CCC-ESF-1細胞(bao)_復(fu)蘇(su)的(de)

　　細胞(bao)作(zuo)為(wei)生命組(zu)成的(de)zui小單(dan)元，研究(jiu)其(qi)相關的(de)生物行(xing)為(wei)及其(qi)規律與(yu)本質(zhi)，對於揭示生(sheng)命的(de)奧秘，探索(suo)疾(ji)病的(de)機(ji)理(li)與治療手(shou)段，提(ti)高(gao)人類的(de)生存壽命與質(zhi)量，都(dou)有(you)著(zhe)重(zhong)要的(de)意(yi)義(yi)。對(dui)細(xi)胞(bao)的(de)研究(jiu)是(shi)壹個(ge)復雜(za)的(de)工程(cheng)，細(xi)胞(bao)在(zai)人體(ti)內處(chu)於復雜(za)的(de)微環境(jing)之中，包(bao)括(kuo)溫(wen)度、氧氣(qi)濃(nong)度(du)、生(sheng)物因子(zi)濃(nong)度、機(ji)械(xie)作用(yong)、細胞(bao)間(jian)相互作用(yong)、細胞(bao)基(ji)質間(jian)相互作用(yong)等(deng)，同(tong)時(shi)，細胞(bao)體(ti)積(ji)微小、種類多(duo)樣，在(zai)細(xi)胞(bao)水(shui)平進(jin)行細(xi)胞(bao)識別、代(dai)謝(xie)物檢測、內(nei)部組(zu)分分(fen)析、細(xi)胞(bao)結(jie)構(gou)與功能表征、細胞(bao)間(jian)相互作用(yong)分析等(deng)工作(zuo)也(ye)都(dou)有(you)著(zhe)很大(da)的(de)難度(du)。CCC-ESF-1細胞(bao)，上海乾思(si)生(sheng)物公(gong)司(si)細胞(bao)近(jin)3000種，來源於美國(guo)ATCC,細(xi)胞(bao)都(dou)是(shi)經(jing)過(guo)嚴格質(zhi)量(liang)控制，在(zai)中(zhong)國(guo)大(da)陸努(nu)力搭(da)建正牌細(xi)胞(bao)與(yu)國(guo)內(nei)廣大(da)科研人員之間(jian)的(de)溝通橋(qiao)梁(liang)。為(wei)您(nin)提(ti)供(gong)CCC-ESF-1細(xi)胞(bao)外(wai)，還(hai)有更(geng)多(duo)相關實驗(yan)產(chan)品，標(biao)準品，細(xi)胞(bao)株(zhu)和實驗(yan)技術服(fu)務等(deng)等(deng)前(qian)期(qi)後(hou)續服(fu)務。

　　1. CCC-ESF-1細胞(bao)液(ye)體(ti)培養(yang)基(ji)的(de)保存是冷藏(zang)好(hao)？還是(shi)冷凍好？

　　要冷藏(zang)！！因為(wei)液(ye)體(ti)培養(yang)基(ji)經(jing)冷凍後(hou)再(zai)經(jing)溶(rong)化(hua)時(shi)，其(qi)溶液(ye)的(de)pH值會(hui)發生(sheng)改(gai)變，溶液(ye)往往變堿(jian)，某些(xie)成分(fen)溶解也會受(shou)到(dao)影(ying)響對細(xi)胞(bao)生(sheng)長不(bu)利(li)。故(gu)液(ye)體(ti)培養(yang)基(ji)壹定要存放在(zai)冷藏(zang)箱(xiang)中，通常(chang)液(ye)體(ti)培養(yang)基(ji)在(zai)冷藏(zang)條(tiao)件下可存放6個(ge)月 ~ 壹年。

　　2.CCC-ESF-1細胞(bao) 液(ye)體(ti)培養(yang)基(ji)中谷氨酰胺(an)的(de)作用(yong)，及使用(yong)方(fang)法。

