MCF-7-DDP細(xi)胞(bao)_選購(gou)指(zhi)南(nan)

　　細胞(bao)作為生(sheng)命(ming)組(zu)成(cheng)的(de)zui小(xiao)單元(yuan)，研(yan)究其相(xiang)關(guan)的(de)生(sheng)物(wu)行(xing)為(wei)及(ji)其(qi)規律(lv)與(yu)本(ben)質，對於(yu)揭示(shi)生(sheng)命(ming)的(de)奧(ao)秘，探索疾(ji)病(bing)的(de)機理與(yu)治(zhi)療(liao)手(shou)段，提(ti)高(gao)人類的(de)生(sheng)存(cun)壽(shou)命(ming)與(yu)質量(liang)，都有著重要的(de)意(yi)義。對細(xi)胞(bao)的(de)研(yan)究是壹個(ge)復(fu)雜的(de)工(gong)程(cheng)，細(xi)胞(bao)在(zai)人體(ti)內處於復(fu)雜的(de)微(wei)環境之中，包(bao)括溫(wen)度(du)、氧(yang)氣(qi)濃(nong)度(du)、生(sheng)物(wu)因子濃(nong)度(du)、機械作用、細(xi)胞(bao)間相互(hu)作用、細(xi)胞(bao)基質間相互(hu)作用等，同時，細胞(bao)體(ti)積微小、種(zhong)類多(duo)樣，在細(xi)胞(bao)水(shui)平進行(xing)細(xi)胞(bao)識別、代謝(xie)物(wu)檢(jian)測、內部組(zu)分(fen)分(fen)析、細(xi)胞(bao)結構與(yu)功(gong)能表(biao)征(zheng)、細(xi)胞(bao)間相互(hu)作用分(fen)析等工(gong)作也都(dou)有(you)著很大的(de)難(nan)度(du)。MCF-7-DDP細(xi)胞(bao)，上(shang)海(hai)乾(qian)思生(sheng)物(wu)公(gong)司(si)細胞(bao)近(jin)3000種(zhong)，來源(yuan)於美(mei)國ATCC,細(xi)胞(bao)都(dou)是經(jing)過嚴格(ge)質量(liang)控制，在中(zhong)國大(da)陸(lu)努(nu)力搭(da)建(jian)正牌(pai)細(xi)胞(bao)與(yu)國(guo)內廣(guang)大(da)科(ke)研(yan)人員(yuan)之間的(de)溝通(tong)橋(qiao)梁(liang)。為(wei)您提供MCF-7-DDP細胞(bao)外(wai)，還有更多(duo)相(xiang)關(guan)實(shi)驗(yan)產(chan)品，標(biao)準(zhun)品(pin)，細胞(bao)株(zhu)和實(shi)驗(yan)技(ji)術(shu)服務(wu)等等前期後(hou)續(xu)服務(wu)。

　　1. MCF-7-DDP細胞(bao)液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)基的(de)保(bao)存(cun)是(shi)冷藏(zang)好(hao)？還是(shi)冷凍(dong)好？

　　要冷藏(zang)！！因為(wei)液體(ti)培(pei)養(yang)基經(jing)冷凍(dong)後(hou)再(zai)經(jing)溶(rong)化時(shi)，其溶(rong)液(ye)的(de)pH值會(hui)發(fa)生(sheng)改變，溶(rong)液往(wang)往(wang)變堿(jian)，某些(xie)成(cheng)分(fen)溶解也會(hui)受(shou)到(dao)影響(xiang)對細(xi)胞(bao)生(sheng)長不(bu)利(li)。故(gu)液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)基壹(yi)定要存(cun)放(fang)在冷藏(zang)箱(xiang)中，通(tong)常(chang)液體(ti)培(pei)養(yang)基在(zai)冷藏(zang)條件(jian)下(xia)可存(cun)放(fang)6個月(yue) ~ 壹(yi)年(nian)。

