人(ren)卵巢畸(ji)形瘤細(xi)胞(bao)

迷(mi)人(ren)的實驗，放(fang)心的選(xuan)擇

我(wo)司(si)細(xi)胞(bao)近3000種，來源(yuan)於(yu)美(mei)國(guo)ATCC,細(xi)胞(bao)都是經(jing)過嚴格(ge)質量控制(zhi)，在中國(guo)大(da)陸努力搭建正牌(pai)細(xi)胞(bao)與國(guo)內(nei)廣大(da)科研(yan)人員之(zhi)間的溝通橋(qiao)梁(liang)。為您(nin)提(ti)供(gong)人(ren)卵巢畸(ji)形瘤細(xi)胞(bao)外(wai)，還有(you)更(geng)多(duo)相關(guan)實(shi)驗產(chan)品(pin)，標(biao)準品(pin)，細(xi)胞(bao)株和實驗技(ji)術(shu)服務(wu)等(deng)等(deng)前期(qi)後(hou)續服務(wu)。 

人(ren)卵巢畸(ji)形瘤細(xi)胞(bao)的產(chan)品(pin)介(jie)紹(shao)

由(you)我(wo)司(si)*銷(xiao)售(shou)。

細(xi)胞(bao)株

　　Q1. 液體培(pei)養基的保(bao)存(cun)是冷(leng)藏(zang)好(hao)？還是冷(leng)凍(dong)好(hao)？

　　要(yao)冷(leng)藏(zang)！！因為液體培(pei)養基經(jing)冷(leng)凍(dong)後(hou)再經(jing)溶化(hua)時(shi)，其(qi)溶液的pH值會發生改(gai)變(bian)，溶液往(wang)往變(bian)堿，某些(xie)成分溶解也會受(shou)到影響(xiang)對(dui)細(xi)胞(bao)生長不利。故(gu)液體培(pei)養基壹(yi)定(ding)要(yao)存放(fang)在冷(leng)藏(zang)箱(xiang)中，通常(chang)液體培(pei)養基在冷(leng)藏(zang)條(tiao)件(jian)下(xia)可(ke)存(cun)放(fang)6個月 ~ 壹年(nian)。

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　　Q2. 液體培(pei)養基中谷(gu)氨酰胺(an)的作(zuo)用，及使用方法。

　　幾(ji)乎(hu)所有(you)的細(xi)胞(bao)對谷(gu)氨酰胺(an)有(you)較高的要(yao)求(qiu)，細(xi)胞(bao)需(xu)要(yao)谷(gu)氨酰胺(an)合成蛋(dan)白(bai)質，在缺少谷(gu)氨酰胺(an)時(shi)，細(xi)胞(bao)生長不良而(er)死(si)亡(wang)。所以，各種(zhong)培(pei)養液中都(dou)含(han)有(you)較大(da)量的谷(gu)氨酰胺(an)。谷(gu)氨酰胺(an)在溶液中很(hen)不穩定(ding)，應(ying)置(zhi)-20 ?C冰凍(dong)保(bao)存(cun)，用前加(jia)入(ru)培(pei)養基中。加(jia)有(you)谷(gu)氨酰胺(an)的液體培(pei)養基4 ?C 冰(bing)箱儲(chu)存兩(liang)周(zhou)以(yi)上(shang)時(shi)，應(ying)重新(xin)加(jia)入(ru)原來量(liang)的谷(gu)氨酰胺(an)。基礎(chu)醫(yi)學細(xi)胞(bao)中心在其服務(wu)項(xiang)目中配(pei)制(zhi)分裝(zhuang)了(le)高濃(nong)度（100倍(bei)）的谷(gu)氨酰胺(an)溶液（1ml/支）。每支1ml的谷(gu)氨酰胺(an)加(jia)到99ml*培(pei)養基中，其(qi)終濃(nong)度為(wei)2mM/ml培(pei)養基。包裝(zhuang)為(wei)粉紅色(se)，-24?C保(bao)存(cun)。

