人肥大細胞白血病細胞 細胞株

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人肥(fei)大細胞白血病細胞

人肥大細胞白血病細胞|細胞株

人肥大細胞白血病細胞 【培養指南(nan)】

對(dui)於貼(tie)壁(bi)細胞，傳代(dai)可(ke)參(can)考以(yi)下方(fang)法：

1. 棄去培養上清，用(yong)不(bu)含鈣(gai)、鎂(mei)離子(zi)的PBS潤洗(xi)細胞1-2次。

2. 加(jia)2ml消(xiao)化(hua)液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)於培養瓶中，置於37℃培養箱中消(xiao)化(hua)1-2分(fen)鐘，然(ran)後在(zai)顯微(wei)鏡下觀(guan)察Ⅱ型(xing)肺泡上皮(pi)細胞|細胞消(xiao)化(hua)情況，若細胞大部(bu)分(fen)變圓並(bing)脫(tuo)落(luo)，迅(xun)速(su)拿回操(cao)作(zuo)臺(tai)，輕敲(qiao)幾下(xia)培養瓶後加(jia)少量培養基終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)。

3. 按(an)6-8ml/瓶補加(jia)培養基，輕輕打勻(yun)後吸(xi)出，在(zai)1000RPM條(tiao)件下離心4分(fen)鐘，棄去上清液(ye)，補加(jia)1-2mL培養液後吹(chui)勻(yun)。

4. 將細胞懸液按(an)1：2到1：5的比例(li)分(fen)到新(xin)的含8ml培養基的新(xin)皿中或(huo)者瓶中。

對(dui)於懸(xuan)浮細胞，傳代(dai)可(ke)參(can)考以(yi)下方(fang)法：

方法壹：收(shou)集(ji)細胞，1000RPM條件下離心4分(fen)鐘，棄去上清液(ye)，補加(jia)1-2mL培養液後吹(chui)勻(yun)，將細胞懸液按(an)1：2到1：5的比例(li)分(fen)到新(xin)的含8ml培養基的新(xin)皿中或(huo)者瓶中。

方法二(er)：可(ke)選(xuan)擇(ze)半數換(huan)液(ye)方式(shi)，棄去半數培養基後，將剩余細胞懸起，將(jiang)細胞懸液按(an)1：2到1：3的比例(li)分(fen)到新(xin)的含8ml培養基的新(xin)皿中或(huo)者瓶中。

人肥大細胞白血病細胞 【細胞凍存】

待細胞生長狀態(tai)良好時(shi)，可(ke)進行(xing)293/HEK-293細胞|細胞凍存。貼壁(bi)細胞凍存時(shi)，棄去培養基後加(jia)入少量胰(yi)酶(mei)，細胞變圓脫(tuo)落(luo)後，加(jia)入約1ml含血清的培養基後加(jia)入凍存管(guan)中，再添加(jia)10%DMSO後進行(xing)凍存。懸浮細胞凍存時(shi)，應將(jiang)細胞收(shou)集(ji)，1000RPM條(tiao)件下離心4分(fen)鐘，少(shao)量保(bao)存上清液(ye)(防(fang)止(zhi)細胞吸(xi)走)，加(jia)入部(bu)分(fen)新(xin)鮮培養基，加(jia)入到凍存管(guan)中，在(zai)凍存管(guan)中加(jia)入10%DMSO後進行(xing)凍存。

人肥大細胞白血病細胞 【復蘇(su)的原則(ze)】

快速(su)融化(hua)：必須(xu)將凍存在(zai)-196℃液(ye)氮中的細胞快速(su)融化(hua)至37℃，使人肥(fei)大細胞白血病細胞|細胞外凍存時(shi)的冰(bing)晶迅(xun)速(su)融化(hua)，避免(mian)冰(bing)晶緩(huan)慢(man)融(rong)化(hua)時(shi)進入細胞形成再結晶，對(dui)細胞造成損害(hai)。

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人(ren)肥(fei)大細胞白血病細胞 【註(zhu)意事(shi)項】

乾(qian)思生物實驗(yan)室(shi)專(zhuan)業(ye)人士(shi)提(ti)醒廣(guang)大科(ke)研實驗(yan)者(zhe)，購買人肥大細胞白血病細胞培養，註(zhu)意事(shi)項：

1. 收(shou)到細胞後，若發現幹冰(bing)已揮(hui)發幹凈、凍存管(guan)瓶蓋(gai)脫(tuo)落(luo)、破(po)損及細胞有汙(wu)染(ran)，請立(li)即與(yu)我(wo)們。

2. 所(suo)有動(dong)物細胞均視為(wei)有潛(qian)在(zai)的生物危害性，必須(xu)在(zai)二(er)級生物安全臺(tai)內操(cao)作(zuo)，並(bing)請註(zhu)意防(fang)護，所(suo)有廢(fei)液(ye)及接(jie)觸(chu)過此細胞的器皿(min)需(xu)要(yao)滅菌後方能(neng)丟棄。

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小徐(xu)20180323