　　幾乎所(suo)有的(de)細胞(bao)對(dui)谷氨酰胺(an)有(you)較(jiao)高(gao)的(de)要求，細胞(bao)需要谷氨酰胺(an)合(he)成(cheng)蛋白(bai)質(zhi)，在(zai)缺(que)少谷氨酰胺(an)時(shi)，細(xi)胞(bao)生(sheng)長不(bu)良(liang)而死亡。所(suo)以，各(ge)種培養(yang)液(ye)中(zhong)都(dou)含有較(jiao)大(da)量的(de)谷氨酰胺(an)。谷氨酰胺(an)在(zai)溶(rong)液(ye)中(zhong)很(hen)不(bu)穩(wen)定，應(ying)置(zhi)-20 ?C冰凍保存，用(yong)前加(jia)入培(pei)養(yang)基(ji)中。加有(you)谷氨酰胺(an)的(de)液(ye)體(ti)培養(yang)基(ji)4 ?C 冰箱(xiang)儲(chu)存兩(liang)周以上時，應(ying)重(zhong)新加入原(yuan)來量(liang)的(de)谷氨酰胺(an)。基(ji)礎醫學(xue)細胞(bao)中(zhong)心(xin)在(zai)其(qi)服(fu)務項(xiang)目中(zhong)配(pei)制分裝了高(gao)濃(nong)度(du)（100倍(bei)）的(de)谷氨酰胺(an)溶(rong)液(ye)（1ml/支(zhi)）。每(mei)支1ml的(de)谷氨酰胺(an)加(jia)到(dao)99ml*培(pei)養(yang)基(ji)中，其(qi)終(zhong)濃(nong)度(du)為(wei)2mM/ml培養(yang)基(ji)。包裝為(wei)粉紅(hong)色，-24?C保(bao)存。

　　3. CCC-ESF-1細胞(bao) 培(pei)養(yang)用(yong)液(ye)pH對(dui)細(xi)胞(bao)生(sheng)長的(de)影(ying)響

　　由於，大(da)多(duo)數(shu)細(xi)胞(bao)適(shi)宜(yi)pH為(wei)7.2~7.4，偏離此(ci)範圍對細(xi)胞(bao)將(jiang)產(chan)生有(you)害(hai)的(de)影(ying)響。各種細胞(bao)對(dui)pH的(de)要求也不(bu)*相同，原(yuan)代(dai)培養(yang)細胞(bao)壹般(ban)對pH變(bian)動(dong)耐(nai)受(shou)差(cha)，無(wu)限細(xi)胞(bao)系耐(nai)受(shou)力(li)強。

　　但總(zong)體(ti)來說(shuo)，細胞(bao)耐(nai)酸性(xing)比耐(nai)堿(jian)性(xing)強壹些(xie)，偏酸環境(jing)中(zhong)更利(li)於細胞(bao)生(sheng)長。因此(ci)，我(wo)們在(zai)配(pei)制培養(yang)用(yong)液(ye)時(shi)，可(ke)把液(ye)體(ti)的(de)pH稍(shao)微調得偏(pian)酸壹些(xie)。液(ye)體(ti)在(zai)經(jing)過(guo)0.10um或0.22um濾(lv)膜(mo)過(guo)濾(lv)時(shi)，溶液(ye)的(de)pH還會(hui)向(xiang)上浮動(dong)0.2左右(you)。

　　4.CCC-ESF-1細胞(bao) 細(xi)胞(bao)傳代(dai)消化(hua)時所(suo)用(yong)胰酶(mei)濃(nong)度越(yue)高(gao)越(yue)好(hao)嗎(ma)？

