Beta-TC-6細(xi)胞_復蘇(su)的

　　細(xi)胞作為(wei)生命組(zu)成(cheng)的(de)zui小(xiao)單元，研究其相(xiang)關的生物行為及其(qi)規(gui)律(lv)與本質(zhi)，對於(yu)揭(jie)示(shi)生命的(de)奧(ao)秘，探(tan)索疾(ji)病(bing)的機理(li)與治(zhi)療(liao)手(shou)段，提(ti)高人類的(de)生存壽(shou)命與質(zhi)量，都(dou)有著重(zhong)要的意(yi)義。對細(xi)胞的研(yan)究是(shi)壹(yi)個(ge)復(fu)雜(za)的工程，細(xi)胞在人體(ti)內處於(yu)復雜(za)的微(wei)環境之(zhi)中，包括(kuo)溫(wen)度(du)、氧氣(qi)濃度(du)、生物因子(zi)濃度(du)、機械(xie)作用(yong)、細(xi)胞間相(xiang)互作用(yong)、細(xi)胞基質(zhi)間相(xiang)互作用(yong)等(deng)，同時，細(xi)胞體(ti)積(ji)微(wei)小、種(zhong)類多樣，在細(xi)胞水平進行細(xi)胞識別、代謝(xie)物檢(jian)測、內部組(zu)分分析(xi)、細(xi)胞結構(gou)與功(gong)能(neng)表(biao)征、細(xi)胞間相(xiang)互作用(yong)分(fen)析(xi)等(deng)工作也(ye)都(dou)有(you)著很大的難(nan)度(du)。Beta-TC-6細(xi)胞，上海(hai)乾思(si)生物公司(si)細(xi)胞近3000種(zhong)，來源(yuan)於(yu)美(mei)國ATCC,細(xi)胞都是(shi)經(jing)過嚴格質(zhi)量控制，在中國大陸(lu)努(nu)力搭建(jian)正牌(pai)細(xi)胞與國(guo)內廣大(da)科(ke)研(yan)人(ren)員(yuan)之間的溝通橋梁。為(wei)您提(ti)供Beta-TC-6細(xi)胞外，還(hai)有(you)更(geng)多相(xiang)關實(shi)驗(yan)產(chan)品(pin)，標準(zhun)品(pin)，細(xi)胞株(zhu)和(he)實(shi)驗(yan)技(ji)術(shu)服務等(deng)等(deng)前期後(hou)續(xu)服務。

　　1. Beta-TC-6細(xi)胞液(ye)體(ti)培養(yang)基的保(bao)存是(shi)冷(leng)藏(zang)好(hao)？還(hai)是(shi)冷(leng)凍好(hao)？

　　要冷(leng)藏(zang)！！因為液(ye)體(ti)培養(yang)基經(jing)冷(leng)凍後(hou)再(zai)經(jing)溶(rong)化(hua)時(shi)，其(qi)溶(rong)液(ye)的pH值會發生改(gai)變(bian)，溶(rong)液(ye)往(wang)往(wang)變堿，某些成(cheng)分(fen)溶(rong)解也會受(shou)到(dao)影(ying)響對細(xi)胞生長不(bu)利。故(gu)液(ye)體(ti)培養(yang)基壹定(ding)要存放在冷(leng)藏(zang)箱中(zhong)，通常(chang)液(ye)體(ti)培養(yang)基在冷(leng)藏(zang)條件(jian)下(xia)可(ke)存放6個(ge)月(yue) ~ 壹年(nian)。

　　2.Beta-TC-6細(xi)胞 液(ye)體(ti)培養(yang)基中谷氨酰(xian)胺(an)的(de)作用(yong)，及使用方法。

　　幾乎(hu)所有的(de)細(xi)胞對谷氨酰(xian)胺(an)有(you)較高的要求，細(xi)胞需要谷氨酰(xian)胺(an)合(he)成(cheng)蛋(dan)白(bai)質(zhi)，在缺(que)少谷氨酰(xian)胺(an)時(shi)，細(xi)胞生長不(bu)良(liang)而死(si)亡。所以，各(ge)種培養(yang)液(ye)中都含有較(jiao)大量的(de)谷氨酰(xian)胺(an)。谷氨酰(xian)胺(an)在溶(rong)液(ye)中很不(bu)穩(wen)定(ding)，應置-20 ?C冰(bing)凍保(bao)存，用(yong)前加入培養(yang)基中。加(jia)有谷氨酰(xian)胺(an)的(de)液(ye)體(ti)培養(yang)基4 ?C 冰(bing)箱儲(chu)存兩(liang)周(zhou)以(yi)上時，應重新(xin)加(jia)入(ru)原(yuan)來量的(de)谷氨酰(xian)胺(an)。基(ji)礎醫學細(xi)胞中心(xin)在其服務項目中配(pei)制(zhi)分裝(zhuang)了(le)高濃度(du)（100倍）的谷氨酰(xian)胺(an)溶(rong)液(ye)（1ml/支）。每支(zhi)1ml的(de)谷氨酰(xian)胺(an)加(jia)到99ml*培養(yang)基中，其(qi)終(zhong)濃度(du)為(wei)2mM/ml培養(yang)基。包裝(zhuang)為(wei)粉紅色，-24?C保(bao)存。

