人肺成纖(xian)維(wei)細(xi)胞

迷(mi)人(ren)的(de)實(shi)驗，放心的(de)選(xuan)擇(ze)

我司細(xi)胞近(jin)3000種，來(lai)源於(yu)美國ATCC,細(xi)胞都是經(jing)過(guo)嚴(yan)格(ge)質量(liang)控制(zhi)，在中(zhong)國(guo)大陸努力(li)搭(da)建正牌(pai)細(xi)胞與國內(nei)廣(guang)大科研人員之間(jian)的(de)溝(gou)通(tong)橋(qiao)梁(liang)。為您提(ti)供人肺成纖(xian)維(wei)細(xi)胞外，還有(you)更(geng)多相關(guan)實(shi)驗產(chan)品(pin)，標(biao)準(zhun)品，細(xi)胞株和(he)實(shi)驗技(ji)術服務等等前期後(hou)續服務。 

人肺成纖(xian)維(wei)細(xi)胞的(de)產(chan)品(pin)介(jie)紹

由(you)我司(si)*銷(xiao)售(shou)。

細(xi)胞株

　　Q1. 液(ye)體培養(yang)基(ji)的(de)保(bao)存(cun)是(shi)冷(leng)藏(zang)好(hao)？還是(shi)冷(leng)凍好(hao)？

　　要冷(leng)藏(zang)！！因(yin)為液(ye)體培養(yang)基(ji)經冷(leng)凍後(hou)再經(jing)溶化時(shi)，其溶液(ye)的(de)pH值(zhi)會(hui)發生改(gai)變，溶液(ye)往(wang)往(wang)變(bian)堿，某(mou)些(xie)成分溶解(jie)也(ye)會受到影(ying)響(xiang)對細(xi)胞生長不(bu)利。故液(ye)體培養(yang)基(ji)壹定要存(cun)放在冷(leng)藏(zang)箱(xiang)中(zhong)，通(tong)常(chang)液(ye)體培養(yang)基(ji)在冷(leng)藏(zang)條件(jian)下(xia)可存(cun)放6個月 ~ 壹年。

人T細(xi)胞性(xing)白(bai)血(xue)病細(xi)胞http://www.。。ｃｏｍ/goodsid/fenleisan/3419600/1.html

　　Q2. 液(ye)體培養(yang)基(ji)中(zhong)谷(gu)氨(an)酰胺的(de)作(zuo)用(yong)，及(ji)使(shi)用(yong)方(fang)法(fa)。

　　幾乎(hu)所有(you)的(de)細(xi)胞對谷氨(an)酰胺有(you)較高(gao)的(de)要求，細(xi)胞需(xu)要谷氨(an)酰胺合成蛋白(bai)質，在缺(que)少(shao)谷(gu)氨(an)酰胺時(shi)，細(xi)胞生長不(bu)良(liang)而死亡。所(suo)以，各(ge)種(zhong)培養(yang)液(ye)中(zhong)都(dou)含(han)有(you)較大量的(de)谷(gu)氨(an)酰胺。谷(gu)氨(an)酰胺在溶液(ye)中(zhong)很不(bu)穩定，應置(zhi)-20 ?C冰凍保存(cun)，用(yong)前加入(ru)培養(yang)基(ji)中(zhong)。加有(you)谷氨(an)酰胺的(de)液(ye)體培養(yang)基(ji)4 ?C 冰箱(xiang)儲(chu)存(cun)兩(liang)周(zhou)以上(shang)時(shi)，應重(zhong)新(xin)加入(ru)原來(lai)量的(de)谷(gu)氨(an)酰胺。基(ji)礎醫(yi)學(xue)細(xi)胞中(zhong)心在其(qi)服務項(xiang)目(mu)中(zhong)配(pei)制(zhi)分裝(zhuang)了(le)高(gao)濃度(du)（100倍）的(de)谷(gu)氨(an)酰胺溶液(ye)（1ml/支(zhi)）。每支(zhi)1ml的(de)谷(gu)氨(an)酰胺加到99ml*培養(yang)基(ji)中(zhong)，其(qi)終(zhong)濃度(du)為2mM/ml培養(yang)基(ji)。包裝為粉紅(hong)色(se)，-24?C保(bao)存(cun)。

