人直(zhi)腸平滑(hua)肌(ji)細(xi)胞

迷人(ren)的實(shi)驗，放心的選擇

我(wo)司(si)細胞近3000種(zhong)，來(lai)源於美(mei)國(guo)ATCC,細(xi)胞都(dou)是(shi)經(jing)過嚴(yan)格(ge)質量控(kong)制(zhi)，在中國(guo)大(da)陸努(nu)力(li)搭(da)建正(zheng)牌(pai)細(xi)胞與國(guo)內廣(guang)大科研人(ren)員之(zhi)間的溝(gou)通橋(qiao)梁。為(wei)您(nin)提供(gong)人直(zhi)腸平滑(hua)肌(ji)細(xi)胞外(wai)，還有(you)更(geng)多(duo)相關(guan)實(shi)驗產品(pin)，標(biao)準(zhun)品(pin)，細(xi)胞株(zhu)和實(shi)驗技術服務(wu)等(deng)等(deng)前期(qi)後續(xu)服務(wu)。

人(ren)直(zhi)腸平滑(hua)肌(ji)細(xi)胞的產品(pin)介紹(shao)

由(you)我司(si)*銷售(shou)。

細(xi)胞株(zhu)

　　Q1. 培養(yang)用液pH對細胞生(sheng)長的影(ying)響

　　由(you)於，大(da)多(duo)數(shu)細胞適宜(yi)pH為(wei)7.2~7.4，偏離(li)此(ci)範圍(wei)對(dui)細(xi)胞將(jiang)產生有(you)害的影(ying)響。各種(zhong)細(xi)胞對(dui)pH的要(yao)求(qiu)也(ye)不(bu)*相(xiang)同，原(yuan)代培養(yang)細(xi)胞壹般對pH變(bian)動耐受差(cha)，無(wu)限細胞系耐受力(li)強(qiang)。

　　但(dan)總體(ti)來(lai)說，細胞(bao)耐酸(suan)性(xing)比(bi)耐(nai)堿(jian)性(xing)強(qiang)壹(yi)些(xie)，偏酸(suan)環(huan)境(jing)中更(geng)利於細(xi)胞(bao)生長。因此(ci)，我們在配制(zhi)培養(yang)用液(ye)時，可把液(ye)體(ti)的pH稍(shao)微(wei)調(tiao)得偏酸(suan)壹些。液體(ti)在(zai)經(jing)過0.10um或(huo)0.22um濾膜過(guo)濾時，溶(rong)液的pH還會向上(shang)浮(fu)動(dong)0.2左(zuo)右。

　　Q2. 液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)基中谷氨(an)酰(xian)胺(an)的作用(yong)，及(ji)使(shi)用(yong)方(fang)法(fa)。

　　幾(ji)乎(hu)所(suo)有的細胞對谷(gu)氨(an)酰(xian)胺(an)有(you)較(jiao)高的要(yao)求(qiu)，細(xi)胞(bao)需要(yao)谷(gu)氨(an)酰(xian)胺(an)合成(cheng)蛋白(bai)質，在(zai)缺少(shao)谷(gu)氨(an)酰(xian)胺(an)時，細胞生(sheng)長不(bu)良(liang)而死亡(wang)。所(suo)以，各種(zhong)培(pei)養液(ye)中都含(han)有(you)較大量(liang)的谷氨酰胺(an)。谷(gu)氨(an)酰胺(an)在(zai)溶(rong)液中很不(bu)穩(wen)定，應置-20 ?C冰(bing)凍(dong)保(bao)存，用(yong)前加入(ru)培(pei)養基中。加有谷氨酰(xian)胺(an)的液體(ti)培(pei)養(yang)基4 ?C 冰(bing)箱(xiang)儲(chu)存兩(liang)周(zhou)以(yi)上(shang)時，應重(zhong)新加入(ru)原(yuan)來量(liang)的谷氨酰胺(an)。基礎(chu)醫(yi)學(xue)細胞中心在(zai)其(qi)服務(wu)項(xiang)目中配制(zhi)分裝了(le)高(gao)濃度(du)（100倍）的谷氨酰胺(an)溶(rong)液（1ml/支）。每(mei)支1ml的谷氨酰胺(an)加到99ml*培養(yang)基中，其(qi)終濃(nong)度(du)為(wei)2mM/ml培(pei)養(yang)基。包裝為(wei)粉紅色，-24?C保(bao)存。