　　3. Beta-TC-6細(xi)胞 培養(yang)用液(ye)pH對細(xi)胞生長的(de)影(ying)響

　　由於，大多數(shu)細(xi)胞適宜(yi)pH為7.2~7.4，偏離此範圍(wei)對(dui)細(xi)胞將產(chan)生有害(hai)的(de)影(ying)響。各(ge)種細(xi)胞對pH的(de)要求也(ye)不(bu)*相(xiang)同，原(yuan)代培養(yang)細(xi)胞壹般(ban)對(dui)pH變(bian)動(dong)耐(nai)受(shou)差(cha)，無限(xian)細(xi)胞系(xi)耐(nai)受(shou)力(li)強(qiang)。

　　但總體(ti)來說(shuo)，細(xi)胞耐(nai)酸性(xing)比耐(nai)堿(jian)性(xing)強壹(yi)些，偏酸環境中(zhong)更(geng)利於(yu)細(xi)胞生長。因此，我們(men)在配制培養(yang)用液(ye)時，可把(ba)液(ye)體(ti)的pH稍(shao)微(wei)調得偏酸壹些。液(ye)體(ti)在經(jing)過0.10um或(huo)0.22um濾膜(mo)過濾時(shi)，溶(rong)液(ye)的pH還(hai)會向(xiang)上(shang)浮動0.2左(zuo)右。

　　4.Beta-TC-6細(xi)胞 細(xi)胞傳(chuan)代消化(hua)時(shi)所用胰酶(mei)濃度(du)越高越好(hao)嗎(ma)？

　　不見(jian)得！因為胰蛋(dan)白酶(mei)溶(rong)液(ye)的消化(hua)能(neng)力(li)是(shi)和(he)溶(rong)液(ye)的pH、溫度(du)、胰酶(mei)濃度(du)及溶(rong)液(ye)中是(shi)否含有Ca++, Mg++離子(zi)和(he)血清等(deng)因素有關。通常(chang)情(qing)況下(xia)，pH 8.0 , 溫(wen)度(du) 37 oC 其(qi)作用(yong)能(neng)力(li)zui強。另外，鈣、鎂離子(zi)及血(xue)清均能大大(da)降(jiang)低(di)其消(xiao)化(hua)能(neng)力(li)。我(wo)們每次(ci)進行傳(chuan)代消化(hua)前(qian)，壹(yi)定(ding)要用D-Hanks液(ye)或(huo)PBS液(ye)反復沖(chong)洗(xi)細(xi)胞培養(yang)瓶，以便(bian)於(yu)將(jiang)含血清的培養(yang)基沖洗(xi)幹凈(jing)，這樣就能(neng)大(da)大提(ti)高消化(hua)液(ye)的消化(hua)能(neng)力(li)。本中(zhong)心(xin)通常(chang)使用的(de)消(xiao)化(hua)液(ye)濃度(du)為(wei)：

　　（1）０.０５％胰蛋(dan)白酶(mei)＋０.０２％ＥＤＴＡ；

　　（2）０.２５％胰蛋(dan)白酶(mei)＋０.０３％ＥＤＴＡ。

　　（3）0.25% 胰蛋(dan)白酶(mei)

　　溶(rong)液(ye)ｐＨ８.０～９.０；使用Ｄ－Ｈａｎｋ液(ye)配制。

　　多數(shu)細(xi)胞傳(chuan)代消化(hua)可(ke)使用０.０５％胰蛋(dan)白酶(mei)＋０.０２％ＥＤＴＡ這種消化(hua)液(ye)。

　　購買上(shang)海(hai)乾思(si)生物細(xi)胞註(zhu)意(yi)事(shi)項（乾思(si)生物）發布(bu)

