人(ren)肺大(da)靜脈平(ping)滑肌細(xi)胞

迷人(ren)的實(shi)驗，放(fang)心(xin)的(de)選擇(ze)

我(wo)司(si)細(xi)胞近3000種，來源(yuan)於(yu)美國(guo)ATCC,細(xi)胞都是經過嚴格(ge)質(zhi)量(liang)控制，在(zai)中(zhong)國(guo)大陸(lu)努力(li)搭(da)建(jian)正牌細(xi)胞與(yu)國(guo)內(nei)廣(guang)大科(ke)研人(ren)員之(zhi)間的溝(gou)通(tong)橋(qiao)梁。為您(nin)提(ti)供人(ren)肺大(da)靜脈平(ping)滑肌細(xi)胞外，還有更(geng)多相關實(shi)驗產(chan)品，標準(zhun)品，細(xi)胞株和(he)實驗技術服(fu)務(wu)等(deng)等前期後(hou)續服務(wu)。 

人(ren)肺大(da)靜脈平(ping)滑肌細(xi)胞的產品介(jie)紹(shao)

由(you)我(wo)司(si)*銷售(shou)。

細(xi)胞株

　　Q1. 液體(ti)培(pei)養(yang)基的保存是(shi)冷(leng)藏好？還是冷(leng)凍好？

　　要(yao)冷(leng)藏！！因為液體(ti)培(pei)養(yang)基經冷(leng)凍後再(zai)經溶(rong)化(hua)時，其溶(rong)液的pH值(zhi)會(hui)發生(sheng)改(gai)變，溶(rong)液往(wang)往(wang)變堿，某(mou)些成分(fen)溶(rong)解也(ye)會(hui)受到(dao)影(ying)響對細(xi)胞生(sheng)長(chang)不(bu)利。故(gu)液體(ti)培(pei)養(yang)基壹定(ding)要(yao)存放(fang)在(zai)冷(leng)藏箱中，通(tong)常液體(ti)培(pei)養(yang)基在冷(leng)藏條件(jian)下(xia)可存放(fang)6個(ge)月(yue) ~ 壹年。

淋(lin)巴瘤細(xi)胞http://www.。。ｃｏｍ/goodsid/fenleisan/3419594/1.html

　　Q2. 液體(ti)培(pei)養(yang)基中谷氨酰(xian)胺的作(zuo)用(yong)，及使用方法。

　　幾乎(hu)所(suo)有的(de)細(xi)胞對谷氨酰(xian)胺有較(jiao)高的(de)要(yao)求(qiu)，細(xi)胞需(xu)要谷氨酰(xian)胺合成蛋(dan)白(bai)質(zhi)，在缺(que)少谷氨酰(xian)胺時，細(xi)胞生(sheng)長(chang)不(bu)良而(er)死亡(wang)。所(suo)以(yi)，各(ge)種培(pei)養(yang)液中都(dou)含(han)有較(jiao)大量(liang)的谷氨酰(xian)胺。谷氨酰(xian)胺在溶(rong)液中很(hen)不(bu)穩定(ding)，應(ying)置-20 ?C冰凍保存，用(yong)前加入培養基中。加有谷氨酰(xian)胺的液體(ti)培(pei)養(yang)基4 ?C 冰箱儲(chu)存兩周以(yi)上(shang)時，應(ying)重新加入原來量(liang)的谷氨酰(xian)胺。基礎醫學(xue)細(xi)胞中心(xin)在(zai)其服務(wu)項目(mu)中(zhong)配(pei)制分(fen)裝(zhuang)了高濃(nong)度(du)（100倍）的谷氨酰(xian)胺溶(rong)液（1ml/支）。每支(zhi)1ml的(de)谷氨酰(xian)胺加到(dao)99ml*培養(yang)基中，其終濃度(du)為2mM/ml培養(yang)基。包裝(zhuang)為粉(fen)紅(hong)色(se)，-24?C保存。