　　不(bu)見(jian)得！因為(wei)胰蛋白(bai)酶(mei)溶(rong)液(ye)的(de)消化(hua)能力是(shi)和溶液(ye)的(de)pH、溫(wen)度、胰酶(mei)濃(nong)度及溶液(ye)中(zhong)是(shi)否含有Ca++, Mg++離(li)子(zi)和血清(qing)等(deng)因素(su)有(you)關。通常(chang)情(qing)況下，pH 8.0 , 溫(wen)度 37 oC 其(qi)作用(yong)能力zui強。另外(wai)，鈣、鎂(mei)離子及血清(qing)均(jun)能大(da)大(da)降低(di)其(qi)消化(hua)能力。我(wo)們每(mei)次(ci)進(jin)行傳代(dai)消化(hua)前，壹定要用(yong)D-Hanks液(ye)或(huo)PBS液(ye)反(fan)復沖洗(xi)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)瓶(ping)，以便(bian)於將含血清(qing)的(de)培養(yang)基(ji)沖洗(xi)幹(gan)凈，這(zhe)樣就(jiu)能大(da)大(da)提(ti)高(gao)消(xiao)化(hua)液(ye)的(de)消化(hua)能力。本(ben)中(zhong)心通常(chang)使用(yong)的(de)消化(hua)液(ye)濃(nong)度(du)為(wei)：

　　（1）０.０５％胰蛋白(bai)酶(mei)＋０.０２％ＥＤＴＡ；

　　（2）０.２５％胰蛋白(bai)酶(mei)＋０.０３％ＥＤＴＡ。

　　（3）0.25% 胰蛋白(bai)酶(mei)

　　溶液(ye)ｐＨ８.０～９.０；使用(yong)Ｄ－Ｈａｎｋ液(ye)配(pei)制。

　　多(duo)數(shu)細(xi)胞(bao)傳代(dai)消化(hua)可使用(yong)０.０５％胰蛋白(bai)酶(mei)＋０.０２％ＥＤＴＡ這(zhe)種消化液(ye)。

　　購買(mai)上海乾思(si)生(sheng)物細(xi)胞(bao)註意(yi)事(shi)項(xiang)（乾思(si)生(sheng)物）發布(bu)

　　壹、客戶收(shou)到細胞(bao)先(xian)不(bu)開(kai)蓋(gai)，放在(zai)培(pei)養(yang)箱(xiang)靜置(zhi)若幹小時後(hou)（看(kan)細胞(bao)密(mi)度(du)而(er)定）在(zai)倒(dao)置(zhi)顯微鏡下觀(guan)察細胞(bao)生(sheng)長情(qing)況，並對細(xi)胞(bao)進(jin)行不(bu)同(tong)倍(bei)數(shu)拍(pai)照(zhao)（建議受(shou)收(shou)細胞(bao)時(shi)的(de)培養(yang)基(ji)拍壹張(zhang)照(zhao)片，觀(guan)察培養(yang)基(ji)的(de)顏(yan)色(se)和是否有(you)漏(lou)液(ye)情(qing)況，顯微鏡下拍細胞(bao)100X，200X各(ge)壹張(zhang)），排除(chu)細胞(bao)本(ben)身(shen)汙染(ran)的(de)情(qing)況；

　　收到(dao)細(xi)胞(bao)未開封，出現汙染(ran)狀(zhuang)況我(wo)們負(fu)責免費發送(song)壹株(zhu)細(xi)胞(bao)。