　　2.MCF-7-DDP細胞(bao) 液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)基中(zhong)谷氨酰(xian)胺的(de)作用，及(ji)使(shi)用方法。

　　幾乎(hu)所(suo)有(you)的(de)細(xi)胞(bao)對谷(gu)氨酰(xian)胺有較(jiao)高的(de)要求，細(xi)胞(bao)需(xu)要谷氨酰(xian)胺合成(cheng)蛋(dan)白(bai)質，在(zai)缺(que)少(shao)谷氨酰(xian)胺時，細(xi)胞(bao)生(sheng)長不(bu)良(liang)而(er)死亡(wang)。所(suo)以，各(ge)種(zhong)培(pei)養(yang)液中都含(han)有(you)較(jiao)大量(liang)的(de)谷(gu)氨酰(xian)胺。谷氨酰(xian)胺在溶(rong)液中(zhong)很不(bu)穩(wen)定，應(ying)置(zhi)-20 ?C冰(bing)凍(dong)保存(cun)，用(yong)前(qian)加入(ru)培(pei)養(yang)基中(zhong)。加有谷(gu)氨酰(xian)胺的(de)液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)基4 ?C 冰(bing)箱(xiang)儲存(cun)兩周(zhou)以上(shang)時(shi)，應(ying)重(zhong)新加入(ru)原(yuan)來量(liang)的(de)谷(gu)氨酰(xian)胺。基礎(chu)醫學細(xi)胞(bao)中(zhong)心在其服務(wu)項(xiang)目中配(pei)制(zhi)分(fen)裝了(le)高(gao)濃(nong)度(du)（100倍(bei)）的(de)谷(gu)氨酰(xian)胺溶液(ye)（1ml/支）。每(mei)支1ml的(de)谷(gu)氨酰(xian)胺加到99ml*培(pei)養(yang)基中(zhong)，其終濃(nong)度(du)為(wei)2mM/ml培(pei)養(yang)基。包(bao)裝為粉(fen)紅(hong)色，-24?C保(bao)存(cun)。

　　3. MCF-7-DDP細胞(bao) 培(pei)養(yang)用液pH對細(xi)胞(bao)生(sheng)長的(de)影響(xiang)

　　由(you)於，大(da)多(duo)數(shu)細(xi)胞(bao)適(shi)宜pH為7.2~7.4，偏離(li)此(ci)範(fan)圍(wei)對細(xi)胞(bao)將(jiang)產生(sheng)有害的(de)影響(xiang)。各(ge)種(zhong)細胞(bao)對pH的(de)要求也(ye)不(bu)*相(xiang)同，原(yuan)代培(pei)養(yang)細胞(bao)壹(yi)般(ban)對pH變動(dong)耐(nai)受差(cha)，無(wu)限細(xi)胞(bao)系耐(nai)受力強(qiang)。

　　但總體(ti)來說(shuo)，細胞(bao)耐(nai)酸(suan)性比(bi)耐(nai)堿性強(qiang)壹些(xie)，偏(pian)酸(suan)環境中更利於細(xi)胞(bao)生(sheng)長。因此(ci)，我們在配(pei)制(zhi)培(pei)養(yang)用液時，可把(ba)液體(ti)的(de)pH稍微調(tiao)得(de)偏(pian)酸(suan)壹(yi)些(xie)。液(ye)體(ti)在經(jing)過0.10um或0.22um濾膜過濾時，溶液(ye)的(de)pH還(hai)會(hui)向上浮(fu)動(dong)0.2左(zuo)右(you)。

　　4.MCF-7-DDP細胞(bao) 細(xi)胞(bao)傳代消(xiao)化時(shi)所(suo)用(yong)胰(yi)酶濃(nong)度(du)越高越好嗎？