　　Q3.細(xi)胞計(ji)數及存活測(ce)試(shi)
1、原理(li)：
(1)計(ji)算(suan)細(xi)胞數目(mu)可(ke)用(yong)血球計(ji)數盤(pan)或(huo)是(shi)Coultercounter粒子計(ji)數器(qi)自動(dong)計(ji)數。
(2)血球計(ji)數盤(pan)壹般(ban)有二(er)個(ge)chambers，每個(ge)chamber中(zhong)細(xi)刻9個(ge)1mm2大正方形(xing)，其中4個角落(luo)之(zhi)正方形(xing)再(zai)細(xi)刻16個(ge)小格(ge)，深度均為0.1mm。當chamber上(shang)方(fang)蓋上(shang)蓋(gai)玻(bo)片後(hou)，每個(ge)大(da)正方形(xing)之(zhi)體(ti)積(ji)為1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使用時，計(ji)數每個(ge)大(da)正方形(xing)內(nei)之(zhi)細(xi)胞數目(mu)，乘(cheng)以(yi)稀(xi)釋(shi)倍數，再(zai)乘(cheng)以(yi)104，即(ji)為每ml中(zhong)之(zhi)細(xi)胞數目(mu)。
(3)存活測(ce)試(shi)之(zhi)步(bu)驟(zhou)為dyeexclusion，利用(yong)染(ran)料會(hui)滲(shen)入死細(xi)胞中而呈色(se)，而活細(xi)胞因細(xi)胞膜完整(zheng)，染(ran)料無法滲入而(er)不(bu)會(hui)呈(cheng)色(se)。壹般(ban)使用藍色(se)之(zhi)trypan blue染(ran)料，如(ru)果細(xi)胞不(bu)易吸(xi)收trypan blue，則(ze)用紅(hong)色(se)之(zhi)Erythrosin bluish。計(ji)算(suan)細(xi)胞活率(lv)：活細(xi)胞數/(活細(xi)胞數+死細(xi)胞數)×100%。計(ji)數應(ying)在臺(tai)盼(pan)蘭染(ran)色(se)後數分(fen)鐘內(nei)完成，隨(sui)時間延(yan)長(chang)，部分活細(xi)胞也(ye)開(kai)始(shi)攝取染(ran)料;因(yin)為臺(tai)盼(pan)蘭對蛋白質(zhi)有很(hen)強(qiang)的(de)親(qin)和(he)力(li)，用不(bu)含血清(qing)的稀(xi)釋(shi)液，可以(yi)使染(ran)色(se)計(ji)數更(geng)為準確(que)。

　　Q4.細(xi)胞特性
在細(xi)胞培養之(zhi)前，我們(men)要了解壹下(xia)妳所要養細(xi)胞的基本特性(xing)，這點(dian)可以從(cong)細(xi)胞的產品說明書或(huo)者從(cong)ATCC細(xi)胞庫(ku)查詢。除此(ci)之(zhi)外我們(men)還要知(zhi)道(dao)每管(guan)細(xi)胞的數量(liang)，建議(yi)分(fen)裂(lie)或傳(chuan)代(dai)的(de)比例(li)，和(he)已知(zhi)細(xi)胞的傳代代(dai)次(ci)等(deng)信(xin)息。

　　Q5.準(zhun)備(bei)培養(yang)基
復(fu)蘇細(xi)胞時需(xu)要準(zhun)備(bei)合適(shi)的(de)培養基，血清(qing)和(he)細(xi)胞生(sheng)長(chang)所(suo)需(xu)的添(tian)加劑(ji)。大部分培(pei)養細(xi)胞所用的培(pei)養(yang)體(ti)系(xi)，可(ke)以(yi)在訂購細(xi)胞系時獲得(de)。
雖(sui)然大多(duo)數細(xi)胞系可以在(zai)不(bu)止壹種(zhong)培(pei)養基中生(sheng)長(chang)，但(dan)是當培(pei)養(yang)基改(gai)變時，細(xi)胞的性質(zhi)也(ye)會(hui)變(bian)化。因此(ci)，使用細(xi)胞庫(ku)推薦(jian)的培(pei)養基來培(pei)養(yang)細(xi)胞會(hui)獲(huo)得的效(xiao)果。

