產(chan)品(pin)系(xi)統PRODUCT CENTER
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首(shou)頁(ye)-產品(pin)系(xi)統--合(he)作(zuo)品(pin)牌(pai)-Encapsula NanoSciences LLC
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PRODUCT CLASSIFICATION技(ji)術文章
TECHNICAL ARTICLES
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Encapsula NanoSciences LLC
上(shang)海乾(qian)思生(sheng)物Encapsula NanoSciences LLC品(pin)牌(pai)代理(li)專(zhuan)業經(jing)營(ying)進(jin)口胎(tai)牛血清(qing)、細(xi)胞(bao)因(yin)子、ELISA試(shi)劑盒、細(xi)胞(bao)、抗(kang)體(ti)、生(sheng)物試劑、耗(hao)材、培養(yang)基、壹抗(kang)、二抗(kang)、其(qi)產(chan)品(pin)吸(xi)附均勻，吸(xi)附性好(hao)，空(kong)白(bai)值低，孔(kong)底(di)透明(ming)度(du)高，代做(zuo)ELISA實(shi)驗(yan)等。完善的(de)庫存及供(gong)應(ying)體系(xi)以及高效穩(wen)定的(de)純(chun)化技(ji)術，保(bao)證(zheng)產(chan)品(pin)均能現(xian)貨供(gong)應(ying)和(he)產(chan)品(pin)質(zhi)量(liang)的(de)穩定性。
怎(zen)樣(yang)查(zha)到壹個(ge)特定細(xi)胞(bao)株的(de)相(xiang)關知(zhi)識和(he)培(pei)養(yang)條(tiao)件？
ATCC（American Type Culture Collection）收(shou)集了(le)絕(jue)大多(duo)數細(xi)胞(bao)的(de)詳細(xi)資(zi)料。打開(kai)ATCC網頁(ye)的(de)Cells and hybridomas鏈(lian)接(jie)，輸入細(xi)胞(bao)名(ming)稱就可以搜索ATCC的(de)細(xi)胞(bao)數據庫。數據庫中(zhong)有每(mei)壹種細(xi)胞(bao)的(de)詳細(xi)描述(shu)，包(bao)括細(xi)胞(bao)的(de)來源(yuan)，培養和(he)凍(dong)存條(tiao)件，以及相(xiang)關文獻等資(zi)料。
如何(he)選(xuan)用特殊(shu)細(xi)胞(bao)系(xi)培養基？
培養(yang)某類型(xing)細(xi)胞(bao)沒(mei)有固定的(de)培養(yang)條(tiao)件。MEM中(zhong)培養(yang)的(de)細(xi)胞(bao)，很可(ke)能在(zai)DMEM或M199中(zhong)同(tong)樣(yang)容(rong)易(yi)生(sheng)長(chang)。總(zong)之，*MEM、DMEM做(zuo)貼壁(bi)細(xi)胞(bao)培(pei)養；RPMI1640做(zuo)懸浮細(xi)胞(bao)培(pei)養；各種目(mu)的(de)無血清(qing)培(pei)養(yang)*AIMV培養(yang)基（SFM）。
測序(xu)實(shi)驗(yan)流(liu)程(cheng)：
1 收集(ji)樣(yang)品(pin)
2 相(xiang)關試(shi)劑 總(zong)RNA提取試(shi)劑TREzol Reagent (RNA提取試(shi)劑), M-MLV(cDNA逆轉錄酶(mei)), RNA 純(chun)化試(shi)劑, RealqPCR MasterMix (熒(ying)光定量(liang)PCR預(yu)混(hun)試(shi)劑)。
3 實(shi)驗(yan)儀(yi)器 熒(ying)光定量(liang)PCR儀(yi); PCR儀(yi);低溫(wen)離心機(ji)。
4 總(zong)RNA提取
5 cDNA合(he)成(cheng) 在(zai)0.5ml的(de)離心管中(zhong)加入1µl模板(ban)總(zong)RNA(1µg/µl); 2µl隨機(ji)引(yin)物(T18, 10pmol/ul);2µl 10mM dNTP mix;加水至15µl體系。混(hun)勻後70℃變(bian)性RNA 5分(fen)鐘，冰上(shang)速(su)冷1分(fen)鐘，離心將溶液收(shou)集至(zhi)管底加入6µl 5×PCR buffer;1µl RNaseout;1µl M-MLV RT;加水至30µl體系。PCR儀(yi)中(zhong)反(fan)應(ying)條(tiao)件設置(zhi) 37℃延伸(shen)60min，70℃保(bao)溫15min終止反(fan)應(ying)。合成(cheng)好(hao)的(de)cDNA置(zhi)於 -20 ℃保存備用(yong)。
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