人(ren)急性(xing)T細胞(bao)白血(xue)病細胞(bao)_ 實驗

非常讓人(ren)著(zhe)迷的實驗，其(qi)成(cheng)功(gong)關鍵之壹(yi)是(shi)選擇可信(xin)的實驗試劑。

我(wo)司(si)細(xi)胞(bao)近(jin)3000種，來源於美(mei)國(guo)ATCC,細(xi)胞(bao)都(dou)是(shi)經過(guo)嚴格質(zhi)量(liang)控(kong)制，在(zai)中國(guo)大陸努力(li)搭(da)建(jian)正(zheng)牌細胞(bao)與(yu)國(guo)內廣(guang)大科研人(ren)員(yuan)之間(jian)的溝(gou)通橋(qiao)梁(liang)。為(wei)您(nin)提(ti)供(gong)人(ren)急性(xing)T細胞(bao)白血(xue)病細胞(bao)外，還有(you)更(geng)多(duo)相(xiang)關實驗產(chan)品(pin)，標(biao)準品，細(xi)胞株和(he)實驗技術服(fu)務(wu)等等前(qian)期後(hou)續服務(wu)。

人(ren)急性(xing)T細胞(bao)白血(xue)病細胞(bao)的產(chan)品(pin)介(jie)紹(shao)

人(ren)急性(xing)T細胞(bao)白血(xue)病細胞(bao)由我(wo)司(si)*銷(xiao)售(shou)人(ren)急性(xing)T細胞(bao)白血(xue)病細胞(bao)。

人(ren)急性(xing)T細胞(bao)白血(xue)病細胞(bao)細胞(bao)株

　　Q1. 人(ren)急性(xing)T細胞(bao)白血(xue)病細胞(bao)液(ye)體(ti)培養(yang)基(ji)的保(bao)存(cun)是冷(leng)藏(zang)好？還是冷(leng)凍(dong)好？

　　要冷(leng)藏(zang)！！因(yin)為(wei)液(ye)體(ti)培養(yang)基(ji)經冷(leng)凍(dong)後再(zai)經溶化時(shi)，其(qi)溶液(ye)的pH值會發生改(gai)變(bian)，溶液(ye)往(wang)往變(bian)堿(jian)，某(mou)些(xie)成分溶解也(ye)會受到影(ying)響對(dui)細胞(bao)生長(chang)不(bu)利(li)。故(gu)液(ye)體(ti)培養(yang)基(ji)壹(yi)定要存(cun)放(fang)在冷(leng)藏(zang)箱(xiang)中，通(tong)常液(ye)體(ti)培養(yang)基(ji)在(zai)冷(leng)藏(zang)條(tiao)件(jian)下(xia)可存(cun)放(fang)6個月(yue) ~ 壹(yi)年。

　　Q2.人(ren)急性(xing)T細胞(bao)白血(xue)病細胞(bao) 液(ye)體(ti)培養(yang)基(ji)中谷氨(an)酰(xian)胺(an)的作用(yong)，及(ji)使(shi)用(yong)方(fang)法(fa)。

　　幾乎所有(you)的細胞對谷氨(an)酰(xian)胺(an)有(you)較(jiao)高的要求，細(xi)胞(bao)需(xu)要谷氨(an)酰(xian)胺(an)合(he)成蛋白質(zhi)，在(zai)缺(que)少(shao)谷氨(an)酰(xian)胺(an)時(shi)，細胞(bao)生長(chang)不(bu)良(liang)而死亡(wang)。所以，各(ge)種培養(yang)液(ye)中都(dou)含(han)有(you)較(jiao)大量的谷氨(an)酰(xian)胺(an)。谷氨(an)酰(xian)胺(an)在(zai)溶液(ye)中很(hen)不(bu)穩(wen)定，應(ying)置(zhi)-20 ?C冰凍(dong)保(bao)存(cun)，用(yong)前(qian)加(jia)入(ru)培(pei)養(yang)基(ji)中。加(jia)有(you)谷氨(an)酰(xian)胺(an)的液(ye)體(ti)培養(yang)基(ji)4 ?C 冰(bing)箱(xiang)儲存(cun)兩(liang)周以上(shang)時(shi)，應(ying)重(zhong)新(xin)加(jia)入(ru)原(yuan)來量(liang)的谷氨(an)酰(xian)胺(an)。基(ji)礎(chu)醫(yi)學(xue)細(xi)胞中心(xin)在其(qi)服(fu)務(wu)項(xiang)目(mu)中配(pei)制分(fen)裝(zhuang)了(le)高(gao)濃(nong)度（100倍(bei)）的谷氨(an)酰(xian)胺(an)溶液(ye)（1ml/支）。每(mei)支1ml的谷氨(an)酰(xian)胺(an)加(jia)到(dao)99ml*培(pei)養(yang)基(ji)中，其(qi)終(zhong)濃(nong)度為(wei)2mM/ml培(pei)養(yang)基(ji)。包(bao)裝(zhuang)為(wei)粉(fen)紅(hong)色，-24?C保(bao)存(cun)。

