人(ren)卵(luan)巢畸(ji)胎瘤(liu)細(xi)胞(bao)

迷人(ren)的(de)實(shi)驗，放心的選(xuan)擇(ze)

我(wo)司(si)細(xi)胞(bao)近3000種，來源(yuan)於美(mei)國ATCC,細(xi)胞(bao)都是(shi)經(jing)過(guo)嚴(yan)格質量(liang)控(kong)制，在中國大陸努(nu)力(li)搭建(jian)正牌細(xi)胞(bao)與國內(nei)廣(guang)大科(ke)研(yan)人(ren)員之間的溝(gou)通橋(qiao)梁。為(wei)您提(ti)供(gong)人(ren)卵(luan)巢畸(ji)胎瘤(liu)細(xi)胞(bao)外，還(hai)有(you)更多相(xiang)關實(shi)驗產(chan)品(pin)，標準(zhun)品，細(xi)胞(bao)株和(he)實(shi)驗技(ji)術(shu)服(fu)務等(deng)等(deng)前(qian)期(qi)後(hou)續(xu)服(fu)務。 

人(ren)卵(luan)巢畸(ji)胎瘤(liu)細(xi)胞(bao)的產(chan)品(pin)介(jie)紹

由(you)我(wo)司(si)*銷(xiao)售。

細(xi)胞(bao)株

　　Q1. 液體培養(yang)基(ji)的(de)保(bao)存是(shi)冷(leng)藏好(hao)？還(hai)是(shi)冷(leng)凍(dong)好？

　　要(yao)冷(leng)藏！！因為(wei)液體培養(yang)基(ji)經(jing)冷(leng)凍(dong)後(hou)再(zai)經(jing)溶化時(shi)，其(qi)溶液的pH值(zhi)會發生改(gai)變，溶液往(wang)往(wang)變(bian)堿(jian)，某(mou)些(xie)成分(fen)溶解(jie)也會受(shou)到影(ying)響(xiang)對(dui)細(xi)胞(bao)生長(chang)不利。故(gu)液體培養(yang)基(ji)壹定(ding)要(yao)存放在冷(leng)藏箱中，通常(chang)液體培養(yang)基(ji)在冷(leng)藏條(tiao)件(jian)下(xia)可存放6個月 ~ 壹年(nian)。

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　　Q2. 液體培養(yang)基(ji)中谷氨酰胺的(de)作(zuo)用(yong)，及使(shi)用(yong)方法。

　　幾(ji)乎所有(you)的細(xi)胞(bao)對(dui)谷氨酰胺有(you)較高(gao)的(de)要(yao)求(qiu)，細(xi)胞(bao)需(xu)要(yao)谷(gu)氨酰胺合(he)成蛋(dan)白(bai)質，在缺(que)少(shao)谷(gu)氨酰胺時(shi)，細(xi)胞(bao)生長(chang)不良(liang)而死(si)亡(wang)。所以，各(ge)種培養(yang)液中都含有(you)較大量(liang)的(de)谷氨酰胺。谷(gu)氨酰胺在溶液中很不穩(wen)定(ding)，應置(zhi)-20 ?C冰(bing)凍(dong)保(bao)存，用(yong)前(qian)加(jia)入培養基(ji)中。加(jia)有谷氨酰胺的(de)液體培養(yang)基(ji)4 ?C 冰(bing)箱儲(chu)存兩(liang)周以上(shang)時(shi)，應重(zhong)新(xin)加(jia)入原來量(liang)的(de)谷氨酰胺。基(ji)礎醫學細(xi)胞(bao)中心在其(qi)服務項目(mu)中配制分裝(zhuang)了高(gao)濃度(du)（100倍）的(de)谷氨酰胺溶液（1ml/支）。每支(zhi)1ml的(de)谷氨酰胺加(jia)到99ml*培養(yang)基(ji)中，其(qi)終濃度(du)為(wei)2mM/ml培(pei)養基(ji)。包(bao)裝(zhuang)為(wei)粉(fen)紅(hong)色，-24?C保(bao)存。

