上海(hai)乾(qian)思生(sheng)物Quidel Corporation品牌(pai)代(dai)理(li)專(zhuan)業(ye)經(jing)營進(jin)口(kou)胎牛(niu)血(xue)清、細(xi)胞(bao)因子、ELISA試(shi)劑(ji)盒、細(xi)胞(bao)、抗體、生物試(shi)劑(ji)、耗(hao)材、培養(yang)基(ji)、壹(yi)抗(kang)、二抗、其(qi)產(chan)品吸(xi)附(fu)均(jun)勻，吸(xi)附(fu)性好(hao)，空(kong)白值(zhi)低(di)，孔(kong)底(di)透(tou)明度高(gao)，代做ELISA實驗等(deng)。完善(shan)的(de)庫存及供應(ying)體系以(yi)及高(gao)效穩定的(de)純化(hua)技(ji)術，保證產(chan)品均(jun)能現(xian)貨(huo)供應(ying)和產(chan)品質量(liang)的(de)穩定性。

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Quidel Corporation

上海(hai)乾(qian)思生(sheng)物Quidel Corporation品牌(pai)代(dai)理(li)專(zhuan)業(ye)經(jing)營進(jin)口(kou)胎牛(niu)血(xue)清、細(xi)胞(bao)因子、ELISA試(shi)劑(ji)盒、細(xi)胞(bao)、抗體、生物試(shi)劑(ji)、耗(hao)材、培養(yang)基(ji)、壹(yi)抗(kang)、二抗、其(qi)產(chan)品吸(xi)附(fu)均(jun)勻，吸(xi)附(fu)性好(hao)，空(kong)白值(zhi)低(di)，孔(kong)底(di)透(tou)明度高(gao)，代做ELISA實驗等(deng)。完善(shan)的(de)庫存及供應(ying)體系以(yi)及高(gao)效穩定的(de)純化(hua)技(ji)術，保證產(chan)品均(jun)能現(xian)貨(huo)供應(ying)和產(chan)品質量(liang)的(de)穩定性。

怎樣(yang)查(zha)到壹(yi)個(ge)特定細(xi)胞(bao)株的(de)相(xiang)關(guan)知(zhi)識和培養(yang)條(tiao)件(jian)？
ATCC（American Type Culture Collection）收集了(le)絕大(da)多數細(xi)胞(bao)的(de)詳細(xi)資料。打(da)開(kai)ATCC網(wang)頁(ye)的(de)Cells and hybridomas鏈接(jie)，輸入細(xi)胞(bao)名稱(cheng)就(jiu)可(ke)以(yi)搜(sou)索ATCC的(de)細(xi)胞(bao)數據庫。數據庫中有每(mei)壹(yi)種細(xi)胞(bao)的(de)詳細(xi)描(miao)述(shu)，包括細(xi)胞(bao)的(de)來源(yuan)，培養(yang)和凍存(cun)條(tiao)件(jian)，以及相(xiang)關(guan)文(wen)獻等(deng)資(zi)料。
如何選用特殊細(xi)胞(bao)系培養(yang)基(ji)？
培養(yang)某類型細(xi)胞(bao)沒有固定的(de)培養(yang)條(tiao)件(jian)。MEM中培養(yang)的(de)細(xi)胞(bao)，很(hen)可能在DMEM或M199中同樣容(rong)易生(sheng)長。總之(zhi)，*MEM、DMEM做貼壁細(xi)胞(bao)培養(yang)；RPMI1640做懸浮(fu)細(xi)胞(bao)培養(yang)；各種目的(de)無(wu)血(xue)清培養(yang)*AIMV培養(yang)基(ji)（SFM）。

測(ce)序實驗流(liu)程：
1 收集樣品
2 相(xiang)關(guan)試(shi)劑(ji) 總RNA提取試(shi)劑(ji)TREzol Reagent (RNA提取試(shi)劑(ji)), M-MLV(cDNA逆轉(zhuan)錄酶), RNA 純化(hua)試(shi)劑(ji), RealqPCR MasterMix (熒(ying)光定量(liang)PCR預混(hun)試(shi)劑(ji))。
3 實驗儀器(qi) 熒(ying)光定量(liang)PCR儀; PCR儀;低(di)溫(wen)離(li)心機(ji)。
4 總RNA提取
5 cDNA合成在0.5ml的(de)離心管中加(jia)入1µl模板(ban)總RNA(1µg/µl); 2µl隨(sui)機(ji)引(yin)物(T18, 10pmol/ul);2µl 10mM dNTP mix;加水(shui)至(zhi)15µl體系。混(hun)勻後(hou)70℃變(bian)性RNA 5分(fen)鐘，冰(bing)上速冷1分(fen)鐘，離心(xin)將溶(rong)液(ye)收集至(zhi)管底加入6µl 5×PCR buffer;1µl RNaseout;1µl M-MLV RT;加水(shui)至(zhi)30µl體系。PCR儀中反(fan)應(ying)條(tiao)件(jian)設(she)置(zhi) 37℃延伸60min，70℃保溫(wen)15min終止反(fan)應(ying)。合成(cheng)好(hao)的(de)cDNA置於 -20 ℃保存備用。

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