NCI-H1975細(xi)胞(bao)_新(xin)品(pin)來(lai)了(le)

　　細(xi)胞(bao)作為(wei)生(sheng)命(ming)組成(cheng)的zui小(xiao)單(dan)元(yuan)，研(yan)究(jiu)其(qi)相(xiang)關(guan)的生(sheng)物行(xing)為(wei)及其(qi)規律(lv)與本(ben)質(zhi)，對(dui)於(yu)揭(jie)示(shi)生(sheng)命(ming)的奧秘(mi)，探(tan)索(suo)疾(ji)病(bing)的機(ji)理與治(zhi)療(liao)手(shou)段，提高人類的(de)生(sheng)存(cun)壽命(ming)與質(zhi)量(liang)，都(dou)有著(zhe)重(zhong)要(yao)的意(yi)義。對細(xi)胞(bao)的(de)研(yan)究(jiu)是(shi)壹(yi)個(ge)復(fu)雜的工(gong)程，細(xi)胞(bao)在人(ren)體(ti)內處(chu)於(yu)復(fu)雜的微(wei)環境(jing)之(zhi)中(zhong)，包(bao)括溫(wen)度、氧(yang)氣(qi)濃(nong)度、生(sheng)物因子濃(nong)度、機(ji)械作用(yong)、細(xi)胞(bao)間相(xiang)互作用(yong)、細(xi)胞(bao)基(ji)質間相(xiang)互作用(yong)等(deng)，同時(shi)，細(xi)胞(bao)體(ti)積(ji)微小(xiao)、種(zhong)類多(duo)樣，在細(xi)胞(bao)水平進行(xing)細(xi)胞(bao)識別(bie)、代(dai)謝物檢測(ce)、內部(bu)組(zu)分分析(xi)、細(xi)胞(bao)結(jie)構與功(gong)能(neng)表(biao)征、細(xi)胞(bao)間相(xiang)互作用(yong)分析(xi)等(deng)工(gong)作也(ye)都(dou)有著(zhe)很(hen)大的(de)難度。NCI-H1975細(xi)胞(bao)，上(shang)海乾思生(sheng)物公司(si)細(xi)胞(bao)近(jin)3000種(zhong)，來源(yuan)於(yu)美(mei)國ATCC,細(xi)胞(bao)都(dou)是(shi)經(jing)過嚴格質(zhi)量(liang)控制，在中(zhong)國大陸努力(li)搭建正(zheng)牌(pai)細(xi)胞(bao)與國(guo)內(nei)廣(guang)大(da)科研(yan)人(ren)員(yuan)之間的(de)溝通(tong)橋(qiao)梁(liang)。為(wei)您提供(gong)NCI-H1975細(xi)胞(bao)外(wai)，還(hai)有更(geng)多(duo)相(xiang)關(guan)實驗(yan)產品(pin)，標(biao)準(zhun)品(pin)，細(xi)胞(bao)株(zhu)和(he)實驗(yan)技(ji)術(shu)服(fu)務等等前期(qi)後續服務。

　　1. NCI-H1975細(xi)胞(bao)液(ye)體培(pei)養(yang)基(ji)的(de)保(bao)存是(shi)冷(leng)藏(zang)好？還(hai)是(shi)冷(leng)凍(dong)好？

　　要(yao)冷藏(zang)！！因為液體培(pei)養(yang)基(ji)經(jing)冷凍(dong)後(hou)再(zai)經(jing)溶化時(shi)，其(qi)溶液的pH值(zhi)會發生(sheng)改(gai)變，溶液往(wang)往(wang)變(bian)堿(jian)，某(mou)些(xie)成分溶解也會受到影(ying)響(xiang)對細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)不(bu)利(li)。故(gu)液體培(pei)養(yang)基(ji)壹(yi)定(ding)要(yao)存放(fang)在冷(leng)藏(zang)箱中(zhong)，通常液體培(pei)養(yang)基(ji)在冷(leng)藏(zang)條(tiao)件(jian)下(xia)可存放(fang)6個(ge)月(yue) ~ 壹(yi)年。