　　壹、客(ke)戶收到細(xi)胞先不開蓋，放在培養(yang)箱靜置若(ruo)幹小(xiao)時(shi)後(hou)（看細(xi)胞密度(du)而(er)定(ding)）在倒置顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)細(xi)胞生長情(qing)況(kuang)，並(bing)對(dui)細(xi)胞進行不同倍數(shu)拍(pai)照(zhao)（建議(yi)受(shou)收(shou)細(xi)胞時的(de)培養(yang)基拍壹(yi)張照(zhao)片(pian)，觀察(cha)培養(yang)基的顏(yan)色和是(shi)否有漏(lou)液(ye)情況，顯(xian)微(wei)鏡下(xia)拍(pai)細(xi)胞100X，200X各(ge)壹張），排除(chu)細(xi)胞本身(shen)汙(wu)染(ran)的(de)情(qing)況(kuang)；

　　收到(dao)細(xi)胞未開(kai)封(feng)，出(chu)現汙(wu)染(ran)狀(zhuang)況(kuang)我(wo)們(men)負責(ze)免費(fei)發送(song)壹(yi)株(zhu)細(xi)胞。

　　二、如(ru)為貼(tie)壁(bi)細(xi)胞，請在顯微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)細(xi)胞密度(du)：

　　1. 未超(chao)過80%匯合(he)度(du)時(shi)，用(yong)75%酒精(jing)（建(jian)議(yi)配置75%酒(jiu)精(jing)的(de)水也(ye)是(shi)滅(mie)菌超(chao)純(chun)水，噴(pen)灑(sa)整個(ge)瓶消毒(du)後放到(dao)超菌(jun)臺內，嚴格無菌操(cao)作；然後打開蓋(gai)子(zi)，先把(ba)培養(yang)基吸(xi)出(chu)10ml左(zuo)右，放在離心(xin)管(guan)裏，然後瓶口過火(huo)（嚴禁直(zhi)接(jie)傾倒），這樣(yang)可以保(bao)證不(bu)汙(wu)染(ran)，再(zai)用(yong)10ml的(de)移(yi)液(ye)管(guan)，將剩(sheng)余的培液(ye)全部吸(xi)出(chu)，放於(yu)離心(xin)管(guan)中，培養(yang)瓶中只(zhi)剩(sheng)余(yu)10ml左(zuo)右培液(ye)就可(ke)以(yi)了。培養(yang)16hr(時間根(gen)據(ju)細(xi)胞生長情(qing)況(kuang)調整）之(zhi)後，傳(chuan)代或(huo)者凍存(cun)。

　　2. 超過80%匯合(he)度(du)時(shi)，請按(an)細(xi)胞培養(yang)條件(jian)傳(chuan)代培養(yang)。具(ju)體(ti)步驟如(ru)下(xia)：

　　1) 棄(qi)去培養(yang)液(ye)，用3ml PBS（不含鈣，鎂離子(zi)）洗(xi)1-2次(ci)；

　　2) 加1ml消(xiao)化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於T25培養(yang)瓶中，倒(dao)轉放於(yu)37度(du)培養(yang)箱1-3分(fen)鐘預(yu)熱，然後又將(jiang)培養(yang)瓶倒轉大(da)約30秒(miao)後，在倒置顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)細(xi)胞消化(hua)情(qing)況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞大部(bu)分變(bian)圓(yuan)分(fen)散(san)，輕敲(qiao)幾下(xia)培養(yang)培養(yang)瓶，細(xi)胞隨即脫(tuo)落下(xia)來(lai)；

　　3) 加入(ru)6-8ml*培養(yang)基，吸(xi)出(chu)，分到(dao)新的培養(yang)瓶中，按(an)要求分(fen)瓶。

　　三、如(ru)為懸(xuan)浮細(xi)胞，吸(xi)出(chu)培養(yang)液(ye)，1000轉/分(fen)鐘(zhong)離心(xin)5分(fen)鐘，吸(xi)出(chu)上清，管(guan)底細(xi)胞用新(xin)鮮(xian)培養(yang)基懸(xuan)浮細(xi)胞後移(yi)回培養(yang)瓶。

　　註(zhu)意(yi)：換(huan)液(ye)時壹半用(yong)我(wo)們(men)的培養(yang)基，壹半用(yong)妳(ni)們(men)的(de)，以(yi)免細(xi)胞不適(shi)應而(er)造(zao)成(cheng)生長不(bu)好(hao)。