　　Q3.細胞(bao)計(ji)數及(ji)存(cun)活(huo)測(ce)試
1、原(yuan)理：
(1)計(ji)算(suan)細(xi)胞數目(mu)可用(yong)血(xue)球計數(shu)盤或(huo)是Coultercounter粒子計數(shu)器(qi)自動(dong)計數(shu)。
(2)血(xue)球計數(shu)盤壹般(ban)有(you)二個chambers，每(mei)個chamber中細(xi)刻9個(ge)1mm2大正(zheng)方(fang)形(xing)，其(qi)中4個(ge)角落之正(zheng)方(fang)形(xing)再(zai)細刻16個(ge)小(xiao)格，深(shen)度均為(wei)0.1mm。當(dang)chamber上(shang)方(fang)蓋(gai)上(shang)蓋(gai)玻片(pian)後(hou)，每個大正(zheng)方(fang)形(xing)之體(ti)積(ji)為(wei)1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使(shi)用(yong)時(shi)，計數(shu)每個(ge)大正(zheng)方(fang)形(xing)內之細(xi)胞(bao)數目(mu)，乘以(yi)稀釋倍(bei)數(shu)，再(zai)乘以(yi)104，即為(wei)每(mei)ml中之細(xi)胞(bao)數目(mu)。
(3)存(cun)活(huo)測(ce)試之步(bu)驟(zhou)為(wei)dyeexclusion，利(li)用(yong)染料(liao)會滲(shen)入(ru)死細胞(bao)中而呈(cheng)色，而活(huo)細胞因(yin)細(xi)胞(bao)膜(mo)完整(zheng)，染(ran)料(liao)無法滲(shen)入(ru)而不(bu)會呈(cheng)色。壹(yi)般(ban)使(shi)用(yong)藍(lan)色之trypan blue染(ran)料(liao)，如(ru)果(guo)細(xi)胞不(bu)易(yi)吸收(shou)trypan blue，則(ze)用(yong)紅(hong)色之Erythrosin bluish。計(ji)算(suan)細胞活(huo)率(lv)：活(huo)細胞數(shu)/(活(huo)細胞數(shu)+死細胞(bao)數(shu))×100%。計數應(ying)在(zai)臺(tai)盼蘭染色後(hou)數(shu)分鐘(zhong)內完成(cheng)，隨(sui)時(shi)間延長(chang)，部(bu)分活(huo)細胞也(ye)開始(shi)攝取染(ran)料(liao);因為(wei)臺(tai)盼蘭對蛋白質(zhi)有(you)很(hen)強(qiang)的親(qin)和(he)力(li)，用(yong)不(bu)含(han)血(xue)清的稀釋液(ye)，可(ke)以使(shi)染(ran)色計(ji)數(shu)更為(wei)準確。

　　Q4.細(xi)胞特(te)性(xing)
在細(xi)胞培養(yang)之前(qian)，我(wo)們要了解壹(yi)下(xia)妳(ni)所(suo)要養(yang)細(xi)胞(bao)的基(ji)本特性(xing)，這點可以(yi)從(cong)細(xi)胞(bao)的產(chan)品(pin)說(shuo)明書或(huo)者從(cong)ATCC細(xi)胞(bao)庫查詢。除此之外(wai)我(wo)們還要知道每(mei)管(guan)細胞(bao)的數量，建(jian)議分裂或(huo)傳代的比(bi)例，和已(yi)知細(xi)胞(bao)的傳代代次(ci)等(deng)信(xin)息。

