大(da)鼠腦(nao)靜脈(mai)血管內(nei)皮(pi)細(xi)胞_新品(pin)來(lai)了

　　細(xi)胞作(zuo)為生(sheng)命組(zu)成(cheng)的(de)zui小單元(yuan)，研(yan)究其(qi)相(xiang)關的(de)生物(wu)行為及(ji)其(qi)規(gui)律(lv)與(yu)本(ben)質，對(dui)於揭(jie)示生命的奧(ao)秘，探(tan)索疾(ji)病(bing)的(de)機(ji)理(li)與(yu)治(zhi)療(liao)手(shou)段(duan)，提(ti)高(gao)人(ren)類(lei)的生(sheng)存壽(shou)命與質(zhi)量(liang)，都(dou)有著(zhe)重(zhong)要的(de)意義(yi)。對細(xi)胞的研(yan)究是壹個(ge)復雜(za)的(de)工程(cheng)，細(xi)胞在(zai)人體(ti)內(nei)處(chu)於復雜(za)的(de)微環(huan)境之中(zhong)，包(bao)括(kuo)溫度、氧氣(qi)濃(nong)度、生物(wu)因子濃(nong)度、機械(xie)作(zuo)用、細(xi)胞間(jian)相(xiang)互(hu)作(zuo)用、細(xi)胞基質間(jian)相(xiang)互(hu)作(zuo)用等(deng)，同(tong)時(shi)，細(xi)胞體(ti)積微小、種(zhong)類(lei)多(duo)樣(yang)，在(zai)細(xi)胞水平(ping)進(jin)行細(xi)胞識別(bie)、代(dai)謝物(wu)檢(jian)測(ce)、內(nei)部(bu)組(zu)分(fen)分(fen)析、細(xi)胞結構(gou)與(yu)功(gong)能(neng)表征、細(xi)胞間(jian)相(xiang)互(hu)作(zuo)用分(fen)析等(deng)工作(zuo)也(ye)都(dou)有著(zhe)很大(da)的(de)難度。大鼠(shu)腦靜脈(mai)血管內(nei)皮(pi)細(xi)胞，上(shang)海(hai)乾(qian)思生(sheng)物(wu)公司(si)細(xi)胞近3000種(zhong)，來(lai)源於美(mei)國ATCC,細(xi)胞都(dou)是經(jing)過嚴格(ge)質量控制，在(zai)中國大陸(lu)努力搭建正牌(pai)細(xi)胞與國內(nei)廣(guang)大(da)科(ke)研(yan)人員(yuan)之間(jian)的溝(gou)通橋梁。為您(nin)提(ti)供大(da)鼠(shu)腦靜(jing)脈(mai)血管內(nei)皮(pi)細(xi)胞外，還有更(geng)多(duo)相(xiang)關實(shi)驗產品(pin)，標(biao)準品(pin)，細(xi)胞株和實(shi)驗技(ji)術服務(wu)等(deng)等(deng)前(qian)期(qi)後續服務(wu)。

　　1. 大(da)鼠(shu)腦(nao)靜脈(mai)血管內(nei)皮(pi)細(xi)胞液體(ti)培養(yang)基的保(bao)存是冷藏好(hao)？還(hai)是冷凍(dong)好(hao)？

　　要(yao)冷藏！！因為液體(ti)培養(yang)基經冷凍(dong)後(hou)再(zai)經溶(rong)化(hua)時，其溶(rong)液的pH值(zhi)會(hui)發(fa)生改變(bian)，溶液往往(wang)變(bian)堿(jian)，某些成(cheng)分(fen)溶解(jie)也會受到影響對(dui)細(xi)胞生長不利。故液體(ti)培養(yang)基壹定(ding)要(yao)存放在(zai)冷藏箱(xiang)中(zhong)，通(tong)常液體(ti)培養(yang)基在(zai)冷藏條(tiao)件(jian)下可存(cun)放6個(ge)月(yue) ~ 壹年。

　　2.大(da)鼠(shu)腦(nao)靜脈(mai)血管內(nei)皮(pi)細(xi)胞 液體(ti)培養(yang)基中谷(gu)氨(an)酰(xian)胺的作(zuo)用，及(ji)使(shi)用方法。

