大鼠(shu)成(cheng)肌(ji)細胞是研究(jiu)肌肉(rou)發(fa)育、再生(sheng)及疾(ji)病的(de)重(zhong)要工具，其選擇與應用(yong)需(xu)結(jie)合實驗(yan)目標(biao)與細胞(bao)特(te)性綜(zong)合考量(liang)。以下(xia)從(cong)細胞(bao)系(xi)選擇、培養技(ji)術及(ji)研究(jiu)應用(yong)三方(fang)面(mian)展開(kai)說明(ming)。
壹、細(xi)胞系(xi)選擇：L6細胞系(xi)的(de)優(you)勢(shi)
L6細(xi)胞系(xi)源自(zi)大鼠(shu)骨(gu)骼肌，因(yin)其(qi)易於(yu)培養、遺(yi)傳操(cao)作簡(jian)便，成(cheng)為(wei)肌肉研究(jiu)領域(yu)的(de)經(jing)典(dian)模(mo)型。該細胞(bao)系(xi)具有(you)以(yi)下(xia)特(te)點(dian)：
分化能力：在低(di)血(xue)清條件(jian)下(xia)可自(zi)發(fa)分化為多核肌管(guan)，模(mo)擬(ni)肌(ji)肉(rou)發(fa)育過程(cheng)，適用(yong)於研究(jiu)肌纖(xian)維(wei)形(xing)成(cheng)機制(zhi)。
代謝(xie)特性：高(gao)表(biao)達GLUT4葡(pu)萄糖轉運蛋白(bai)，常(chang)用於胰島(dao)素(su)敏(min)感(gan)性及(ji)糖尿病相關研究(jiu)。
遺傳(chuan)穩定(ding)性：低(di)代次冷凍保存(cun)並(bing)定(ding)期(qi)克隆篩選，可維(wei)持(chi)高(gao)融合能力，避免代數(shu)增(zeng)加(jia)導(dao)致(zhi)的(de)分化潛力下(xia)降。
二(er)、培養技(ji)術：關鍵(jian)條件(jian)與操(cao)作規(gui)範(fan)
培養基(ji)配(pei)置(zhi)：推(tui)薦(jian)使用(yong)含10%胎(tai)牛血清的(de)高(gao)糖DMEM培養基(ji)，添(tian)加(jia)1%青(qing)鏈(lian)黴素(su)預(yu)防(fang)汙(wu)染。
傳代(dai)與凍存(cun)：細胞融合度達80%-90%時，用0.25%胰蛋白(bai)酶(mei)消化(hua)1-2分鐘，按(an)1:3-1:5比(bi)例傳(chuan)代。凍存(cun)時采用(yong)90%血(xue)清+10%DMSO混合液(ye)，程(cheng)序降溫後轉入液(ye)氮(dan)保(bao)存(cun)。
汙(wu)染防(fang)控：嚴格無菌操(cao)作，定(ding)期(qi)檢測(ce)支原體(ti)，避免細胞(bao)老(lao)化(hua)或(huo)汙(wu)染影響(xiang)實(shi)驗(yan)重(zhong)復性。
三、研究(jiu)應用(yong)：從(cong)基礎(chu)機制(zhi)到藥物(wu)開(kai)發
肌(ji)肉(rou)發(fa)育與再生(sheng)：通(tong)過(guo)共培養體(ti)系(xi)或(huo)基因(yin)編(bian)輯(ji)技(ji)術，研究(jiu)成(cheng)肌(ji)細胞與成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao)的(de)相互(hu)作用(yong)，揭(jie)示肌(ji)肉(rou)修復的(de)分子(zi)機制(zhi)。
疾病模(mo)型(xing)構建：利(li)用(yong)L6細胞(bao)構建肌(ji)縮(suo)、肌(ji)營(ying)養(yang)不(bu)良等病理模型，評估(gu)藥(yao)物(wu)對肌纖(xian)維(wei)縮(suo)的(de)抑制(zhi)效果(guo)。
藥物(wu)篩選平(ping)臺(tai)：結(jie)合高(gao)內涵(han)成(cheng)像(xiang)技(ji)術，篩選促進(jin)肌管(guan)形(xing)成(cheng)或(huo)抗纖(xian)維(wei)化(hua)的(de)候(hou)選(xuan)化(hua)合物，加(jia)速(su)新藥研發(fa)進(jin)程(cheng)。
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