肺(fei)癌(ai)細胞(bao)（淋巴結(jie)轉(zhuan)移(yi)）_選(xuan)購(gou)指(zhi)南(nan)

　　細胞(bao)作為生命(ming)組成的zui小單元(yuan)，研(yan)究(jiu)其(qi)相(xiang)關的生物(wu)行(xing)為(wei)及其(qi)規律與本(ben)質，對於(yu)揭(jie)示(shi)生命(ming)的奧(ao)秘，探索疾(ji)病的機理(li)與治(zhi)療手(shou)段(duan)，提高(gao)人類(lei)的生存(cun)壽(shou)命(ming)與質量，都(dou)有著(zhe)重(zhong)要(yao)的意(yi)義。對(dui)細胞(bao)的研究(jiu)是(shi)壹(yi)個(ge)復雜的工(gong)程(cheng)，細胞(bao)在人體(ti)內(nei)處於(yu)復雜的微(wei)環境之(zhi)中，包(bao)括溫(wen)度、氧(yang)氣(qi)濃(nong)度(du)、生物(wu)因子(zi)濃(nong)度(du)、機(ji)械(xie)作用、細胞(bao)間(jian)相(xiang)互作用、細胞(bao)基(ji)質間相(xiang)互作用等，同(tong)時，細胞(bao)體(ti)積微(wei)小、種(zhong)類(lei)多(duo)樣，在細胞(bao)水(shui)平(ping)進(jin)行細胞(bao)識(shi)別(bie)、代(dai)謝(xie)物檢(jian)測、內(nei)部組分(fen)分(fen)析(xi)、細胞(bao)結(jie)構與功(gong)能表征(zheng)、細胞(bao)間(jian)相(xiang)互作用分(fen)析(xi)等(deng)工(gong)作也(ye)都(dou)有著(zhe)很(hen)大的難度(du)。肺(fei)癌(ai)細胞(bao)(淋巴結(jie)轉(zhuan)移(yi))，上(shang)海乾思(si)生物(wu)公司(si)細胞(bao)近(jin)3000種(zhong)，來源(yuan)於(yu)美(mei)國(guo)ATCC,細胞(bao)都(dou)是(shi)經過嚴(yan)格(ge)質量控(kong)制，在中(zhong)國大陸(lu)努力搭建(jian)正牌細胞(bao)與國(guo)內(nei)廣(guang)大科研(yan)人員(yuan)之(zhi)間的溝通(tong)橋(qiao)梁(liang)。為(wei)您(nin)提供肺(fei)癌(ai)細胞(bao)(淋巴結(jie)轉(zhuan)移(yi))外(wai)，還(hai)有更(geng)多(duo)相(xiang)關實(shi)驗產品(pin)，標準品，細胞(bao)株(zhu)和實(shi)驗技(ji)術服(fu)務等(deng)等前(qian)期後(hou)續(xu)服(fu)務。

　　1. 肺(fei)癌(ai)細胞(bao)(淋巴結(jie)轉(zhuan)移(yi))液(ye)體培養基(ji)的保(bao)存(cun)是(shi)冷(leng)藏好？還(hai)是(shi)冷(leng)凍好？

　　要(yao)冷(leng)藏！！因為液(ye)體(ti)培養基(ji)經冷(leng)凍後(hou)再(zai)經溶(rong)化時，其溶(rong)液的pH值(zhi)會(hui)發(fa)生改(gai)變，溶(rong)液往往變堿，某些成分(fen)溶(rong)解(jie)也(ye)會受到(dao)影(ying)響對(dui)細胞(bao)生長(chang)不利。故液體培養基(ji)壹定(ding)要(yao)存放(fang)在冷(leng)藏箱中(zhong)，通(tong)常(chang)液(ye)體培養基(ji)在冷(leng)藏條件下(xia)可(ke)存放(fang)6個(ge)月 ~ 壹(yi)年(nian)。

　　2.肺(fei)癌(ai)細胞(bao)(淋巴結(jie)轉(zhuan)移(yi)) 液(ye)體培養基(ji)中谷氨酰胺(an)的作用，及使(shi)用方(fang)法(fa)。

