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為了更好(hao)地(di)進行科(ke)學(xue)研(yan)究，細胞(bao)分化觀(guan)察(cha)，您需(xu)要高水(shui)準(zhun)高品質(zhi)的(de)培養(yang)細胞(bao)。乾思是妳優先(xian)的(de)選擇，大促，意想不到(dao)的(de)折(zhe)扣(kou)，人(ren)高(gao)轉移卵(luan)巢(chao)癌細胞(bao)|細胞(bao)購買(mai)。

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人(ren)高(gao)轉移卵(luan)巢(chao)癌細胞(bao) 【培養指南(nan)】

對於(yu)貼壁(bi)細胞(bao)，傳代(dai)可(ke)參(can)考以(yi)下方(fang)法(fa)：

1. 棄(qi)去培養上清，用(yong)不含(han)鈣(gai)、鎂離子(zi)的(de)PBS潤(run)洗(xi)細胞(bao)1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)於(yu)培養(yang)瓶中(zhong)，置於(yu)37℃培養(yang)箱(xiang)中(zhong)消化1-2分鐘，然後在(zai)顯(xian)微鏡下觀(guan)察(cha)Ⅱ型肺(fei)泡上(shang)皮(pi)細胞(bao)|細胞(bao)消化情(qing)況(kuang)，若細胞(bao)大部分變(bian)圓(yuan)並脫(tuo)落，迅(xun)速(su)拿(na)回(hui)操作(zuo)臺，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下培養(yang)瓶後加(jia)少量(liang)培養(yang)基終(zhong)止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加(jia)培養(yang)基，輕(qing)輕(qing)打(da)勻(yun)後吸(xi)出(chu)，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加(jia)1-2mL培養(yang)液後吹勻(yun)。

4. 將(jiang)細胞(bao)懸液按1：2到(dao)1：5的(de)比例(li)分到(dao)新(xin)的(de)含(han)8ml培養(yang)基(ji)的(de)新(xin)皿中或(huo)者瓶中(zhong)。

對(dui)於(yu)懸浮(fu)細胞(bao)，傳代(dai)可(ke)參(can)考以(yi)下方(fang)法(fa)：

方(fang)法(fa)壹(yi)：收(shou)集細胞(bao)，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加(jia)1-2mL培養(yang)液後吹勻(yun)，將(jiang)細胞(bao)懸液按1：2到(dao)1：5的(de)比例(li)分到(dao)新(xin)的(de)含(han)8ml培養(yang)基(ji)的(de)新(xin)皿中或(huo)者瓶中(zhong)。

方(fang)法(fa)二：可(ke)選(xuan)擇半(ban)數(shu)換液方(fang)式，棄(qi)去半(ban)數(shu)培養(yang)基後，將(jiang)剩余(yu)細胞(bao)懸起，將(jiang)細胞(bao)懸液按1：2到(dao)1：3的(de)比例(li)分到(dao)新(xin)的(de)含(han)8ml培養(yang)基(ji)的(de)新(xin)皿中或(huo)者瓶中(zhong)。

人(ren)高(gao)轉移卵(luan)巢(chao)癌細胞(bao) 【細胞(bao)凍存】

待細胞(bao)生長(chang)狀(zhuang)態(tai)良(liang)好(hao)時，可(ke)進行293/HEK-293細胞(bao)|細胞(bao)凍存。貼壁(bi)細胞(bao)凍存時，棄去培養基後加(jia)入(ru)少量(liang)胰(yi)酶(mei)，細胞(bao)變(bian)圓(yuan)脫(tuo)落後，加(jia)入(ru)約1ml含(han)血(xue)清的(de)培養(yang)基後加(jia)入(ru)凍存管中，再添加(jia)10%DMSO後進行凍存。懸(xuan)浮(fu)細胞(bao)凍存時，應(ying)將(jiang)細胞(bao)收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量(liang)保存(cun)上清液(防止細胞(bao)吸走)，加入(ru)部分新(xin)鮮培(pei)養(yang)基(ji)，加入(ru)到(dao)凍(dong)存管中，在凍存(cun)管中加入(ru)10%DMSO後進行凍存。

人(ren)高(gao)轉移卵(luan)巢(chao)癌細胞(bao) 【復(fu)蘇的(de)原則(ze)】

快速(su)融化：必須將(jiang)凍(dong)存在(zai)-196℃液氮(dan)中(zhong)的(de)細胞(bao)快速融化至37℃，使(shi)人(ren)高(gao)轉移卵(luan)巢(chao)癌細胞(bao)|細胞(bao)外凍存時的(de)冰晶迅(xun)速(su)融(rong)化，避(bi)免冰晶緩(huan)慢(man)融化(hua)時進入(ru)細胞(bao)形成再結(jie)晶，對(dui)細胞(bao)造成損害(hai)。

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人(ren)高(gao)轉移卵(luan)巢(chao)癌細胞(bao) 【註意事(shi)項】

乾思生物(wu)實驗(yan)室(shi)專業(ye)人(ren)士(shi)提(ti)醒(xing)廣大科(ke)研(yan)實驗(yan)者，購買(mai)人(ren)高(gao)轉移卵(luan)巢(chao)癌細胞(bao)培養，註意事(shi)項：

1. 收到(dao)細胞(bao)後，若發(fa)現幹冰已(yi)揮(hui)發幹凈、凍存管瓶蓋脫(tuo)落、破(po)損及細胞(bao)有(you)汙染，請(qing)立(li)即(ji)與(yu)我們。

2. 所(suo)有(you)動(dong)物(wu)細胞(bao)均(jun)視(shi)為有(you)潛(qian)在的(de)生物(wu)危(wei)害(hai)性，必須在二級生物(wu)安全(quan)臺內操(cao)作，並請註(zhu)意防護，所(suo)有(you)廢(fei)液及接觸過(guo)此(ci)細胞(bao)的(de)器皿需(xu)要滅菌後方(fang)能丟(diu)棄(qi)。

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小(xiao)徐20180323