　　幾乎所有的(de)細(xi)胞對谷(gu)氨(an)酰(xian)胺有較(jiao)高(gao)的要(yao)求，細(xi)胞需要谷(gu)氨(an)酰(xian)胺合(he)成(cheng)蛋(dan)白(bai)質，在(zai)缺少(shao)谷(gu)氨(an)酰(xian)胺時，細(xi)胞生長不良而死(si)亡。所(suo)以(yi)，各(ge)種(zhong)培養(yang)液中都(dou)含(han)有較(jiao)大(da)量的(de)谷(gu)氨(an)酰(xian)胺。谷(gu)氨(an)酰(xian)胺在(zai)溶液中很(hen)不穩定(ding)，應置(zhi)-20 ?C冰凍(dong)保(bao)存，用前(qian)加入培養(yang)基中。加(jia)有谷(gu)氨(an)酰(xian)胺的液體(ti)培養(yang)基4 ?C 冰箱(xiang)儲(chu)存兩(liang)周以(yi)上(shang)時(shi)，應重(zhong)新加(jia)入原來(lai)量的(de)谷(gu)氨(an)酰(xian)胺。基礎醫(yi)學(xue)細(xi)胞中心在(zai)其服(fu)務項目中配制(zhi)分(fen)裝(zhuang)了高(gao)濃度(du)（100倍）的谷(gu)氨(an)酰(xian)胺溶液（1ml/支(zhi)）。每(mei)支(zhi)1ml的(de)谷(gu)氨(an)酰(xian)胺加到99ml*培養(yang)基中，其(qi)終(zhong)濃度(du)為2mM/ml培養(yang)基。包裝(zhuang)為粉(fen)紅(hong)色，-24?C保存(cun)。

　　3. 大(da)鼠(shu)腦(nao)靜脈(mai)血管內(nei)皮(pi)細(xi)胞 培養(yang)用液pH對細(xi)胞生長的影響

　　由(you)於，大(da)多(duo)數(shu)細(xi)胞適宜pH為7.2~7.4，偏(pian)離此範圍(wei)對(dui)細(xi)胞將產生有害(hai)的(de)影響。各(ge)種(zhong)細(xi)胞對pH的要求也不(bu)*相(xiang)同(tong)，原(yuan)代(dai)培養(yang)細(xi)胞壹般(ban)對(dui)pH變(bian)動耐受差，無(wu)限細(xi)胞系耐受力強。

　　但總體(ti)來(lai)說，細(xi)胞耐酸性比(bi)耐堿(jian)性強壹些，偏酸(suan)環境中更(geng)利(li)於細(xi)胞生長。因此，我們(men)在(zai)配制(zhi)培養(yang)用液時，可把液體(ti)的(de)pH稍微調(tiao)得偏酸壹些。液體(ti)在(zai)經過(guo)0.10um或0.22um濾膜(mo)過濾時(shi)，溶液的pH還(hai)會向(xiang)上(shang)浮(fu)動0.2左右(you)。

　　4.大(da)鼠(shu)腦(nao)靜脈(mai)血管內(nei)皮(pi)細(xi)胞 細(xi)胞傳(chuan)代(dai)消化(hua)時所用胰酶濃度(du)越(yue)高越(yue)好(hao)嗎(ma)？

　　不(bu)見得！因為胰(yi)蛋(dan)白(bai)酶溶液的消化(hua)能(neng)力是和溶(rong)液的pH、溫(wen)度、胰(yi)酶濃度及(ji)溶(rong)液中是否(fou)含(han)有Ca++, Mg++離子和血清等(deng)因素(su)有關(guan)。通(tong)常情(qing)況下(xia)，pH 8.0 , 溫(wen)度(du) 37 oC 其作(zuo)用能(neng)力zui強。另(ling)外，鈣、鎂離子及(ji)血清均能(neng)大大(da)降(jiang)低其消化(hua)能(neng)力。我們(men)每(mei)次(ci)進(jin)行傳(chuan)代(dai)消化(hua)前(qian)，壹定(ding)要(yao)用D-Hanks液或PBS液反復沖洗(xi)細(xi)胞培養(yang)瓶，以(yi)便(bian)於將(jiang)含(han)血清的培養(yang)基沖洗(xi)幹凈(jing)，這(zhe)樣(yang)就(jiu)能(neng)大大(da)提(ti)高(gao)消化(hua)液的消化(hua)能(neng)力。本(ben)中心通(tong)常使(shi)用的消化(hua)液濃度(du)為：

　　（1）０.０５％胰(yi)蛋(dan)白(bai)酶＋０.０２％ＥＤＴＡ；

　　（2）０.２５％胰(yi)蛋(dan)白(bai)酶＋０.０３％ＥＤＴＡ。

　　（3）0.25% 胰(yi)蛋(dan)白(bai)酶

　　溶(rong)液ｐＨ８.０～９.０；使(shi)用Ｄ－Ｈａｎｋ液配制(zhi)。

　　多(duo)數(shu)細(xi)胞傳(chuan)代(dai)消化(hua)可使(shi)用０.０５％胰蛋(dan)白(bai)酶＋０.０２％ＥＤＴＡ這(zhe)種(zhong)消化(hua)液。