　　Q6.開(kai)啟(qi)凍存管(guan)
1.準(zhun)備(bei)壹個(ge)培(pei)養瓶(ping)，加入適宜細(xi)胞培養的培(pei)養(yang)基，液體(ti)體(ti)積(ji)按照說明書的(de)推薦(jian)配(pei)置(zhi)，並(bing)平(ping)衡(heng)培(pei)養基的溫度和(he)pH（CO2）。　
2.在37℃水(shui)浴(yu)中或細(xi)胞的正常生(sheng)長(chang)溫(wen)度下將(jiang)凍存管(guan)輕輕搖(yao)動。解凍要快(kuai)，約2分(fen)鐘(zhong)或直到(dao)冰晶(jing)融化(hua)即(ji)可(ke)。
3.從(cong)水(shui)浴(yu)中取出(chu)凍存管(guan)並(bing)用(yong)浸(jin)泡(pao)或噴灑70%乙醇(chun)的方(fang)式來消(xiao)毒(du)。進壹步(bu)的(de)操(cao)作(zuo)均需(xu)在無菌(jun)操(cao)作(zuo)臺(tai)中(zhong)嚴格無菌(jun)條件(jian)下(xia)進行。
4.擰(ning)開(kai)凍存管(guan)的(de)管(guan)帽並(bing)將(jiang)內(nei)容(rong)物轉(zhuan)移到(dao)壹個(ge)含(han)有9 ml推(tui)薦培養基的無菌(jun)離心(xin)管(guan)中。通(tong)過溫和(he)離心(xin)（125×g 10 min）除(chu)去冷(leng)凍保護(hu)劑(ji)（DMSO）。棄去(qu)上(shang)清(qing)，並(bing)用(yong)1或(huo)2 ml*培(pei)養基重懸細(xi)胞。將這些細(xi)胞懸液轉移到(dao)含有*培(pei)養基的培養瓶(ping)中並(bing)輕輕搖(yao)動以(yi)*混(hun)勻(yun)。
5.培(pei)養(yang)24小時後檢(jian)查(zha)細(xi)胞狀態並(bing)在(zai)需(xu)要時進行傳(chuan)代。

　　Q7. 培(pei)養(yang)用(yong)液pH對細(xi)胞生(sheng)長(chang)的(de)影(ying)響

　　由(you)於(yu)，大(da)多數細(xi)胞適宜pH為7.2~7.4，偏離此(ci)範(fan)圍對細(xi)胞將產生(sheng)有害(hai)的影(ying)響。各(ge)種細(xi)胞對pH的要求(qiu)也(ye)不(bu)*相同(tong)，原代培養細(xi)胞壹般(ban)對pH變動耐受差(cha)，無限(xian)細(xi)胞系耐受力(li)強(qiang)。

　　但(dan)總(zong)體(ti)來說，細(xi)胞耐酸(suan)性(xing)比耐堿性強(qiang)壹些，偏酸(suan)環(huan)境(jing)中更(geng)利於細(xi)胞生(sheng)長(chang)。因(yin)此(ci)，我(wo)們(men)在配制培(pei)養(yang)用液時，可把(ba)液體(ti)的(de)pH稍微調得(de)偏酸(suan)壹些。液體(ti)在(zai)經過0.10um或0.22um濾(lv)膜過濾(lv)時，溶(rong)液的pH還(hai)會(hui)向(xiang)上(shang)浮(fu)動0.2左右。

　　質(zhi)量(liang)可靠(kao)，售(shou)後有保(bao)障（編輯：tanxi）