　　不(bu)見得！因為(wei)胰(yi)蛋(dan)白(bai)酶溶液(ye)的(de)消(xiao)化能(neng)力是(shi)和溶(rong)液的(de)pH、溫(wen)度(du)、胰(yi)酶濃(nong)度(du)及(ji)溶(rong)液中(zhong)是(shi)否含有(you)Ca++, Mg++離子和血清等因素(su)有關(guan)。通(tong)常(chang)情況(kuang)下(xia)，pH 8.0 , 溫(wen)度(du) 37 oC 其(qi)作用能(neng)力zui強(qiang)。另(ling)外，鈣、鎂(mei)離子及血清均(jun)能大(da)大降(jiang)低(di)其(qi)消(xiao)化能(neng)力。我(wo)們每次進行(xing)傳代消(xiao)化前(qian)，壹定要用D-Hanks液(ye)或PBS液(ye)反復(fu)沖(chong)洗(xi)細胞(bao)培(pei)養(yang)瓶，以便(bian)於將含血清的(de)培(pei)養(yang)基沖(chong)洗(xi)幹凈(jing)，這(zhe)樣就能(neng)大大(da)提(ti)高(gao)消(xiao)化液(ye)的(de)消(xiao)化能(neng)力。本(ben)中心(xin)通(tong)常(chang)使用(yong)的(de)消(xiao)化液(ye)濃(nong)度(du)為(wei)：

　　（1）０.０５％胰(yi)蛋(dan)白(bai)酶＋０.０２％ＥＤＴＡ；

　　（2）０.２５％胰(yi)蛋(dan)白(bai)酶＋０.０３％ＥＤＴＡ。

　　（3）0.25% 胰(yi)蛋(dan)白(bai)酶

　　溶液(ye)ｐＨ８.０～９.０；使用Ｄ－Ｈａｎｋ液配制。

　　多(duo)數(shu)細(xi)胞(bao)傳代消(xiao)化可使用(yong)０.０５％胰(yi)蛋(dan)白(bai)酶＋０.０２％ＥＤＴＡ這種(zhong)消(xiao)化液(ye)。

　　購買上海(hai)乾(qian)思生(sheng)物(wu)細(xi)胞(bao)註(zhu)意事項(xiang)（乾(qian)思生(sheng)物(wu)）發(fa)布(bu)

　　壹、客(ke)戶收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)先不(bu)開(kai)蓋(gai)，放(fang)在培(pei)養(yang)箱(xiang)靜置(zhi)若幹(gan)小時後(hou)（看(kan)細胞(bao)密(mi)度(du)而(er)定）在(zai)倒(dao)置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察細胞(bao)生(sheng)長情況(kuang)，並(bing)對細(xi)胞(bao)進(jin)行(xing)不(bu)同(tong)倍數(shu)拍照（建(jian)議(yi)受收(shou)細(xi)胞(bao)時(shi)的(de)培(pei)養(yang)基拍壹張照片(pian)，觀(guan)察培(pei)養(yang)基的(de)顏(yan)色和是否有漏液(ye)情況(kuang)，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下拍細胞(bao)100X，200X各(ge)壹張），排除細(xi)胞(bao)本(ben)身汙(wu)染的(de)情況(kuang)；

　　收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)未(wei)開封(feng)，出現汙(wu)染(ran)狀況(kuang)我們負(fu)責(ze)免(mian)費(fei)發(fa)送壹(yi)株細(xi)胞(bao)。

　　二、如(ru)為貼壁細胞(bao)，請(qing)在顯微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察細胞(bao)密(mi)度(du)：