人(ren)骨髓間(jian)質幹(gan)細胞(bao)胎(tai)牛(niu)血清

　　Q3.細胞計(ji)數(shu)及(ji)存活(huo)測(ce)試(shi)
1、原理(li)：
(1)計算細胞數(shu)目可用血(xue)球計(ji)數(shu)盤(pan)或(huo)是Coultercounter粒(li)子(zi)計數(shu)器(qi)自(zi)動計數(shu)。
(2)血球計(ji)數(shu)盤(pan)壹般有二(er)個(ge)chambers，每(mei)個(ge)chamber中細刻(ke)9個(ge)1mm2大(da)正方(fang)形(xing)，其(qi)中4個(ge)角(jiao)落之(zhi)正方(fang)形(xing)再(zai)細(xi)刻(ke)16個(ge)小(xiao)格，深度(du)均為(wei)0.1mm。當(dang)chamber上(shang)方(fang)蓋(gai)上(shang)蓋(gai)玻(bo)片(pian)後，每個(ge)大(da)正方(fang)形(xing)之(zhi)體(ti)積(ji)為(wei)1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使(shi)用(yong)時，計數(shu)每個(ge)大(da)正方(fang)形(xing)內之細胞數(shu)目，乘(cheng)以稀釋倍數(shu)，再(zai)乘(cheng)以104，即(ji)為(wei)每(mei)ml中之細(xi)胞(bao)數(shu)目。
(3)存活(huo)測(ce)試(shi)之步(bu)驟為(wei)dyeexclusion，利用染料(liao)會滲(shen)入(ru)死細胞(bao)中而呈(cheng)色(se)，而活(huo)細(xi)胞因細(xi)胞膜(mo)完(wan)整，染料(liao)無法(fa)滲(shen)入(ru)而不(bu)會(hui)呈(cheng)色(se)。壹(yi)般使用藍(lan)色之(zhi)trypan blue染料(liao)，如(ru)果細胞(bao)不(bu)易(yi)吸收(shou)trypan blue，則(ze)用紅色之(zhi)Erythrosin bluish。計算細胞活(huo)率(lv)：活(huo)細(xi)胞數(shu)/(活(huo)細(xi)胞數(shu)+死細胞(bao)數(shu))×100%。計數(shu)應在臺(tai)盼(pan)蘭(lan)染色後數(shu)分鐘內完(wan)成(cheng)，隨時間延長，部(bu)分活(huo)細(xi)胞也開始(shi)攝取染料(liao);因為(wei)臺(tai)盼(pan)蘭(lan)對蛋白(bai)質有(you)很強的親和力(li)，用(yong)不(bu)含(han)血(xue)清的稀釋液(ye)，可以使(shi)染色計數(shu)更(geng)為(wei)準(zhun)確。

　人惡(e)性(xing)胚(pei)胎(tai)橫(heng)紋(wen)肌(ji)肉(rou)瘤(liu)細胞(bao)

　　Q4.細(xi)胞特(te)性(xing)
在(zai)細(xi)胞(bao)培養之前，我(wo)們要(yao)了(le)解壹(yi)下妳(ni)所(suo)要(yao)養(yang)細(xi)胞(bao)的基本(ben)特(te)性(xing)，這點(dian)可以從(cong)細胞(bao)的產品(pin)說明(ming)書或(huo)者(zhe)從ATCC細(xi)胞庫(ku)查(zha)詢。除此(ci)之外(wai)我們還要(yao)知(zhi)道每(mei)管(guan)細胞(bao)的數(shu)量，建議(yi)分裂(lie)或(huo)傳代的比例，和已(yi)知細(xi)胞(bao)的傳代代次等(deng)信(xin)息。