　　幾乎(hu)所(suo)有的細胞(bao)對(dui)谷氨酰胺(an)有較(jiao)高(gao)的要(yao)求，細胞(bao)需(xu)要(yao)谷氨酰胺(an)合(he)成蛋白質，在缺(que)少谷氨酰胺(an)時，細胞(bao)生長(chang)不良而(er)死(si)亡。所(suo)以(yi)，各種(zhong)培養液(ye)中都(dou)含(han)有較(jiao)大量(liang)的谷氨酰胺(an)。谷氨酰胺(an)在溶(rong)液中(zhong)很(hen)不穩(wen)定(ding)，應(ying)置-20 ?C冰凍(dong)保(bao)存(cun)，用前(qian)加(jia)入(ru)培養基(ji)中。加(jia)有谷氨酰胺(an)的液體(ti)培養基(ji)4 ?C 冰箱(xiang)儲存(cun)兩周以上(shang)時，應(ying)重(zhong)新(xin)加(jia)入(ru)原(yuan)來量的谷氨酰胺(an)。基礎醫學細胞(bao)中(zhong)心(xin)在其(qi)服(fu)務項(xiang)目(mu)中配(pei)制(zhi)分(fen)裝(zhuang)了(le)高(gao)濃(nong)度(du)（100倍）的谷氨酰胺(an)溶(rong)液（1ml/支(zhi)）。每支1ml的谷氨酰胺(an)加到(dao)99ml*培養基(ji)中，其(qi)終濃(nong)度(du)為(wei)2mM/ml培養基(ji)。包(bao)裝為(wei)粉紅色(se)，-24?C保(bao)存(cun)。

　　3. 肺(fei)癌(ai)細胞(bao)(淋巴結(jie)轉(zhuan)移(yi)) 培養用(yong)液pH對(dui)細胞(bao)生長(chang)的影(ying)響

　　由於(yu)，大多(duo)數細胞(bao)適宜(yi)pH為(wei)7.2~7.4，偏(pian)離此範圍(wei)對細胞(bao)將(jiang)產生有害的影(ying)響。各種(zhong)細胞(bao)對(dui)pH的要(yao)求也(ye)不*相(xiang)同(tong)，原代(dai)培養細胞(bao)壹(yi)般(ban)對pH變動(dong)耐受差，無限細胞(bao)系(xi)耐受力強。

　　但總體(ti)來說，細胞(bao)耐酸性(xing)比耐堿性強壹些(xie)，偏(pian)酸環境中(zhong)更(geng)利於(yu)細胞(bao)生長(chang)。因此，我們(men)在配(pei)制(zhi)培養用(yong)液時，可把液體的pH稍微(wei)調(tiao)得偏(pian)酸壹(yi)些。液體在經過0.10um或(huo)0.22um濾膜過濾時，溶(rong)液的pH還(hai)會向(xiang)上(shang)浮(fu)動(dong)0.2左右。

　　4.肺(fei)癌(ai)細胞(bao)(淋巴結(jie)轉(zhuan)移(yi)) 細胞(bao)傳(chuan)代(dai)消化時所用(yong)胰酶濃(nong)度(du)越(yue)高(gao)越(yue)好嗎？

　　不見(jian)得！因為胰(yi)蛋白酶溶(rong)液的消化能力是(shi)和溶(rong)液的pH、溫度(du)、胰(yi)酶濃(nong)度(du)及(ji)溶(rong)液中(zhong)是(shi)否含(han)有Ca++, Mg++離子(zi)和血(xue)清(qing)等因素(su)有關。通(tong)常情(qing)況(kuang)下(xia)，pH 8.0 , 溫(wen)度 37 oC 其作用能力zui強。另(ling)外(wai)，鈣、鎂離子(zi)及血(xue)清(qing)均能大大降(jiang)低(di)其消(xiao)化能力。我們(men)每(mei)次(ci)進(jin)行傳(chuan)代(dai)消化前(qian)，壹(yi)定(ding)要(yao)用D-Hanks液(ye)或(huo)PBS液(ye)反復沖洗細胞(bao)培養瓶(ping)，以便(bian)於(yu)將(jiang)含(han)血(xue)清(qing)的培養基(ji)沖洗幹(gan)凈(jing)，這樣(yang)就(jiu)能大大提高(gao)消(xiao)化液(ye)的消化能力。本中(zhong)心(xin)通常(chang)使(shi)用的消化液(ye)濃(nong)度(du)為(wei)：

　　（1）０.０５％胰蛋白酶＋０.０２％ＥＤＴＡ；

　　（2）０.２５％胰蛋白酶＋０.０３％ＥＤＴＡ。

　　（3）0.25% 胰蛋白酶

　　溶(rong)液ｐＨ８.０～９.０；使(shi)用Ｄ－Ｈａｎｋ液(ye)配(pei)制(zhi)。

　　多(duo)數細胞(bao)傳(chuan)代(dai)消化可(ke)使(shi)用０.０５％胰(yi)蛋白酶＋０.０２％ＥＤＴＡ這種(zhong)消化液(ye)。

　　購買上(shang)海乾思(si)生物(wu)細胞(bao)註(zhu)意(yi)事項(xiang)（乾思(si)生物(wu)）發(fa)布(bu)