　　Q3.細(xi)胞(bao)計數及(ji)存(cun)活(huo)測試
1、原理(li)：
(1)計算(suan)細(xi)胞(bao)數目(mu)可(ke)用血(xue)球(qiu)計數盤或是Coultercounter粒子(zi)計數器(qi)自(zi)動(dong)計數。
(2)血(xue)球(qiu)計數盤壹(yi)般(ban)有(you)二個chambers，每個chamber中細(xi)刻(ke)9個1mm2大(da)正方形(xing)，其(qi)中4個角落之(zhi)正方形(xing)再細(xi)刻(ke)16個小格(ge)，深度(du)均(jun)為0.1mm。當(dang)chamber上(shang)方蓋(gai)上(shang)蓋玻(bo)片後(hou)，每個大(da)正方形(xing)之(zhi)體積(ji)為(wei)1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使用時(shi)，計數每個大(da)正方形(xing)內(nei)之(zhi)細(xi)胞(bao)數目(mu)，乘以稀(xi)釋倍數，再乘以104，即為(wei)每ml中之(zhi)細(xi)胞(bao)數目(mu)。
(3)存(cun)活(huo)測試之(zhi)步(bu)驟(zhou)為(wei)dyeexclusion，利用染(ran)料(liao)會滲入(ru)死(si)細(xi)胞(bao)中而(er)呈色，而活(huo)細(xi)胞(bao)因細(xi)胞(bao)膜(mo)完整，染(ran)料(liao)無法滲入(ru)而不會呈色。壹般(ban)使用藍(lan)色之(zhi)trypan blue染(ran)料(liao)，如果細(xi)胞(bao)不易吸(xi)收trypan blue，則用紅色(se)之(zhi)Erythrosin bluish。計算(suan)細(xi)胞(bao)活率：活細(xi)胞(bao)數/(活(huo)細(xi)胞(bao)數+死(si)細(xi)胞(bao)數)×100%。計數應(ying)在臺盼蘭(lan)染(ran)色(se)後(hou)數分鐘內完成，隨(sui)時(shi)間延(yan)長，部分活細(xi)胞(bao)也開(kai)始攝(she)取(qu)染(ran)料(liao);因為臺盼蘭(lan)對(dui)蛋(dan)白(bai)質有(you)很(hen)強(qiang)的親和力，用不含(han)血(xue)清(qing)的稀釋(shi)液，可(ke)以(yi)使染(ran)色(se)計數更(geng)為(wei)準確(que)。

　　Q4.細(xi)胞(bao)特性(xing)
在細(xi)胞(bao)培(pei)養之(zhi)前，我(wo)們(men)要(yao)了(le)解壹下妳(ni)所要(yao)養細(xi)胞(bao)的基本特性(xing)，這點可(ke)以(yi)從(cong)細(xi)胞(bao)的產(chan)品(pin)說(shuo)明書(shu)或者(zhe)從(cong)ATCC細(xi)胞(bao)庫(ku)查詢。除(chu)此(ci)之(zhi)外(wai)我(wo)們(men)還要(yao)知道(dao)每管細(xi)胞(bao)的數量(liang)，建議(yi)分裂或傳(chuan)代(dai)的比例，和已知細(xi)胞(bao)的傳代(dai)代(dai)次(ci)等(deng)信息(xi)。

　　Q5.準備培(pei)養基
復(fu)蘇(su)細(xi)胞(bao)時(shi)需(xu)要(yao)準備合適的培(pei)養基，血(xue)清(qing)和細(xi)胞(bao)生長所需(xu)的添加(jia)劑(ji)。大(da)部分培(pei)養細(xi)胞(bao)所用的培(pei)養體系(xi)，可(ke)以(yi)在訂(ding)購細(xi)胞(bao)系(xi)時(shi)獲(huo)得。
雖然大(da)多數細(xi)胞(bao)系(xi)可(ke)以(yi)在不止壹種培(pei)養基中生(sheng)長，但(dan)是當(dang)培(pei)養基改(gai)變(bian)時(shi)，細(xi)胞(bao)的性質(zhi)也會變(bian)化(hua)。因此，使用細(xi)胞(bao)庫(ku)推(tui)薦的培(pei)養基來培(pei)養細(xi)胞(bao)會獲得的效果。