　　1. 未超(chao)過80%匯合度(du)時(shi)，用(yong)75%酒(jiu)精(jing)（建(jian)議(yi)配置(zhi)75%酒(jiu)精(jing)的(de)水(shui)也是滅菌超純水，噴(pen)灑(sa)整(zheng)個(ge)瓶消(xiao)毒後(hou)放(fang)到超(chao)菌(jun)臺(tai)內(nei)，嚴格(ge)無(wu)菌(jun)操(cao)作；然後(hou)打(da)開(kai)蓋(gai)子，先把(ba)培(pei)養(yang)基吸(xi)出10ml左(zuo)右(you)，放(fang)在離(li)心(xin)管裏(li)，然(ran)後(hou)瓶口(kou)過火（嚴禁(jin)直接傾倒(dao)），這(zhe)樣可以保(bao)證(zheng)不(bu)汙(wu)染，再(zai)用10ml的(de)移(yi)液管，將(jiang)剩(sheng)余(yu)的(de)培(pei)液(ye)全部吸(xi)出，放(fang)於離(li)心(xin)管中(zhong)，培(pei)養(yang)瓶中(zhong)只剩余(yu)10ml左(zuo)右(you)培(pei)液(ye)就可以了(le)。培(pei)養(yang)16hr(時間根據細(xi)胞(bao)生(sheng)長情況(kuang)調(tiao)整(zheng)）之後(hou)，傳代或者凍(dong)存(cun)。

　　2. 超過80%匯合度(du)時(shi)，請(qing)按細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)條件(jian)傳代培(pei)養(yang)。具(ju)體(ti)步驟(zhou)如下：

　　1) 棄去培(pei)養(yang)液，用3ml PBS（不(bu)含(han)鈣，鎂(mei)離子）洗(xi)1-2次；

　　2) 加1ml消(xiao)化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於T25培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，倒(dao)轉放(fang)於37度(du)培(pei)養(yang)箱(xiang)1-3分(fen)鐘預熱，然後(hou)又(you)將培(pei)養(yang)瓶倒(dao)轉大約(yue)30秒(miao)後(hou)，在(zai)倒(dao)置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察細胞(bao)消(xiao)化情況(kuang)，若細(xi)胞(bao)大(da)部分(fen)變圓(yuan)分(fen)散，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下(xia)培(pei)養(yang)培(pei)養(yang)瓶，細(xi)胞(bao)隨(sui)即脫落(luo)下(xia)來；

　　3) 加入(ru)6-8ml*培(pei)養(yang)基，吸(xi)出，分(fen)到新的(de)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，按(an)要求分(fen)瓶。

　　三(san)、如(ru)為懸浮(fu)細胞(bao)，吸(xi)出培(pei)養(yang)液，1000轉/分(fen)鐘離(li)心(xin)5分(fen)鐘，吸(xi)出上清，管底(di)細(xi)胞(bao)用(yong)新鮮培(pei)養(yang)基懸浮(fu)細胞(bao)後(hou)移(yi)回培(pei)養(yang)瓶。

　　註意(yi)：換液時壹半用(yong)我(wo)們的(de)培(pei)養(yang)基，壹(yi)半用(yong)妳們的(de)，以免(mian)細(xi)胞(bao)不(bu)適(shi)應(ying)而(er)造(zao)成(cheng)生(sheng)長不(bu)好(hao)。

　　四、細胞(bao)出現問題(ti)，可重發(fa)的(de)情況(kuang)有(you)哪(na)些(xie)？判定標(biao)準(zhun)是(shi)什麽？

　　（1）細胞(bao)運輸(shu)途(tu)中(zhong)遭(zao)遇(yu)的(de)各(ge)種(zhong)問題(ti)，細(xi)胞(bao)丟失、破(po)損、漏液(ye)等，重發(fa)；

　　（2）凍(dong)存(cun)的(de)細(xi)胞(bao)復(fu)蘇後(hou)，絕(jue)大多(duo)數(shu)細(xi)胞(bao)未(wei)存(cun)活(huo)，重(zhong)發(fa)；

　　（3）存(cun)活(huo)的(de)細(xi)胞(bao)靜(jing)置24小時後(hou)，絕(jue)大多(duo)數(shu)細(xi)胞(bao)未(wei)存(cun)活(huo)，重(zhong)發(fa)；

　　（4）凍(dong)存(cun)的(de)細(xi)胞(bao)復(fu)蘇後(hou)或(huo)存(cun)活(huo)的(de)細(xi)胞(bao)靜(jing)置4小時後(hou)並(bing)且未(wei)開(kai)封(feng)，出現汙(wu)染(ran)，重(zhong)發(fa)；