　　2.NCI-H1975細(xi)胞(bao) 液(ye)體培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)谷(gu)氨(an)酰胺的作用(yong)，及(ji)使用(yong)方法(fa)。

　　幾(ji)乎所有的(de)細(xi)胞(bao)對(dui)谷(gu)氨(an)酰胺有較(jiao)高的要(yao)求(qiu)，細(xi)胞(bao)需要(yao)谷(gu)氨(an)酰胺合成蛋(dan)白(bai)質(zhi)，在缺(que)少(shao)谷(gu)氨(an)酰胺時(shi)，細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)不(bu)良而(er)死(si)亡。所以(yi)，各種(zhong)培(pei)養(yang)液(ye)中(zhong)都(dou)含(han)有較(jiao)大(da)量的谷(gu)氨(an)酰胺。谷(gu)氨(an)酰胺在溶液中(zhong)很(hen)不(bu)穩(wen)定，應(ying)置-20 ?C冰凍(dong)保(bao)存，用前加(jia)入(ru)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)。加(jia)有谷(gu)氨(an)酰胺的液體(ti)培(pei)養(yang)基(ji)4 ?C 冰箱儲存(cun)兩(liang)周以(yi)上(shang)時(shi)，應(ying)重(zhong)新加(jia)入(ru)原(yuan)來(lai)量(liang)的谷(gu)氨(an)酰胺。基礎(chu)醫學細(xi)胞(bao)中(zhong)心在其(qi)服務(wu)項目(mu)中(zhong)配(pei)制分裝(zhuang)了高濃(nong)度（100倍(bei)）的(de)谷(gu)氨(an)酰胺溶液（1ml/支(zhi)）。每支(zhi)1ml的谷(gu)氨(an)酰胺加(jia)到(dao)99ml*培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)，其(qi)終濃(nong)度為(wei)2mM/ml培(pei)養(yang)基(ji)。包(bao)裝(zhuang)為粉(fen)紅色，-24?C保存。

　　3. NCI-H1975細(xi)胞(bao) 培(pei)養(yang)用(yong)液(ye)pH對(dui)細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)的影(ying)響(xiang)

　　由於(yu)，大(da)多(duo)數(shu)細(xi)胞(bao)適(shi)宜(yi)pH為7.2~7.4，偏(pian)離(li)此(ci)範圍(wei)對細(xi)胞(bao)將(jiang)產生(sheng)有害的(de)影(ying)響(xiang)。各種(zhong)細(xi)胞(bao)對(dui)pH的要(yao)求(qiu)也(ye)不(bu)*相(xiang)同(tong)，原代(dai)培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)壹(yi)般對pH變動耐受差，無限細(xi)胞(bao)系(xi)耐受力(li)強(qiang)。

　　但(dan)總體(ti)來說，細(xi)胞(bao)耐(nai)酸(suan)性比(bi)耐(nai)堿(jian)性強(qiang)壹(yi)些(xie)，偏(pian)酸(suan)環境(jing)中(zhong)更(geng)利(li)於(yu)細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)。因此(ci)，我們(men)在配(pei)制培(pei)養(yang)用(yong)液(ye)時(shi)，可(ke)把(ba)液體(ti)的(de)pH稍(shao)微調(tiao)得偏(pian)酸(suan)壹些(xie)。液體(ti)在經(jing)過0.10um或(huo)0.22um濾(lv)膜(mo)過濾(lv)時(shi)，溶液的pH還(hai)會向上浮(fu)動0.2左(zuo)右(you)。

　　4.NCI-H1975細(xi)胞(bao) 細(xi)胞(bao)傳代(dai)消化(hua)時(shi)所(suo)用(yong)胰(yi)酶濃(nong)度越(yue)高越好嗎？