　　壹、客戶(hu)收到(dao)細胞(bao)先(xian)不開(kai)蓋，放(fang)在培養箱(xiang)靜(jing)置(zhi)若(ruo)幹(gan)小(xiao)時後(hou)（看(kan)細胞(bao)密度而(er)定(ding)）在倒(dao)置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡下觀察細胞(bao)生長(chang)情(qing)況(kuang)，並(bing)對細胞(bao)進(jin)行不同(tong)倍數(shu)拍照(zhao)（建議受收(shou)細胞(bao)時的培養基(ji)拍壹(yi)張照(zhao)片，觀(guan)察培養基(ji)的顏色(se)和是(shi)否有漏液(ye)情(qing)況(kuang)，顯(xian)微(wei)鏡下拍細胞(bao)100X，200X各壹(yi)張），排(pai)除(chu)細胞(bao)本(ben)身汙染的情(qing)況(kuang)；

　　收到(dao)細胞(bao)未(wei)開(kai)封，出現(xian)汙染狀(zhuang)況(kuang)我(wo)們(men)負(fu)責(ze)免(mian)費發(fa)送(song)壹株(zhu)細胞(bao)。

　　二、如為貼壁細胞(bao)，請(qing)在顯(xian)微(wei)鏡下觀察細胞(bao)密度：

　　1. 未(wei)超(chao)過80%匯合(he)度時，用75%酒(jiu)精（建(jian)議配(pei)置(zhi)75%酒(jiu)精的水也(ye)是(shi)滅(mie)菌(jun)超(chao)純水，噴灑整個(ge)瓶消(xiao)毒(du)後(hou)放(fang)到(dao)超(chao)菌(jun)臺(tai)內(nei)，嚴格(ge)無菌(jun)操(cao)作；然(ran)後(hou)打(da)開(kai)蓋子(zi)，先把培養基(ji)吸出(chu)10ml左右，放(fang)在離心(xin)管(guan)裏，然(ran)後(hou)瓶口(kou)過火（嚴禁直(zhi)接(jie)傾(qing)倒(dao)），這樣(yang)可(ke)以保(bao)證(zheng)不汙染，再(zai)用10ml的移(yi)液(ye)管(guan)，將剩余的培液全(quan)部吸(xi)出(chu)，放(fang)於(yu)離心(xin)管(guan)中，培養瓶(ping)中只(zhi)剩余10ml左右培液就(jiu)可以(yi)了(le)。培養16hr(時間根據(ju)細胞(bao)生長(chang)情(qing)況(kuang)調(tiao)整）之(zhi)後(hou)，傳(chuan)代(dai)或者(zhe)凍存(cun)。

　　2. 超(chao)過80%匯合(he)度時，請(qing)按(an)細胞(bao)培養條(tiao)件傳(chuan)代(dai)培養。具體步驟如下：

　　1) 棄去(qu)培養液(ye)，用3ml PBS（不含(han)鈣(gai)，鎂(mei)離子(zi)）洗1-2次(ci)；

　　2) 加1ml消(xiao)化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)T25培養瓶(ping)中，倒(dao)轉(zhuan)放(fang)於(yu)37度(du)培養箱(xiang)1-3分(fen)鐘(zhong)預(yu)熱(re)，然(ran)後(hou)又將(jiang)培養瓶(ping)倒(dao)轉(zhuan)大約(yue)30秒(miao)後(hou)，在倒(dao)置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡下觀察細胞(bao)消(xiao)化情(qing)況(kuang)，若(ruo)細胞(bao)大部分(fen)變圓(yuan)分(fen)散，輕敲(qiao)幾下(xia)培養培養瓶(ping)，細胞(bao)隨(sui)即脫落下來；

　　3) 加入(ru)6-8ml*培養基(ji)，吸出(chu)，分(fen)到(dao)新(xin)的培養瓶(ping)中，按(an)要(yao)求分(fen)瓶(ping)。

　　三(san)、如為懸浮(fu)細胞(bao)，吸(xi)出培養液(ye)，1000轉(zhuan)/分(fen)鐘(zhong)離心(xin)5分(fen)鐘(zhong)，吸(xi)出(chu)上(shang)清(qing)，管(guan)底細胞(bao)用(yong)新(xin)鮮(xian)培養基(ji)懸浮(fu)細胞(bao)後(hou)移(yi)回(hui)培養瓶(ping)。

　　註(zhu)意(yi)：換液時壹半(ban)用我(wo)們(men)的培養基(ji)，壹半(ban)用妳們(men)的，以免(mian)細胞(bao)不適應(ying)而造成生長(chang)不好。