　　購買(mai)上(shang)海(hai)乾(qian)思生(sheng)物(wu)細(xi)胞註意事項（乾(qian)思生(sheng)物(wu)）發(fa)布

　　壹、客(ke)戶收到細(xi)胞先不開蓋(gai)，放(fang)在(zai)培養(yang)箱(xiang)靜(jing)置(zhi)若幹小時後(hou)（看細(xi)胞密度而定(ding)）在(zai)倒(dao)置(zhi)顯(xian)微鏡下觀(guan)察(cha)細(xi)胞生長情(qing)況，並(bing)對細(xi)胞進(jin)行不同(tong)倍數拍照(zhao)（建議受收(shou)細(xi)胞時的培養(yang)基拍壹張(zhang)照(zhao)片，觀察(cha)培養(yang)基的顏(yan)色和是否(fou)有漏液情(qing)況，顯(xian)微鏡下拍細(xi)胞100X，200X各(ge)壹張(zhang)），排(pai)除細(xi)胞本(ben)身汙(wu)染的情(qing)況；

　　收(shou)到細(xi)胞未開封(feng)，出(chu)現(xian)汙(wu)染狀況我們(men)負(fu)責(ze)免費(fei)發(fa)送(song)壹株細(xi)胞。

　　二(er)、如為貼(tie)壁(bi)細(xi)胞，請在(zai)顯(xian)微鏡下觀(guan)察(cha)細(xi)胞密度：

　　1. 未(wei)超過(guo)80%匯(hui)合(he)度時(shi)，用75%酒精(jing)（建議配(pei)置(zhi)75%酒精(jing)的(de)水也(ye)是滅(mie)菌(jun)超純(chun)水，噴(pen)灑(sa)整個(ge)瓶消毒後(hou)放(fang)到超菌(jun)臺內(nei)，嚴(yan)格(ge)無(wu)菌(jun)操(cao)作(zuo)；然後打(da)開蓋(gai)子，先把培養(yang)基吸出(chu)10ml左右(you)，放(fang)在(zai)離心管裏，然後瓶(ping)口(kou)過(guo)火（嚴禁(jin)直(zhi)接傾倒(dao)），這(zhe)樣(yang)可以(yi)保證(zheng)不(bu)汙染，再(zai)用10ml的移液管，將(jiang)剩(sheng)余的(de)培液全(quan)部(bu)吸出(chu)，放(fang)於離心管中(zhong)，培養(yang)瓶中只(zhi)剩(sheng)余10ml左右(you)培液就可以(yi)了。培養(yang)16hr(時間(jian)根(gen)據(ju)細(xi)胞生長情(qing)況調(tiao)整(zheng)）之後(hou)，傳(chuan)代(dai)或者凍(dong)存(cun)。

　　2. 超過(guo)80%匯(hui)合(he)度時(shi)，請按細(xi)胞培養(yang)條(tiao)件(jian)傳(chuan)代(dai)培養(yang)。具(ju)體(ti)步(bu)驟如下(xia)：

　　1) 棄去(qu)培養(yang)液，用3ml PBS（不含(han)鈣，鎂離子）洗(xi)1-2次(ci)；

　　2) 加(jia)1ml消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於T25培養(yang)瓶中，倒(dao)轉放(fang)於37度(du)培養(yang)箱(xiang)1-3分(fen)鐘預(yu)熱，然後又(you)將(jiang)培養(yang)瓶倒(dao)轉大(da)約30秒(miao)後，在(zai)倒(dao)置(zhi)顯(xian)微鏡下觀(guan)察(cha)細(xi)胞消化(hua)情(qing)況，若(ruo)細(xi)胞大部(bu)分(fen)變(bian)圓分(fen)散(san)，輕(qing)敲(qiao)幾下培養(yang)培養(yang)瓶，細(xi)胞隨(sui)即(ji)脫落下來(lai)；

　　3) 加(jia)入6-8ml*培養(yang)基，吸出(chu)，分(fen)到新的(de)培養(yang)瓶中，按要求分(fen)瓶。

　　三(san)、如(ru)為懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞，吸出(chu)培養(yang)液，1000轉/分(fen)鐘離心5分(fen)鐘，吸(xi)出(chu)上(shang)清，管底(di)細(xi)胞用新鮮培養(yang)基懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞後移回(hui)培養(yang)瓶。

　　註意：換(huan)液時壹半用我們(men)的培養(yang)基，壹半用妳們的，以(yi)免細(xi)胞不適應而造成(cheng)生(sheng)長(chang)不好(hao)。

　　四、細(xi)胞出(chu)現(xian)問(wen)題，可重(zhong)發(fa)的情(qing)況有哪些？判(pan)定(ding)標(biao)準是什(shen)麽(me)？