　　不(bu)見(jian)得！因為胰蛋(dan)白(bai)酶溶液的消化(hua)能(neng)力(li)是(shi)和(he)溶液的pH、溫(wen)度、胰(yi)酶濃(nong)度及(ji)溶液中(zhong)是(shi)否(fou)含(han)有Ca++, Mg++離(li)子和(he)血清等因素有關(guan)。通(tong)常情況下(xia)，pH 8.0 , 溫(wen)度 37 oC 其(qi)作用(yong)能(neng)力(li)zui強(qiang)。另外(wai)，鈣(gai)、鎂(mei)離(li)子及血(xue)清均(jun)能(neng)大(da)大降低其(qi)消化(hua)能(neng)力(li)。我們(men)每次進(jin)行(xing)傳代(dai)消化(hua)前，壹(yi)定要(yao)用D-Hanks液(ye)或PBS液(ye)反(fan)復沖(chong)洗(xi)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)瓶(ping)，以(yi)便於(yu)將(jiang)含(han)血清的培(pei)養(yang)基(ji)沖(chong)洗(xi)幹凈，這(zhe)樣(yang)就能(neng)大(da)大提高消化(hua)液的(de)消化(hua)能(neng)力(li)。本(ben)中(zhong)心通常使用(yong)的消化(hua)液濃(nong)度為(wei)：

　　（1）０.０５％胰蛋(dan)白(bai)酶＋０.０２％ＥＤＴＡ；

　　（2）０.２５％胰蛋(dan)白(bai)酶＋０.０３％ＥＤＴＡ。

　　（3）0.25% 胰蛋(dan)白(bai)酶

　　溶液ｐＨ８.０～９.０；使用(yong)Ｄ－Ｈａｎｋ液配(pei)制。

　　多(duo)數(shu)細(xi)胞(bao)傳代(dai)消化(hua)可使用(yong)０.０５％胰蛋(dan)白(bai)酶＋０.０２％ＥＤＴＡ這(zhe)種(zhong)消化(hua)液。

　　購(gou)買上海乾思生(sheng)物細(xi)胞(bao)註意(yi)事項（乾(qian)思生(sheng)物）發布(bu)

　　壹、客(ke)戶(hu)收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)先不(bu)開(kai)蓋，放(fang)在培(pei)養(yang)箱靜置若(ruo)幹小時(shi)後(hou)（看(kan)細(xi)胞(bao)密(mi)度而(er)定(ding)）在倒(dao)置顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)情況，並(bing)對細(xi)胞(bao)進(jin)行(xing)不(bu)同(tong)倍(bei)數(shu)拍照(zhao)（建議(yi)受(shou)收(shou)細(xi)胞(bao)時(shi)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)拍壹(yi)張照片(pian)，觀(guan)察培(pei)養(yang)基(ji)的(de)顏色和(he)是(shi)否(fou)有漏(lou)液(ye)情況，顯(xian)微鏡(jing)下(xia)拍細(xi)胞(bao)100X，200X各壹張），排除細(xi)胞(bao)本(ben)身汙(wu)染的(de)情況；

　　收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)未(wei)開(kai)封，出(chu)現(xian)汙(wu)染狀(zhuang)況我們(men)負責免(mian)費發送壹(yi)株(zhu)細(xi)胞(bao)。

　　二(er)、如(ru)為貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)，請在顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察細(xi)胞(bao)密(mi)度：

　　1. 未(wei)超(chao)過80%匯(hui)合(he)度時(shi)，用(yong)75%酒(jiu)精（建議(yi)配(pei)置75%酒(jiu)精的水也是(shi)滅菌(jun)超(chao)純(chun)水，噴灑(sa)整個(ge)瓶(ping)消毒(du)後(hou)放(fang)到超(chao)菌(jun)臺內(nei)，嚴格無菌操(cao)作；然(ran)後(hou)打開蓋子，先把(ba)培(pei)養(yang)基(ji)吸(xi)出(chu)10ml左(zuo)右(you)，放(fang)在離(li)心(xin)管裏(li)，然後(hou)瓶口(kou)過火（嚴禁(jin)直(zhi)接(jie)傾倒(dao)），這樣(yang)可以(yi)保(bao)證不(bu)汙(wu)染，再(zai)用10ml的(de)移液管，將(jiang)剩(sheng)余的(de)培(pei)液全部(bu)吸(xi)出(chu)，放(fang)於(yu)離(li)心(xin)管中(zhong)，培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)只(zhi)剩余10ml左(zuo)右(you)培(pei)液就可(ke)以(yi)了(le)。培(pei)養(yang)16hr(時(shi)間根(gen)據細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)情況調(tiao)整）之後(hou)，傳代(dai)或(huo)者凍(dong)存(cun)。