　　Q3.細(xi)胞計(ji)數及存(cun)活(huo)測(ce)試
1、原理(li)：
(1)計(ji)算細(xi)胞數目(mu)可用(yong)血(xue)球計(ji)數盤或是(shi)Coultercounter粒子(zi)計(ji)數器(qi)自動(dong)計(ji)數。
(2)血(xue)球計(ji)數盤壹般有(you)二個chambers，每個chamber中(zhong)細(xi)刻9個1mm2大正方(fang)形(xing)，其中(zhong)4個角落(luo)之正方(fang)形(xing)再細(xi)刻16個小格(ge)，深度(du)均(jun)為0.1mm。當chamber上方(fang)蓋(gai)上蓋玻片(pian)後(hou)，每個大正方(fang)形(xing)之體積(ji)為1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使(shi)用(yong)時(shi)，計(ji)數每個大正方(fang)形(xing)內之細(xi)胞數目(mu)，乘以稀(xi)釋倍數，再乘以104，即為每ml中(zhong)之細(xi)胞數目(mu)。
(3)存(cun)活(huo)測(ce)試之步(bu)驟(zhou)為dyeexclusion，利用(yong)染料會滲入(ru)死細(xi)胞中(zhong)而呈色(se)，而活細(xi)胞因細(xi)胞膜完整，染料無法(fa)滲(shen)入(ru)而不(bu)會(hui)呈色(se)。壹般使(shi)用(yong)藍色(se)之trypan blue染料，如果細(xi)胞不(bu)易(yi)吸(xi)收(shou)trypan blue，則(ze)用(yong)紅(hong)色(se)之Erythrosin bluish。計(ji)算細(xi)胞活率(lv)：活細(xi)胞數/(活細(xi)胞數+死細(xi)胞數)×100%。計(ji)數應在臺盼(pan)蘭(lan)染色(se)後(hou)數分鐘(zhong)內(nei)完(wan)成，隨時(shi)間(jian)延(yan)長，部分活(huo)細(xi)胞也(ye)開始攝(she)取染料;因為臺盼(pan)蘭(lan)對(dui)蛋白(bai)質有(you)很強的(de)親(qin)和(he)力(li)，用(yong)不(bu)含(han)血(xue)清(qing)的(de)稀(xi)釋液(ye)，可(ke)以使(shi)染色(se)計(ji)數更(geng)為準(zhun)確。

　　Q4.細(xi)胞特(te)性(xing)
在細(xi)胞培養(yang)之前，我們(men)要了解壹下妳(ni)所要養(yang)細(xi)胞的(de)基(ji)本(ben)特(te)性(xing)，這(zhe)點(dian)可(ke)以從(cong)細(xi)胞的(de)產(chan)品(pin)說(shuo)明書或者從(cong)ATCC細(xi)胞庫查(zha)詢。除此(ci)之外(wai)我(wo)們(men)還要知(zhi)道(dao)每管(guan)細(xi)胞的(de)數量，建議(yi)分裂或(huo)傳(chuan)代的(de)比(bi)例，和(he)已(yi)知(zhi)細(xi)胞的(de)傳(chuan)代代(dai)次(ci)等信(xin)息。

　　Q5.準(zhun)備培養(yang)基(ji)
復蘇(su)細(xi)胞時(shi)需(xu)要準(zhun)備合適(shi)的(de)培養(yang)基(ji)，血(xue)清(qing)和(he)細(xi)胞生長所(suo)需(xu)的(de)添(tian)加劑(ji)。大部分培養(yang)細(xi)胞所用(yong)的(de)培養(yang)體系，可以在訂購(gou)細(xi)胞系時(shi)獲(huo)得。
雖(sui)然(ran)大多數細(xi)胞系可以在不(bu)止(zhi)壹種培養(yang)基(ji)中(zhong)生長，但(dan)是(shi)當培養(yang)基(ji)改(gai)變時(shi)，細(xi)胞的(de)性(xing)質(zhi)也(ye)會變化。因此(ci)，使(shi)用(yong)細(xi)胞庫推(tui)薦的(de)培養(yang)基(ji)來(lai)培養(yang)細(xi)胞會獲(huo)得的(de)效果。

