min)中或(huo)者(zhe)瓶中(zhong)。

方法(fa)二(er)：可(ke)選(xuan)擇半(ban)數換液(ye)方式(shi)，棄去半(ban)數培(pei)養基(ji)後(hou)，將剩余(yu)細(xi)胞懸起(qi)，將細胞懸液(ye)按(an)1：2到(dao)1：3的比(bi)例(li)分(fen)到(dao)新的含8ml培(pei)養基(ji)的新皿(min)中或(huo)者(zhe)瓶中(zhong)。

人宮(gong)頸(jing)鱗狀細(xi)胞癌 【細胞凍存】

待細(xi)胞生長狀態(tai)良(liang)好時(shi)，可(ke)進(jin)行(xing)293/HEK-293細(xi)胞|細胞凍存。貼(tie)壁(bi)細胞凍存時，棄去培(pei)養基(ji)後(hou)加(jia)入(ru)少量(liang)胰酶，細(xi)胞變圓脫落(luo)後(hou)，加(jia)入(ru)約(yue)1ml含血(xue)清(qing)的培(pei)養基(ji)後(hou)加(jia)入(ru)凍存(cun)管(guan)中(zhong)，再添加(jia)10%DMSO後(hou)進(jin)行(xing)凍(dong)存。懸浮(fu)細(xi)胞凍存時，應(ying)將細胞收集，1000RPM條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心4分(fen)鐘，少量(liang)保存(cun)上清(qing)液(ye)(防(fang)止(zhi)細(xi)胞吸(xi)走(zou))，加(jia)入(ru)部分(fen)新鮮(xian)培(pei)養基(ji)，加入(ru)到(dao)凍存(cun)管(guan)中(zhong)，在凍存(cun)管(guan)中(zhong)加入(ru)10%DMSO後(hou)進(jin)行(xing)凍(dong)存。

人宮(gong)頸(jing)鱗狀細(xi)胞癌 【復蘇的原則(ze)】

快(kuai)速融(rong)化：必(bi)須(xu)將凍存(cun)在(zai)-196℃液(ye)氮(dan)中的細胞快(kuai)速融(rong)化至37℃，使人宮(gong)頸(jing)鱗狀細(xi)胞癌|細胞外(wai)凍(dong)存(cun)時的冰(bing)晶迅(xun)速融(rong)化，避(bi)免(mian)冰(bing)晶緩(huan)慢(man)融(rong)化(hua)時(shi)進入(ru)細胞形成(cheng)再結晶，對(dui)細(xi)胞造(zao)成(cheng)損害。

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人宮(gong)頸(jing)鱗狀細(xi)胞癌 【註意事(shi)項(xiang)】

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1. 收到(dao)細胞後(hou)，若(ruo)發(fa)現(xian)幹(gan)冰(bing)已(yi)揮(hui)發幹(gan)凈、凍(dong)存管(guan)瓶(ping)蓋脫落(luo)、破損及(ji)細(xi)胞有汙染，請(qing)立即與(yu)我(wo)們(men)。

2. 所(suo)有動(dong)物(wu)細(xi)胞均視為(wei)有(you)潛在(zai)的生物危害性，必(bi)須(xu)在二(er)級生物(wu)安(an)全(quan)臺內操(cao)作，並請(qing)註意防(fang)護(hu)，所(suo)有廢(fei)液(ye)及(ji)接(jie)觸(chu)過此(ci)細(xi)胞的器(qi)皿(min)需要(yao)滅(mie)菌後(hou)方能丟棄。

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小(xiao)徐20180323