　　二、如(ru)為(wei)貼(tie)壁(bi)細胞(bao)，請在(zai)顯微鏡下觀(guan)察細胞(bao)密(mi)度(du)：

　　1. 未超過(guo)80%匯合(he)度(du)時，用(yong)75%酒(jiu)精(jing)（建議配(pei)置(zhi)75%酒(jiu)精(jing)的(de)水也(ye)是滅(mie)菌(jun)超純水，噴(pen)灑整(zheng)個(ge)瓶(ping)消毒後(hou)放到(dao)超菌(jun)臺內，嚴格無(wu)菌(jun)操(cao)作(zuo)；然(ran)後(hou)打開(kai)蓋(gai)子，先(xian)把培(pei)養(yang)基(ji)吸出10ml左右(you)，放在(zai)離(li)心管(guan)裏(li)，然(ran)後(hou)瓶(ping)口過(guo)火(huo)（嚴(yan)禁(jin)直接(jie)傾(qing)倒(dao)），這(zhe)樣可以保(bao)證(zheng)不(bu)汙(wu)染(ran)，再(zai)用(yong)10ml的(de)移液(ye)管(guan)，將(jiang)剩余的(de)培液(ye)全部吸出，放於離心管(guan)中，培(pei)養(yang)瓶(ping)中只剩余10ml左右(you)培(pei)液(ye)就(jiu)可(ke)以了。培(pei)養(yang)16hr(時間(jian)根(gen)據(ju)細胞(bao)生(sheng)長情(qing)況調整(zheng)）之後(hou)，傳代(dai)或者(zhe)凍存。

　　2. 超過(guo)80%匯合(he)度(du)時，請按細胞(bao)培(pei)養(yang)條件傳代(dai)培養(yang)。具(ju)體(ti)步(bu)驟(zhou)如(ru)下：

　　1) 棄去培養(yang)液(ye)，用(yong)3ml PBS（不(bu)含鈣，鎂(mei)離子）洗(xi)1-2次(ci)；

　　2) 加1ml消(xiao)化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於T25培養(yang)瓶(ping)中，倒轉放於37度培養(yang)箱(xiang)1-3分鐘預熱(re)，然(ran)後(hou)又(you)將培養(yang)瓶(ping)倒轉大(da)約(yue)30秒後(hou)，在(zai)倒(dao)置(zhi)顯微鏡下觀(guan)察細胞(bao)消(xiao)化(hua)情(qing)況，若細胞(bao)大(da)部分變圓分(fen)散，輕敲(qiao)幾(ji)下培養(yang)培養(yang)瓶(ping)，細胞(bao)隨(sui)即脫落下來；

　　3) 加入6-8ml*培(pei)養(yang)基(ji)，吸出，分到新(xin)的(de)培養(yang)瓶(ping)中，按要求分瓶(ping)。

　　三(san)、如(ru)為(wei)懸浮細(xi)胞(bao)，吸出培養(yang)液(ye)，1000轉(zhuan)/分(fen)鐘離心5分鐘，吸出上清(qing)，管(guan)底(di)細胞(bao)用(yong)新鮮(xian)培養(yang)基(ji)懸浮細(xi)胞(bao)後(hou)移回(hui)培(pei)養(yang)瓶(ping)。

　　註意(yi)：換(huan)液(ye)時(shi)壹半用(yong)我(wo)們的(de)培養(yang)基(ji)，壹半用(yong)妳們(men)的(de)，以免(mian)細(xi)胞(bao)不(bu)適(shi)應(ying)而(er)造成生長不(bu)好(hao)。

　　四(si)、細(xi)胞(bao)出現問(wen)題(ti)，可(ke)重(zhong)發的(de)情(qing)況有(you)哪(na)些(xie)？判定(ding)標準是什(shen)麽？

　　（1）細胞(bao)運(yun)輸(shu)途中(zhong)遭(zao)遇(yu)的(de)各種問(wen)題(ti)，細(xi)胞(bao)丟(diu)失、破損(sun)、漏(lou)液(ye)等(deng)，重(zhong)發；

　　（2）凍存的(de)細胞(bao)復(fu)蘇(su)後(hou)，絕(jue)大(da)多(duo)數(shu)細(xi)胞(bao)未存活，重(zhong)發；

　　（3）存活的(de)細胞(bao)靜(jing)置(zhi)24小時(shi)後(hou)，絕(jue)大(da)多(duo)數(shu)細(xi)胞(bao)未存活，重(zhong)發；

　　（4）凍存的(de)細胞(bao)復(fu)蘇(su)後(hou)或(huo)存活的(de)細胞(bao)靜(jing)置(zhi)4小時(shi)後(hou)並且未開封，出現汙染(ran)，重(zhong)發；