　　Q5.準備培(pei)養(yang)基(ji)
復(fu)蘇(su)細(xi)胞(bao)時(shi)需(xu)要準備合(he)適的培養(yang)基(ji)，血(xue)清和細胞生長(chang)所(suo)需(xu)的添(tian)加(jia)劑(ji)。大部(bu)分培養(yang)細(xi)胞(bao)所(suo)用(yong)的培養(yang)體(ti)系(xi)，可以(yi)在訂(ding)購(gou)細胞(bao)系(xi)時(shi)獲得(de)。
雖(sui)然(ran)大多數細胞系(xi)可以(yi)在不(bu)止壹(yi)種培養(yang)基(ji)中生長(chang)，但(dan)是(shi)當(dang)培養(yang)基(ji)改(gai)變(bian)時(shi)，細胞(bao)的性(xing)質(zhi)也(ye)會變(bian)化(hua)。因(yin)此，使(shi)用(yong)細胞(bao)庫(ku)推(tui)薦的培養(yang)基(ji)來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)會獲得(de)的效(xiao)果(guo)。

　　Q6.開啟(qi)凍(dong)存(cun)管(guan)
1.準備壹(yi)個培(pei)養(yang)瓶(ping)，加(jia)入(ru)適(shi)宜(yi)細(xi)胞培養(yang)的培養(yang)基(ji)，液(ye)體(ti)體(ti)積(ji)按(an)照(zhao)說明書的推薦配置(zhi)，並(bing)平衡(heng)培養(yang)基(ji)的溫度(du)和(he)pH（CO2）。　
2.在37℃水(shui)浴(yu)中或(huo)細胞的正(zheng)常生長(chang)溫度(du)下(xia)將凍(dong)存(cun)管(guan)輕輕(qing)搖動(dong)。解凍(dong)要快，約(yue)2分(fen)鐘或(huo)直到冰晶融化即可(ke)。
3.從(cong)水(shui)浴(yu)中取(qu)出凍(dong)存(cun)管(guan)並(bing)用(yong)浸泡(pao)或(huo)噴灑70%乙(yi)醇(chun)的方(fang)式(shi)來(lai)消毒。進壹(yi)步(bu)的操(cao)作(zuo)均需(xu)在(zai)無菌操(cao)作(zuo)臺(tai)中嚴格無菌條(tiao)件下(xia)進(jin)行(xing)。
4.擰(ning)開凍(dong)存(cun)管(guan)的管(guan)帽並(bing)將內容物(wu)轉(zhuan)移到(dao)壹個(ge)含(han)有(you)9 ml推(tui)薦(jian)培(pei)養(yang)基(ji)的無菌離(li)心(xin)管(guan)中。通(tong)過(guo)溫和(he)離(li)心(xin)（125×g 10 min）除(chu)去(qu)冷(leng)凍(dong)保(bao)護劑（DMSO）。棄去(qu)上(shang)清，並(bing)用(yong)1或(huo)2 ml*培養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan)細胞(bao)。將這(zhe)些(xie)細胞(bao)懸液(ye)轉(zhuan)移到(dao)含(han)有(you)*培(pei)養(yang)基(ji)的培養(yang)瓶(ping)中並(bing)輕輕搖(yao)動(dong)以*混(hun)勻(yun)。
5.培養(yang)24小(xiao)時(shi)後檢(jian)查細(xi)胞狀(zhuang)態並(bing)在需(xu)要時(shi)進行(xing)傳(chuan)代。

　　Q7. 人(ren)急性(xing)T細胞(bao)白血(xue)病細胞(bao) 培養(yang)用(yong)液(ye)pH對(dui)細胞生長(chang)的影響

　　由於，大多數細胞適宜(yi)pH為(wei)7.2~7.4，偏(pian)離(li)此範圍對(dui)細(xi)胞將產(chan)生有(you)害(hai)的影響。各(ge)種細胞(bao)對pH的要求也(ye)不(bu)*相(xiang)同，原(yuan)代培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)壹(yi)般(ban)對pH變(bian)動(dong)耐受差，無限細(xi)胞系(xi)耐受力(li)強(qiang)。

　　但總體(ti)來說，細胞(bao)耐酸性(xing)比(bi)耐堿性(xing)強壹(yi)些，偏(pian)酸環(huan)境(jing)中更(geng)利(li)於細(xi)胞生長(chang)。因(yin)此，我(wo)們在配制培(pei)養(yang)用(yong)液(ye)時(shi)，可把(ba)液(ye)體(ti)的pH稍微調得(de)偏(pian)酸壹(yi)些(xie)。液(ye)體(ti)在經過(guo)0.10um或(huo)0.22um濾膜過(guo)濾時(shi)，溶液(ye)的pH還會向上(shang)浮(fu)動(dong)0.2左右。

　　人(ren)急性(xing)T細胞(bao)白血(xue)病細胞(bao)質(zhi)量(liang)可(ke)靠(kao)，售後(hou)有(you)保(bao)障(zhang)（編輯(ji)：tanxi）