　　Q6.開啟(qi)凍存(cun)管(guan)
1.準(zhun)備壹個培養(yang)瓶(ping)，加入(ru)適宜(yi)細(xi)胞培養(yang)的(de)培養(yang)基(ji)，液(ye)體體積(ji)按照說(shuo)明(ming)書的(de)推(tui)薦配(pei)置(zhi)，並平(ping)衡培養(yang)基(ji)的(de)溫(wen)度(du)和(he)pH（CO2）。　
2.在37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)或(huo)細(xi)胞的(de)正常(chang)生長溫(wen)度(du)下(xia)將(jiang)凍存(cun)管(guan)輕(qing)輕(qing)搖(yao)動(dong)。解(jie)凍要快(kuai)，約(yue)2分鐘(zhong)或(huo)直(zhi)到冰(bing)晶(jing)融化即可(ke)。
3.從水浴(yu)中(zhong)取(qu)出(chu)凍存(cun)管(guan)並用(yong)浸(jin)泡(pao)或(huo)噴(pen)灑(sa)70%乙醇(chun)的(de)方(fang)式(shi)來(lai)消(xiao)毒。進壹步(bu)的(de)操作均需(xu)在無菌(jun)操作臺中(zhong)嚴(yan)格(ge)無菌(jun)條件(jian)下(xia)進行。
4.擰開(kai)凍存(cun)管(guan)的(de)管(guan)帽(mao)並將(jiang)內容物轉移(yi)到壹個含(han)有(you)9 ml推(tui)薦培養(yang)基(ji)的(de)無菌(jun)離(li)心管中(zhong)。通(tong)過(guo)溫(wen)和(he)離(li)心（125×g 10 min）除去(qu)冷(leng)凍保護(hu)劑(ji)（DMSO）。棄去上(shang)清，並用(yong)1或(huo)2 ml*培養(yang)基(ji)重懸細(xi)胞。將(jiang)這些(xie)細(xi)胞懸液(ye)轉移(yi)到含(han)有(you)*培養(yang)基(ji)的(de)培養(yang)瓶(ping)中(zhong)並輕(qing)輕(qing)搖(yao)動(dong)以*混(hun)勻(yun)。
5.培養(yang)24小(xiao)時(shi)後(hou)檢查(zha)細(xi)胞狀態並在需(xu)要時(shi)進行傳(chuan)代。

　　Q7. 培養(yang)用(yong)液(ye)pH對(dui)細(xi)胞生長的(de)影(ying)響(xiang)

　　由(you)於，大多數細(xi)胞適宜pH為7.2~7.4，偏(pian)離(li)此(ci)範圍對(dui)細(xi)胞將(jiang)產生有(you)害的(de)影(ying)響(xiang)。各(ge)種(zhong)細(xi)胞對pH的(de)要求也(ye)不(bu)*相同，原(yuan)代(dai)培養(yang)細(xi)胞壹般對(dui)pH變動(dong)耐(nai)受(shou)差(cha)，無限(xian)細(xi)胞系耐(nai)受(shou)力(li)強。

　　但總體來(lai)說，細(xi)胞耐(nai)酸性(xing)比(bi)耐(nai)堿性(xing)強壹些(xie)，偏(pian)酸環(huan)境中(zhong)更(geng)利於細(xi)胞生長。因(yin)此(ci)，我(wo)們(men)在配(pei)制(zhi)培養(yang)用(yong)液(ye)時(shi)，可把液(ye)體的(de)pH稍(shao)微(wei)調(tiao)得偏(pian)酸壹些(xie)。液(ye)體在經(jing)過(guo)0.10um或(huo)0.22um濾(lv)膜(mo)過(guo)濾(lv)時(shi)，溶液(ye)的(de)pH還會(hui)向上浮(fu)動(dong)0.2左右(you)。

　　質量可靠(kao)，售(shou)後(hou)有(you)保障(zhang)（編(bian)輯(ji)：tanxi）