　　（5）視具(ju)體(ti)情況(kuang)而(er)定。

　　五、細胞(bao)出現問題(ti)，不(bu)予(yu)以重(zhong)發(fa)的(de)情況(kuang)有(you)哪(na)些(xie)？

　　（1）客(ke)戶造(zao)成(cheng)細(xi)胞(bao)汙(wu)染，不(bu)重(zhong)發(fa)；

　　（2）客(ke)戶不(bu)正確操(cao)作致細(xi)胞(bao)狀態(tai)不(bu)好(hao)，不(bu)重(zhong)發(fa)；

　　（3）細胞(bao)狀態(tai)不(bu)好(hao)，未提(ti)供細胞(bao)培(pei)養(yang)前3天照片(pian)的(de)，不(bu)重(zhong)發(fa)；

　　（4）細胞(bao)培(pei)養(yang)時經(jing)其(qi)它(ta)處理的(de)，不(bu)重(zhong)發(fa)；

　　（5）細胞(bao)收(shou)到(dao)2天(tian)內，未告(gao)知(zhi)，不(bu)重(zhong)發(fa)；

　　（6）視具(ju)體(ti)情況(kuang)而(er)定。

　　六、售後(hou)服務(wu)政策

　　Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌(pai)；部分(fen)產品(pin)現貨(huo)，超低(di)比(bi)價，另(ling)常(chang)備(bei)  Trizol  DMSO  lipo2000    lipo3000  SC-2004  SC-2005常(chang)備(bei)現貨(huo) ；貨(huo)期短(duan)，價格(ge)優，售後(hou)齊全。

　　細胞(bao)汙(wu)染問題(ti)，請(qing)在收(shou)到(dao)產(chan)品48小時(shi)內(nei)，給(gei)我們提出真實(shi)的(de)實(shi)驗(yan)結果；細胞(bao)活(huo)性問題(ti)，請(qing)在收(shou)到(dao)產(chan)品7天內(nei)給(gei)我(wo)們提出真實(shi)的(de)實(shi)驗(yan)結果，我們調(tiao)查(zha)核實(shi)後(hou)予(yu)免費調(tiao)換(huan)，不(bu)收(shou)取(qu)任(ren)何(he)費(fei)用。

　　需要客(ke)戶提供MCF-7-DDP細胞(bao)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)說(shuo)明(ming)、細胞(bao)操(cao)作處理方(fang)法、細(xi)胞(bao)質量(liang)問題(ti)反饋(kui)表(biao)。

　　如用(yong)戶收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)8-30天(tian)之內，因處理不(bu)當(dang)造(zao)成(cheng)細(xi)胞(bao)死亡(wang)或汙(wu)染，我(wo)公(gong)司(si)將優惠價重(zhong)新提(ti)供壹株原(yuan)細胞(bao)

　　MCF-7-DDP細胞(bao)質量(liang)可靠，售後(hou)有(you)保障

　　★我庫(ku)細胞(bao)近(jin)3000種(zhong)，來源(yuan)於美(mei)國ATCC,細(xi)胞(bao)都(dou)是經(jing)過嚴格(ge)質量(liang)控制。

　　凍(dong)存(cun)細(xi)胞(bao)時(shi)間為5-7個(ge)工(gong)作日，活(huo)細(xi)胞(bao)為(wei)7-15個工(gong)作日。

　　★由(you)於細(xi)胞(bao)庫(ku)現有(you)細(xi)胞(bao)類(lei)目多(duo)，為(wei)了(le)不(bu)出現混(hun)亂(luan)錯誤(wu)，需(xu)要了解MCF-7-DDP細胞(bao)相(xiang)關細胞(bao)價格(ge)及(ji)詳(xiang)細(xi)資料(liao)請老(lao)師，對您造(zao)成(cheng)的(de)不(bu)便(bian)還請見諒！

（編輯(ji)：tanxi）