　　（1）細(xi)胞運輸途(tu)中遭遇(yu)的(de)各(ge)種(zhong)問題，細(xi)胞丟失、破損、漏液等(deng)，重(zhong)發(fa)；

　　（2）凍(dong)存(cun)的細(xi)胞復蘇後，絕(jue)大多(duo)數(shu)細(xi)胞未存活，重(zhong)發(fa)；

　　（3）存(cun)活的(de)細(xi)胞靜置(zhi)24小時後(hou)，絕大多(duo)數(shu)細(xi)胞未存活，重(zhong)發(fa)；

　　（4）凍(dong)存(cun)的細(xi)胞復蘇後或(huo)存活的(de)細(xi)胞靜置(zhi)4小時後(hou)並(bing)且未(wei)開封(feng)，出(chu)現(xian)汙(wu)染，重(zhong)發(fa)；

　　（5）視(shi)具(ju)體(ti)情(qing)況而定(ding)。

　　五(wu)、細(xi)胞出(chu)現(xian)問(wen)題，不(bu)予以(yi)重(zhong)發(fa)的情(qing)況有哪些？

　　（1）客(ke)戶造成(cheng)細(xi)胞汙染，不重(zhong)發(fa)；

　　（2）客(ke)戶不正確操作(zuo)致(zhi)細(xi)胞狀態不(bu)好(hao)，不(bu)重(zhong)發(fa)；

　　（3）細(xi)胞狀態不(bu)好(hao)，未(wei)提(ti)供細(xi)胞培養(yang)前(qian)3天照片的，不(bu)重(zhong)發(fa)；

　　（4）細(xi)胞培養(yang)時經其(qi)它(ta)處(chu)理(li)的(de)，不重(zhong)發(fa)；

　　（5）細(xi)胞收到2天內(nei)，未(wei)告(gao)知(zhi)，不(bu)重(zhong)發(fa)；

　　（6）視(shi)具(ju)體(ti)情(qing)況而定(ding)。

　　六、售後服(fu)務政(zheng)策(ce)

　　Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等(deng)品(pin)牌(pai)；部(bu)分(fen)產品(pin)現(xian)貨(huo)，超低比(bi)價，另常備  Trizol  DMSO  lipo2000    lipo3000  SC-2004  SC-2005常備現(xian)貨(huo) ；貨(huo)期(qi)短(duan)，價格(ge)優，售後齊全(quan)。

　　細(xi)胞汙染問題，請(qing)在(zai)收到產品(pin)48小時內(nei)，給(gei)我們(men)提出(chu)真(zhen)實(shi)的(de)實(shi)驗結(jie)果(guo)；細(xi)胞活性問題，請(qing)在(zai)收到產品(pin)7天(tian)內(nei)給(gei)我們(men)提出(chu)真(zhen)實(shi)的(de)實(shi)驗結(jie)果(guo)，我們(men)調(tiao)查(zha)核實(shi)後(hou)予免費(fei)調(tiao)換(huan)，不收(shou)取(qu)任(ren)何費(fei)用。

　　需(xu)要(yao)客(ke)戶提供大鼠(shu)腦靜(jing)脈(mai)血管內(nei)皮(pi)細(xi)胞細(xi)胞培養(yang)說明(ming)、細(xi)胞操作(zuo)處(chu)理(li)方(fang)法、細(xi)胞質量問題反饋表。

　　如(ru)用戶收到細(xi)胞8-30天之內(nei)，因處理(li)不(bu)當造成(cheng)細(xi)胞死(si)亡或(huo)汙(wu)染，我公司(si)將優惠(hui)價(jia)重(zhong)新提(ti)供(gong)壹株原細(xi)胞

　　大(da)鼠(shu)腦(nao)靜脈(mai)血管內(nei)皮(pi)細(xi)胞質量可靠(kao)，售後有保(bao)障(zhang)

　　★我庫細(xi)胞近3000種(zhong)，來(lai)源於美(mei)國ATCC,細(xi)胞都(dou)是經(jing)過嚴格(ge)質量控制。

　　凍(dong)存(cun)細(xi)胞時間(jian)為5-7個(ge)工作(zuo)日(ri)，活細(xi)胞為7-15個(ge)工作(zuo)日(ri)。

　　★由(you)於細(xi)胞庫現(xian)有細(xi)胞類(lei)目多(duo)，為了(le)不(bu)出(chu)現(xian)混(hun)亂錯誤(wu)，需要了(le)解(jie)大鼠(shu)腦靜脈(mai)血管內(nei)皮(pi)細(xi)胞相(xiang)關細(xi)胞價格(ge)及(ji)詳(xiang)細(xi)資料(liao)請(qing)老師，對(dui)您造成(cheng)的(de)不(bu)便(bian)還(hai)請(qing)見諒(liang)！

（編(bian)輯(ji)：tanxi）