　　四、細(xi)胞出(chu)現問題，可重(zhong)發的(de)情(qing)況有哪些？判(pan)定(ding)標準是(shi)什(shen)麽(me)？

　　（1）細(xi)胞運輸(shu)途(tu)中(zhong)遭(zao)遇(yu)的各(ge)種問(wen)題，細(xi)胞丟(diu)失、破損(sun)、漏(lou)液(ye)等(deng)，重發；

　　（2）凍存(cun)的(de)細(xi)胞復蘇(su)後，絕(jue)大(da)多數(shu)細(xi)胞未存(cun)活，重(zhong)發；

　　（3）存活(huo)的細(xi)胞靜置24小(xiao)時(shi)後，絕(jue)大多數(shu)細(xi)胞未存(cun)活，重(zhong)發；

　　（4）凍存(cun)的(de)細(xi)胞復蘇(su)後或(huo)存活(huo)的細(xi)胞靜置4小(xiao)時(shi)後並(bing)且(qie)未開(kai)封(feng)，出(chu)現汙(wu)染(ran)，重(zhong)發；

　　（5）視(shi)具(ju)體(ti)情況(kuang)而定。

　　五、細(xi)胞出(chu)現問題，不予(yu)以重(zhong)發的(de)情(qing)況有哪些？

　　（1）客戶(hu)造成(cheng)細(xi)胞汙(wu)染(ran)，不(bu)重(zhong)發；

　　（2）客戶(hu)不正確(que)操作致細(xi)胞狀態(tai)不好(hao)，不重(zhong)發；

　　（3）細(xi)胞狀態(tai)不好(hao)，未提(ti)供細(xi)胞培養(yang)前3天照(zhao)片(pian)的，不重(zhong)發；

　　（4）細(xi)胞培養(yang)時經(jing)其(qi)它(ta)處(chu)理(li)的(de)，不(bu)重發；

　　（5）細(xi)胞收到(dao)2天內，未告知，不重(zhong)發；

　　（6）視(shi)具(ju)體(ti)情況(kuang)而定。

　　六(liu)、售後服務政(zheng)策(ce)

　　Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等(deng)品(pin)牌(pai)；部(bu)分產品(pin)現貨，超(chao)低比價，另(ling)常(chang)備(bei)  Trizol  DMSO  lipo2000    lipo3000  SC-2004  SC-2005常(chang)備(bei)現貨 ；貨(huo)期短，價格優(you)，售後齊全。

　　細(xi)胞汙(wu)染(ran)問(wen)題，請在收到產品(pin)48小時(shi)內，給(gei)我(wo)們提(ti)出(chu)真實(shi)的(de)實(shi)驗(yan)結(jie)果；細(xi)胞活性(xing)問題，請在收到產品(pin)7天內給(gei)我(wo)們提(ti)出(chu)真實(shi)的(de)實(shi)驗(yan)結(jie)果，我(wo)們(men)調查核(he)實(shi)後(hou)予(yu)免費(fei)調換(huan)，不(bu)收(shou)取(qu)任何費用。

　　需要客戶(hu)提(ti)供Beta-TC-6細(xi)胞細(xi)胞培養(yang)說明、細(xi)胞操作處(chu)理(li)方法、細(xi)胞質量問(wen)題反饋(kui)表。

　　如用(yong)戶收到細(xi)胞8-30天之(zhi)內，因處理(li)不(bu)當(dang)造成(cheng)細(xi)胞死亡(wang)或(huo)汙(wu)染(ran)，我(wo)公司(si)將優(you)惠(hui)價重(zhong)新(xin)提(ti)供壹(yi)株(zhu)原(yuan)細(xi)胞

　　Beta-TC-6細(xi)胞質量可(ke)靠(kao)，售後有保(bao)障(zhang)

　　★我庫(ku)細(xi)胞近3000種(zhong)，來源(yuan)於(yu)美(mei)國ATCC,細(xi)胞都是(shi)經(jing)過嚴格質(zhi)量控制。

　　凍存(cun)細(xi)胞時間(jian)為5-7個(ge)工作日(ri)，活細(xi)胞為7-15個(ge)工作日(ri)。

　　★由於細(xi)胞庫現有細(xi)胞類目多，為了不(bu)出(chu)現混亂(luan)錯誤，需要了解Beta-TC-6細(xi)胞相(xiang)關細(xi)胞價格及詳(xiang)細(xi)資(zi)料請老(lao)師，對(dui)您造(zao)成(cheng)的(de)不(bu)便(bian)還(hai)請見(jian)諒(liang)！

（編輯(ji)：tanxi）