　　Q3.細(xi)胞(bao)計數(shu)及(ji)存活(huo)測(ce)試(shi)
1、原理(li)：
(1)計算(suan)細(xi)胞(bao)數目(mu)可(ke)用(yong)血(xue)球(qiu)計數盤(pan)或(huo)是Coultercounter粒(li)子計數器自動計(ji)數。
(2)血(xue)球(qiu)計數盤(pan)壹般有二個chambers，每個(ge)chamber中細(xi)刻(ke)9個1mm2大正方形(xing)，其(qi)中4個角(jiao)落之正方形(xing)再(zai)細(xi)刻(ke)16個小(xiao)格，深(shen)度(du)均為(wei)0.1mm。當(dang)chamber上方蓋上(shang)蓋玻(bo)片(pian)後(hou)，每個(ge)大正方形(xing)之體(ti)積為(wei)1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使(shi)用(yong)時，計(ji)數每個(ge)大正方形(xing)內(nei)之細(xi)胞(bao)數目(mu)，乘(cheng)以稀(xi)釋倍(bei)數(shu)，再(zai)乘以104，即為(wei)每ml中之細(xi)胞(bao)數目(mu)。
(3)存活(huo)測(ce)試(shi)之步(bu)驟為(wei)dyeexclusion，利(li)用(yong)染料(liao)會滲(shen)入死細(xi)胞(bao)中而呈(cheng)色(se)，而活(huo)細(xi)胞(bao)因細(xi)胞(bao)膜(mo)完(wan)整(zheng)，染(ran)料(liao)無法(fa)滲(shen)入而不(bu)會(hui)呈(cheng)色(se)。壹般使(shi)用(yong)藍色(se)之trypan blue染(ran)料(liao)，如果細(xi)胞(bao)不易(yi)吸(xi)收(shou)trypan blue，則(ze)用(yong)紅色(se)之Erythrosin bluish。計(ji)算(suan)細(xi)胞(bao)活率：活細(xi)胞(bao)數/(活(huo)細(xi)胞(bao)數+死(si)細(xi)胞(bao)數)×100%。計(ji)數(shu)應在臺(tai)盼(pan)蘭染(ran)色(se)後(hou)數(shu)分(fen)鐘內完(wan)成，隨時(shi)間延長(chang)，部分活細(xi)胞(bao)也開始(shi)攝取染料(liao);因為(wei)臺(tai)盼(pan)蘭對(dui)蛋白(bai)質有(you)很(hen)強(qiang)的親(qin)和(he)力(li)，用(yong)不含血(xue)清(qing)的(de)稀(xi)釋液，可以使(shi)染(ran)色(se)計(ji)數更為(wei)準(zhun)確(que)。

　　Q4.細(xi)胞(bao)特(te)性(xing)
在細(xi)胞(bao)培養(yang)之前(qian)，我(wo)們(men)要(yao)了(le)解(jie)壹下妳所要(yao)養(yang)細(xi)胞(bao)的基(ji)本(ben)特(te)性(xing)，這點可(ke)以從(cong)細(xi)胞(bao)的產(chan)品(pin)說(shuo)明(ming)書或(huo)者(zhe)從(cong)ATCC細(xi)胞(bao)庫查(zha)詢(xun)。除(chu)此(ci)之外(wai)我(wo)們(men)還(hai)要(yao)知(zhi)道每管細(xi)胞(bao)的數(shu)量(liang)，建(jian)議(yi)分(fen)裂(lie)或(huo)傳(chuan)代(dai)的(de)比例(li)，和(he)已知細(xi)胞(bao)的傳(chuan)代(dai)代(dai)次等(deng)信(xin)息(xi)。