　　四、細胞(bao)出(chu)現(xian)問(wen)題，可(ke)重(zhong)發的情(qing)況(kuang)有哪些(xie)？判定(ding)標準是(shi)什(shen)麽？

　　（1）細胞(bao)運(yun)輸途(tu)中(zhong)遭(zao)遇的各種(zhong)問(wen)題，細胞(bao)丟(diu)失(shi)、破(po)損、漏液(ye)等(deng)，重(zhong)發；

　　（2）凍存(cun)的細胞(bao)復蘇後(hou)，絕大多(duo)數細胞(bao)未(wei)存(cun)活，重(zhong)發；

　　（3）存活(huo)的細胞(bao)靜(jing)置(zhi)24小時後(hou)，絕大多(duo)數細胞(bao)未(wei)存(cun)活，重(zhong)發；

　　（4）凍存(cun)的細胞(bao)復蘇後(hou)或存(cun)活的細胞(bao)靜(jing)置(zhi)4小時後(hou)並(bing)且未(wei)開(kai)封，出現(xian)汙染，重(zhong)發；

　　（5）視具體情(qing)況(kuang)而(er)定(ding)。

　　五(wu)、細胞(bao)出(chu)現(xian)問(wen)題，不予(yu)以重(zhong)發的情(qing)況(kuang)有哪些(xie)？

　　（1）客戶(hu)造成細胞(bao)汙染，不重(zhong)發；

　　（2）客戶(hu)不正確(que)操(cao)作致細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)不好，不重(zhong)發；

　　（3）細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)不好，未(wei)提供細胞(bao)培養前(qian)3天(tian)照(zhao)片的，不重(zhong)發；

　　（4）細胞(bao)培養時經其它(ta)處理的，不重(zhong)發；

　　（5）細胞(bao)收(shou)到2天(tian)內(nei)，未(wei)告知，不重(zhong)發；

　　（6）視具體情(qing)況(kuang)而(er)定(ding)。

　　六、售後(hou)服(fu)務政(zheng)策(ce)

　　Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品(pin)牌；部分(fen)產(chan)品(pin)現(xian)貨，超(chao)低(di)比價(jia)，另常(chang)備  Trizol  DMSO  lipo2000    lipo3000  SC-2004  SC-2005常備現(xian)貨 ；貨期短，價(jia)格(ge)優，售後(hou)齊全(quan)。

　　細胞(bao)汙染問(wen)題，請(qing)在收(shou)到產(chan)品48小時內(nei)，給我們(men)提出真實(shi)的實(shi)驗結果；細胞(bao)活(huo)性問(wen)題，請(qing)在收(shou)到產(chan)品7天(tian)內(nei)給我們(men)提出真實(shi)的實(shi)驗結果，我(wo)們(men)調(tiao)查核實(shi)後(hou)予免(mian)費調(tiao)換，不收(shou)取任(ren)何費用(yong)。

　　需要(yao)客戶(hu)提供肺(fei)癌(ai)細胞(bao)(淋巴結(jie)轉(zhuan)移(yi))細胞(bao)培養說明、細胞(bao)操(cao)作處理方(fang)法(fa)、細胞(bao)質量問(wen)題反(fan)饋(kui)表。

　　如用戶(hu)收到(dao)細胞(bao)8-30天(tian)之(zhi)內(nei)，因處理(li)不當(dang)造成細胞(bao)死(si)亡或(huo)汙染，我(wo)公司(si)將(jiang)優(you)惠價(jia)重(zhong)新(xin)提供壹株(zhu)原細胞(bao)

　　肺(fei)癌(ai)細胞(bao)(淋巴結(jie)轉(zhuan)移(yi))質量可靠，售後(hou)有保(bao)障

　　★我庫(ku)細胞(bao)近(jin)3000種(zhong)，來源(yuan)於(yu)美(mei)國(guo)ATCC,細胞(bao)都(dou)是(shi)經過嚴(yan)格(ge)質量控(kong)制。

　　凍存(cun)細胞(bao)時間為(wei)5-7個(ge)工(gong)作日(ri)，活細胞(bao)為(wei)7-15個(ge)工(gong)作日(ri)。

　　★由於(yu)細胞(bao)庫(ku)現(xian)有細胞(bao)類(lei)目(mu)多(duo)，為了(le)不出(chu)現(xian)混亂錯(cuo)誤，需(xu)要(yao)了(le)解(jie)肺(fei)癌(ai)細胞(bao)(淋巴結(jie)轉(zhuan)移(yi))相(xiang)關細胞(bao)價(jia)格(ge)及詳細資料(liao)請(qing)老(lao)師，對(dui)您(nin)造成的不便(bian)還(hai)請(qing)見諒(liang)！

（編(bian)輯(ji)：tanxi）