　　（5）視具(ju)體(ti)情(qing)況而(er)定。

　　五、細胞(bao)出現問(wen)題(ti)，不(bu)予以重(zhong)發的(de)情(qing)況有(you)哪(na)些(xie)？

　　（1）客戶造(zao)成細胞(bao)汙(wu)染(ran)，不(bu)重(zhong)發；

　　（2）客戶不(bu)正(zheng)確(que)操(cao)作(zuo)致(zhi)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態不(bu)好(hao)，不(bu)重(zhong)發；

　　（3）細胞(bao)狀(zhuang)態不(bu)好(hao)，未提(ti)供(gong)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)前3天照(zhao)片的(de)，不(bu)重(zhong)發；

　　（4）細胞(bao)培(pei)養(yang)時經(jing)其(qi)它處(chu)理(li)的(de)，不(bu)重(zhong)發；

　　（5）細胞(bao)收(shou)到(dao)2天內，未告(gao)知(zhi)，不(bu)重(zhong)發；

　　（6）視具(ju)體(ti)情(qing)況而(er)定。

　　六(liu)、售後(hou)服(fu)務政(zheng)策(ce)

　　Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等(deng)品(pin)牌；部分產品現貨，超低比(bi)價，另常(chang)備  Trizol  DMSO  lipo2000    lipo3000  SC-2004  SC-2005常(chang)備現貨 ；貨期(qi)短，價(jia)格優(you)，售(shou)後(hou)齊(qi)全。

　　細胞(bao)汙(wu)染(ran)問(wen)題(ti)，請在(zai)收(shou)到產(chan)品(pin)48小時(shi)內(nei)，給我(wo)們提(ti)出真實的(de)實驗(yan)結(jie)果；細(xi)胞(bao)活(huo)性(xing)問(wen)題(ti)，請在(zai)收(shou)到產(chan)品(pin)7天內給我(wo)們提(ti)出真實的(de)實驗(yan)結(jie)果，我(wo)們調查核實後(hou)予免費調換(huan)，不(bu)收(shou)取(qu)任(ren)何費用(yong)。

　　需要客戶提(ti)供(gong)CCC-ESF-1細(xi)胞(bao)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)說(shuo)明(ming)、細(xi)胞(bao)操(cao)作(zuo)處(chu)理(li)方(fang)法、細(xi)胞(bao)質(zhi)量(liang)問(wen)題(ti)反(fan)饋表。

　　如用(yong)戶收(shou)到細胞(bao)8-30天之內，因處(chu)理(li)不(bu)當(dang)造(zao)成(cheng)細胞(bao)死(si)亡或汙(wu)染(ran)，我(wo)公司(si)將優(you)惠價重(zhong)新提(ti)供(gong)壹株(zhu)原(yuan)細胞(bao)

　　CCC-ESF-1細胞(bao)質(zhi)量(liang)可靠(kao)，售後(hou)有(you)保障

　　★我(wo)庫細胞(bao)近(jin)3000種，來源於美國(guo)ATCC,細(xi)胞(bao)都(dou)是(shi)經(jing)過(guo)嚴格質(zhi)量(liang)控制。

　　凍存細胞(bao)時(shi)間(jian)為(wei)5-7個(ge)工作(zuo)日，活細(xi)胞(bao)為(wei)7-15個(ge)工作(zuo)日。

　　★由於細胞(bao)庫現有細(xi)胞(bao)類目(mu)多(duo)，為(wei)了不(bu)出現混亂(luan)錯(cuo)誤，需要了解(jie)CCC-ESF-1細胞(bao)相關細胞(bao)價(jia)格及詳(xiang)細(xi)資(zi)料請老師，對(dui)您(nin)造成(cheng)的(de)不(bu)便(bian)還請見(jian)諒(liang)！

（編(bian)輯(ji)：tanxi）