　　2. 超過80%匯(hui)合(he)度時(shi)，請按(an)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)傳代(dai)培(pei)養(yang)。具(ju)體(ti)步(bu)驟如(ru)下(xia)：

　　1) 棄去(qu)培(pei)養(yang)液(ye)，用(yong)3ml PBS（不(bu)含(han)鈣，鎂(mei)離(li)子）洗(xi)1-2次；

　　2) 加(jia)1ml消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)T25培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)轉放(fang)於(yu)37度培(pei)養(yang)箱1-3分鐘預熱(re)，然(ran)後又(you)將(jiang)培(pei)養(yang)瓶(ping)倒(dao)轉大約30秒(miao)後，在倒(dao)置顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察細(xi)胞(bao)消化(hua)情況，若(ruo)細(xi)胞(bao)大(da)部(bu)分變圓(yuan)分散，輕(qing)敲(qiao)幾下(xia)培(pei)養(yang)培(pei)養(yang)瓶(ping)，細(xi)胞(bao)隨(sui)即脫(tuo)落下(xia)來；

　　3) 加(jia)入(ru)6-8ml*培(pei)養(yang)基(ji)，吸(xi)出(chu)，分到新(xin)的培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，按(an)要(yao)求(qiu)分瓶。

　　三、如(ru)為懸浮(fu)細(xi)胞(bao)，吸(xi)出(chu)培(pei)養(yang)液(ye)，1000轉/分鐘離(li)心(xin)5分鐘，吸(xi)出(chu)上清，管底(di)細(xi)胞(bao)用(yong)新鮮(xian)培(pei)養(yang)基(ji)懸浮(fu)細(xi)胞(bao)後(hou)移回培(pei)養(yang)瓶(ping)。

　　註意(yi)：換(huan)液時(shi)壹(yi)半用(yong)我們(men)的培(pei)養(yang)基(ji)，壹(yi)半用(yong)妳(ni)們(men)的，以(yi)免(mian)細(xi)胞(bao)不(bu)適(shi)應(ying)而(er)造(zao)成(cheng)生(sheng)長(chang)不(bu)好。

　　四、細(xi)胞(bao)出(chu)現(xian)問題，可(ke)重發的情況有哪(na)些(xie)？判定(ding)標(biao)準(zhun)是(shi)什(shen)麽？

　　（1）細(xi)胞(bao)運(yun)輸(shu)途中(zhong)遭遇的各種(zhong)問題，細(xi)胞(bao)丟(diu)失、破(po)損、漏(lou)液(ye)等(deng)，重發；

　　（2）凍(dong)存(cun)的細(xi)胞(bao)復(fu)蘇(su)後，絕(jue)大(da)多(duo)數(shu)細(xi)胞(bao)未(wei)存(cun)活，重(zhong)發；

　　（3）存(cun)活(huo)的細(xi)胞(bao)靜(jing)置24小(xiao)時(shi)後(hou)，絕(jue)大(da)多(duo)數(shu)細(xi)胞(bao)未(wei)存(cun)活，重(zhong)發；

　　（4）凍(dong)存(cun)的細(xi)胞(bao)復(fu)蘇(su)後或(huo)存(cun)活(huo)的細(xi)胞(bao)靜(jing)置4小(xiao)時(shi)後(hou)並(bing)且(qie)未(wei)開(kai)封，出(chu)現(xian)汙(wu)染，重(zhong)發；