　　Q6.開(kai)啟(qi)凍(dong)存管(guan)
1.準備壹個培(pei)養瓶，加(jia)入(ru)適宜(yi)細(xi)胞(bao)培(pei)養的培(pei)養基，液體體積(ji)按(an)照說(shuo)明書(shu)的推薦(jian)配置(zhi)，並(bing)平(ping)衡培(pei)養基的溫(wen)度和pH（CO2）。　
2.在37℃水浴(yu)中或細(xi)胞(bao)的正常生(sheng)長(chang)溫(wen)度下(xia)將凍(dong)存管(guan)輕輕(qing)搖動(dong)。解凍(dong)要(yao)快，約(yue)2分鐘或直(zhi)到冰晶融(rong)化即可(ke)。
3.從(cong)水(shui)浴(yu)中取(qu)出(chu)凍(dong)存管(guan)並(bing)用浸泡(pao)或噴(pen)灑70%乙醇(chun)的方式(shi)來消毒(du)。進(jin)壹步(bu)的操作(zuo)均(jun)需(xu)在無菌(jun)操作(zuo)臺中嚴(yan)格(ge)無菌條件(jian)下(xia)進(jin)行(xing)。
4.擰(ning)開(kai)凍(dong)存管(guan)的管帽並(bing)將內(nei)容(rong)物轉(zhuan)移(yi)到壹個含(han)有(you)9 ml推(tui)薦(jian)培(pei)養基的無菌(jun)離心管中。通過溫(wen)和離心（125×g 10 min）除(chu)去(qu)冷(leng)凍(dong)保(bao)護劑(ji)（DMSO）。棄(qi)去(qu)上清(qing)，並(bing)用1或2 ml*培(pei)養基重懸(xuan)細(xi)胞(bao)。將這些細(xi)胞(bao)懸(xuan)液轉(zhuan)移到含(han)有(you)*培(pei)養基的培(pei)養瓶中並(bing)輕輕(qing)搖(yao)動(dong)以*混(hun)勻。
5.培(pei)養24小時(shi)後(hou)檢查細(xi)胞(bao)狀態並(bing)在需(xu)要(yao)時(shi)進(jin)行(xing)傳(chuan)代(dai)。

　　Q7. 培(pei)養用液pH對(dui)細(xi)胞(bao)生長的影響(xiang)

　　由(you)於(yu)，大(da)多數細(xi)胞(bao)適宜(yi)pH為7.2~7.4，偏離(li)此(ci)範(fan)圍(wei)對細(xi)胞(bao)將產(chan)生有(you)害(hai)的影響(xiang)。各(ge)種(zhong)細(xi)胞(bao)對pH的要(yao)求(qiu)也不*相同(tong)，原(yuan)代(dai)培(pei)養細(xi)胞(bao)壹般對pH變(bian)動(dong)耐(nai)受(shou)差，無(wu)限(xian)細(xi)胞(bao)系(xi)耐(nai)受(shou)力強。

　　但(dan)總體來說(shuo)，細(xi)胞(bao)耐(nai)酸(suan)性比耐(nai)堿性強(qiang)壹些(xie)，偏酸環(huan)境(jing)中更(geng)利(li)於(yu)細(xi)胞(bao)生長。因此，我(wo)們(men)在配制(zhi)培(pei)養用液時(shi)，可(ke)把(ba)液體的pH稍微調得偏酸(suan)壹些(xie)。液體在經(jing)過0.10um或0.22um濾膜(mo)過濾時(shi)，溶液的pH還會向上浮(fu)動(dong)0.2左(zuo)右(you)。

　　質(zhi)量(liang)可(ke)靠，售(shou)後(hou)有(you)保(bao)障（編(bian)輯(ji)：tanxi）