　　Q5.準(zhun)備培(pei)養(yang)基
復(fu)蘇(su)細胞(bao)時需要(yao)準(zhun)備合適的培養基，血(xue)清和細胞(bao)生(sheng)長所(suo)需的添加劑。大部(bu)分培(pei)養細(xi)胞所(suo)用的培養體(ti)系(xi)，可以在(zai)訂購細胞(bao)系(xi)時獲得。
雖然(ran)大(da)多(duo)數(shu)細胞系(xi)可以在(zai)不(bu)止壹(yi)種(zhong)培(pei)養基中生長，但(dan)是(shi)當(dang)培養(yang)基改(gai)變(bian)時，細胞的性(xing)質(zhi)也(ye)會(hui)變(bian)化。因此(ci)，使用(yong)細(xi)胞(bao)庫推(tui)薦(jian)的培養基來(lai)培(pei)養細(xi)胞會獲得的效果。

　　Q6.開啟(qi)凍存管(guan)
1.準(zhun)備壹(yi)個(ge)培(pei)養瓶，加入(ru)適宜(yi)細胞(bao)培養(yang)的培養基，液(ye)體(ti)體(ti)積(ji)按(an)照(zhao)說明(ming)書的推薦(jian)配置，並平衡(heng)培(pei)養(yang)基的溫度(du)和pH（CO2）。　
2.在(zai)37℃水浴(yu)中或(huo)細胞(bao)的正常生長溫度(du)下將(jiang)凍(dong)存管(guan)輕(qing)輕(qing)搖(yao)動。解凍(dong)要(yao)快(kuai)，約(yue)2分(fen)鐘或(huo)直(zhi)到冰(bing)晶(jing)融(rong)化即(ji)可。
3.從水(shui)浴(yu)中取出凍存管(guan)並用浸(jin)泡(pao)或(huo)噴(pen)灑(sa)70%乙(yi)醇(chun)的方(fang)式(shi)來(lai)消毒。進壹步(bu)的操作均需在(zai)無菌(jun)操作臺(tai)中嚴(yan)格(ge)無菌(jun)條件(jian)下進行(xing)。
4.擰(ning)開凍(dong)存管(guan)的管(guan)帽(mao)並將內容(rong)物(wu)轉(zhuan)移(yi)到壹個(ge)含(han)有9 ml推(tui)薦(jian)培(pei)養(yang)基的無菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中。通過溫和(he)離(li)心(xin)（125×g 10 min）除(chu)去(qu)冷凍保護劑（DMSO）。棄去(qu)上(shang)清，並用1或(huo)2 ml*培養(yang)基重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)。將這些(xie)細胞懸(xuan)液轉(zhuan)移到含有(you)*培養基的培養瓶中並輕(qing)輕(qing)搖(yao)動以*混勻(yun)。
5.培(pei)養(yang)24小(xiao)時後檢查(zha)細胞(bao)狀態(tai)並在需(xu)要(yao)時進行(xing)傳(chuan)代。

　　Q7. 培(pei)養用(yong)液pH對(dui)細胞(bao)生長的影(ying)響

　　由(you)於，大(da)多(duo)數(shu)細胞適宜(yi)pH為(wei)7.2~7.4，偏離(li)此(ci)範圍(wei)對(dui)細(xi)胞將(jiang)產生有(you)害的影(ying)響。各種(zhong)細(xi)胞對(dui)pH的要(yao)求(qiu)也(ye)不(bu)*相(xiang)同，原(yuan)代培養(yang)細(xi)胞壹般對pH變(bian)動耐受差(cha)，無(wu)限細胞系耐受力(li)強(qiang)。

　　但(dan)總體(ti)來(lai)說，細胞(bao)耐酸(suan)性(xing)比(bi)耐(nai)堿(jian)性(xing)強(qiang)壹(yi)些(xie)，偏酸(suan)環(huan)境(jing)中更(geng)利於細(xi)胞(bao)生長。因此(ci)，我們在配制(zhi)培養(yang)用液(ye)時，可把液(ye)體(ti)的pH稍(shao)微(wei)調(tiao)得偏酸(suan)壹些。液體(ti)在(zai)經(jing)過0.10um或(huo)0.22um濾膜過(guo)濾時，溶(rong)液的pH還會向上(shang)浮(fu)動(dong)0.2左(zuo)右。

　　質(zhi)量可靠(kao)，售(shou)後有保障(zhang)（編(bian)輯：tanxi）