　　（5）視(shi)具(ju)體(ti)情況而(er)定(ding)。

　　五、細(xi)胞(bao)出(chu)現(xian)問題，不(bu)予以(yi)重(zhong)發的情況有哪(na)些(xie)？

　　（1）客(ke)戶(hu)造成(cheng)細(xi)胞(bao)汙(wu)染，不(bu)重(zhong)發；

　　（2）客(ke)戶(hu)不(bu)正(zheng)確(que)操(cao)作致(zhi)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)不(bu)好，不(bu)重(zhong)發；

　　（3）細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)不(bu)好，未(wei)提供(gong)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)前(qian)3天照(zhao)片(pian)的(de)，不(bu)重(zhong)發；

　　（4）細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)時(shi)經(jing)其(qi)它(ta)處(chu)理(li)的(de)，不(bu)重(zhong)發；

　　（5）細(xi)胞(bao)收(shou)到(dao)2天內(nei)，未(wei)告(gao)知，不(bu)重(zhong)發；

　　（6）視(shi)具(ju)體(ti)情況而(er)定(ding)。

　　六(liu)、售後(hou)服務政策

　　Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等(deng)品(pin)牌(pai)；部(bu)分產品(pin)現(xian)貨(huo)，超低(di)比(bi)價(jia)，另常備(bei)  Trizol  DMSO  lipo2000    lipo3000  SC-2004  SC-2005常(chang)備現(xian)貨(huo) ；貨(huo)期(qi)短，價(jia)格優(you)，售(shou)後齊全(quan)。

　　細(xi)胞(bao)汙(wu)染問題，請在收(shou)到(dao)產品(pin)48小(xiao)時(shi)內(nei)，給(gei)我們(men)提出真實的實驗(yan)結(jie)果(guo)；細(xi)胞(bao)活(huo)性問題，請在收(shou)到(dao)產品(pin)7天內(nei)給(gei)我們(men)提出真實的實驗(yan)結(jie)果(guo)，我們(men)調(tiao)查核(he)實後予免(mian)費調(tiao)換(huan)，不(bu)收(shou)取(qu)任(ren)何費(fei)用。

　　需要(yao)客戶(hu)提供(gong)NCI-H1975細(xi)胞(bao)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)說明(ming)、細(xi)胞(bao)操(cao)作處(chu)理(li)方法(fa)、細(xi)胞(bao)質(zhi)量問題反(fan)饋(kui)表(biao)。

　　如(ru)用戶(hu)收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)8-30天之(zhi)內(nei)，因處理不(bu)當造成(cheng)細(xi)胞(bao)死(si)亡或汙(wu)染，我公司(si)將(jiang)優(you)惠價(jia)重新提供(gong)壹株原細(xi)胞(bao)

　　NCI-H1975細(xi)胞(bao)質(zhi)量可靠，售(shou)後(hou)有保(bao)障(zhang)

　　★我庫細(xi)胞(bao)近(jin)3000種(zhong)，來源(yuan)於(yu)美(mei)國ATCC,細(xi)胞(bao)都(dou)是(shi)經(jing)過嚴格質(zhi)量(liang)控制。

　　凍(dong)存(cun)細(xi)胞(bao)時(shi)間為(wei)5-7個(ge)工(gong)作日(ri)，活(huo)細(xi)胞(bao)為(wei)7-15個(ge)工(gong)作日(ri)。

　　★由(you)於(yu)細(xi)胞(bao)庫現(xian)有細(xi)胞(bao)類(lei)目多(duo)，為了不(bu)出(chu)現(xian)混亂(luan)錯誤，需要(yao)了解(jie)NCI-H1975細(xi)胞(bao)相(xiang)關(guan)細(xi)胞(bao)價(jia)格及(ji)詳細(xi)資(zi)料請老師，對您(nin)造(zao)成(cheng)的不(bu)便還(hai)請見諒！

（編(bian)輯(ji)：tanxi）