產(chan)品(pin)系統(tong)PRODUCT CENTER
在(zai)發展中求生(sheng)存，不(bu)斷(duan)完(wan)善，以(yi)良(liang)好信(xin)譽和(he)科(ke)學的管理(li)促(cu)進企(qi)業(ye)迅(xun)速(su)發展
首(shou)頁-產(chan)品系統(tong)--合(he)作(zuo)品(pin)牌-LIFECORE BIOMEDICAL
廠家實力
Manufacturer Strength
有(you)效(xiao)保(bao)修
Valid Warranty
質(zhi)量保障(zhang)
Quality Assurance產(chan)品(pin)分(fen)類(lei)
PRODUCT CLASSIFICATION技(ji)術(shu)文(wen)章(zhang)
TECHNICAL ARTICLES
詳(xiang)細(xi)介紹(shao)
LIFECORE BIOMEDICAL
上海(hai)乾(qian)思(si)生(sheng)物LIFECORE BIOMEDICAL品(pin)牌代理(li)專(zhuan)業(ye)經(jing)營(ying)進口(kou)胎(tai)牛血(xue)清、細(xi)胞因(yin)子、ELISA試(shi)劑(ji)盒、細(xi)胞、抗(kang)體、生(sheng)物試(shi)劑(ji)、耗材(cai)、培(pei)養基(ji)、壹(yi)抗(kang)、二抗(kang)、其(qi)產品(pin)吸附均勻(yun)，吸附性好，空(kong)白值低，孔(kong)底(di)透明度高(gao)，代做(zuo)ELISA實驗等(deng)。完(wan)善的(de)庫(ku)存及(ji)供(gong)應(ying)體系以(yi)及(ji)高(gao)效(xiao)穩(wen)定(ding)的(de)純化技術(shu)，保證(zheng)產(chan)品(pin)均能(neng)現貨(huo)供(gong)應(ying)和(he)產(chan)品質量的穩(wen)定(ding)性。
怎(zen)樣(yang)查到(dao)壹(yi)個特定(ding)細(xi)胞株(zhu)的(de)相(xiang)關知識(shi)和(he)培(pei)養條(tiao)件？
ATCC（American Type Culture Collection）收集了(le)絕大(da)多數(shu)細(xi)胞的(de)詳(xiang)細(xi)資料(liao)。打(da)開ATCC網頁的(de)Cells and hybridomas鏈(lian)接，輸入(ru)細(xi)胞名稱(cheng)就(jiu)可以搜(sou)索ATCC的(de)細(xi)胞數(shu)據(ju)庫。數(shu)據(ju)庫中有(you)每(mei)壹(yi)種細(xi)胞的(de)詳(xiang)細(xi)描述，包括(kuo)細(xi)胞的(de)來(lai)源，培(pei)養和(he)凍(dong)存條件，以及(ji)相(xiang)關文(wen)獻等(deng)資(zi)料(liao)。
如(ru)何(he)選用(yong)特(te)殊(shu)細(xi)胞系培(pei)養基(ji)？
培(pei)養某(mou)類(lei)型細(xi)胞沒(mei)有(you)固定(ding)的(de)培(pei)養條(tiao)件。MEM中培(pei)養的(de)細(xi)胞，很可(ke)能在(zai)DMEM或(huo)M199中同(tong)樣(yang)容易生(sheng)長(chang)。總(zong)之(zhi)，*MEM、DMEM做(zuo)貼(tie)壁細(xi)胞培(pei)養；RPMI1640做(zuo)懸(xuan)浮細(xi)胞培(pei)養；各(ge)種(zhong)目(mu)的無血(xue)清培(pei)養*AIMV培(pei)養基(ji)（SFM）。
測序實驗流(liu)程(cheng)：
1 收(shou)集(ji)樣(yang)品
2 相(xiang)關試(shi)劑(ji) 總(zong)RNA提(ti)取試(shi)劑(ji)TREzol Reagent (RNA提取(qu)試(shi)劑(ji)), M-MLV(cDNA逆(ni)轉錄(lu)酶), RNA 純化試(shi)劑(ji), RealqPCR MasterMix (熒光定(ding)量PCR預混試(shi)劑(ji))。
3 實驗儀(yi)器(qi) 熒光定(ding)量PCR儀; PCR儀(yi);低溫(wen)離(li)心機。
4 總(zong)RNA提(ti)取
5 cDNA合成 在(zai)0.5ml的離心管中加(jia)入(ru)1µl模板總(zong)RNA(1µg/µl); 2µl隨(sui)機引(yin)物(T18, 10pmol/ul);2µl 10mM dNTP mix;加(jia)水至15µl體系。混(hun)勻(yun)後(hou)70℃變(bian)性RNA 5分鐘(zhong)，冰上速(su)冷(leng)1分鐘(zhong)，離心將溶液收(shou)集(ji)至管底加(jia)入(ru)6µl 5×PCR buffer;1µl RNaseout;1µl M-MLV RT;加(jia)水至30µl體系。PCR儀(yi)中反(fan)應(ying)條件設置 37℃延伸(shen)60min，70℃保溫(wen)15min終(zhong)止(zhi)反(fan)應(ying)。合成好(hao)的cDNA置(zhi)於 -20 ℃保存備用(yong)。
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