　　Q5.準(zhun)備(bei)培養(yang)基(ji)
復(fu)蘇(su)細(xi)胞(bao)時需(xu)要(yao)準(zhun)備(bei)合適(shi)的培養基(ji)，血(xue)清(qing)和(he)細(xi)胞(bao)生長(chang)所需(xu)的(de)添加(jia)劑。大部分培養細(xi)胞(bao)所用(yong)的培(pei)養體(ti)系，可以在訂購(gou)細(xi)胞(bao)系時(shi)獲得。
雖然大多數細(xi)胞(bao)系可(ke)以在不止壹種培養(yang)基(ji)中生長(chang)，但是當(dang)培養(yang)基(ji)改(gai)變時(shi)，細(xi)胞(bao)的性(xing)質也會變(bian)化。因此(ci)，使(shi)用(yong)細(xi)胞(bao)庫推(tui)薦(jian)的培(pei)養(yang)基(ji)來培養(yang)細(xi)胞(bao)會獲得的效果(guo)。

　　Q6.開啟凍(dong)存管
1.準(zhun)備(bei)壹個培養瓶，加(jia)入適宜細(xi)胞(bao)培養(yang)的(de)培養(yang)基(ji)，液體體積按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書的推薦配置(zhi)，並(bing)平(ping)衡(heng)培養基(ji)的(de)溫度(du)和(he)pH（CO2）。　
2.在37℃水浴中或(huo)細(xi)胞(bao)的正常(chang)生長(chang)溫度(du)下將凍存管輕輕搖(yao)動。解(jie)凍(dong)要(yao)快，約(yue)2分鐘(zhong)或(huo)直到(dao)冰晶融化即可。
3.從(cong)水浴中取出(chu)凍存管並用(yong)浸泡(pao)或(huo)噴灑(sa)70%乙醇(chun)的方式來消毒(du)。進(jin)壹步的操作(zuo)均需(xu)在無菌(jun)操作(zuo)臺(tai)中嚴格無菌(jun)條件(jian)下(xia)進(jin)行。
4.擰開凍(dong)存管的管帽並將內容(rong)物轉移到壹個含有(you)9 ml推薦(jian)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)無(wu)菌(jun)離心管中。通過(guo)溫和(he)離心（125×g 10 min）除(chu)去冷(leng)凍(dong)保護(hu)劑(ji)（DMSO）。棄去上清，並(bing)用(yong)1或(huo)2 ml*培養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)。將這些(xie)細(xi)胞(bao)懸液轉移到含有(you)*培養(yang)基(ji)的(de)培(pei)養瓶中並輕輕(qing)搖動以*混勻。
5.培養(yang)24小(xiao)時後(hou)檢(jian)查(zha)細(xi)胞(bao)狀態並在需(xu)要(yao)時(shi)進(jin)行傳(chuan)代(dai)。

　　Q7. 培養用(yong)液pH對(dui)細(xi)胞(bao)生長(chang)的影(ying)響(xiang)

　　由(you)於，大多數細(xi)胞(bao)適宜(yi)pH為(wei)7.2~7.4，偏離此(ci)範圍對(dui)細(xi)胞(bao)將產(chan)生有害的影(ying)響(xiang)。各(ge)種細(xi)胞(bao)對(dui)pH的要(yao)求(qiu)也不*相(xiang)同(tong)，原代(dai)培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)壹般對(dui)pH變動耐受(shou)差，無限(xian)細(xi)胞(bao)系耐受(shou)力(li)強(qiang)。

　　但總(zong)體(ti)來說(shuo)，細(xi)胞(bao)耐酸(suan)性(xing)比耐堿(jian)性(xing)強(qiang)壹些(xie)，偏酸環境(jing)中更利於細(xi)胞(bao)生長(chang)。因此(ci)，我(wo)們(men)在配制培養(yang)用(yong)液時，可把(ba)液體的pH稍(shao)微(wei)調得偏酸壹些(xie)。液體在經(jing)過(guo)0.10um或(huo)0.22um濾膜(mo)過(guo)濾(lv)時，溶液的pH還(hai)會(hui)向上浮(fu)動0.2左右。

　　質量(liang)可(ke)靠(kao)，售後(hou)有(you)保(bao)障（編輯(ji)：tanxi）