人非(fei)小細胞肺(fei)腺癌(ai)細胞 細胞株(zhu)

上海乾(qian)思(si)生物(wu)——人非小細胞肺(fei)腺癌(ai)細胞|細胞系(xi)|細胞株(zhu)|腫瘤(liu)細胞，公司不(bu)僅(jin)有(you)大量(liang)的細胞，還(hai)提供(gong)人非(fei)小細胞肺(fei)腺癌(ai)細胞的(de)全程(cheng)後期(qi)服務(wu)，可(ke)以(yi)向(xiang)專業(ye)人(ren)士(shi)咨詢(xun)詳細的人(ren)非小細胞肺(fei)腺癌(ai)細胞|細胞培(pei)養(yang)條(tiao)件，凍(dong)存方(fang)法(fa)，及相關培(pei)養(yang)技術。

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人非(fei)小細胞肺(fei)腺癌(ai)細胞 【培(pei)養(yang)指南】

對於貼(tie)壁細胞，傳代(dai)可參考以(yi)下(xia)方(fang)法(fa)：

1. 棄去培(pei)養(yang)上清，用不(bu)含鈣、鎂離子(zi)的(de)PBS潤(run)洗(xi)細胞1-2次(ci)。

2. 加(jia)2ml消(xiao)化(hua)液(ye)(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)於(yu)培(pei)養(yang)瓶中，置(zhi)於37℃培(pei)養(yang)箱中消(xiao)化(hua)1-2分鐘，然(ran)後在(zai)顯微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察(cha)Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消(xiao)化(hua)情(qing)況，若細胞大部(bu)分變圓(yuan)並(bing)脫落(luo)，迅(xun)速拿(na)回(hui)操作臺，輕敲幾下培(pei)養(yang)瓶後加(jia)少(shao)量(liang)培(pei)養(yang)基(ji)終(zhong)止消(xiao)化(hua)。

3. 按(an)6-8ml/瓶補加(jia)培(pei)養(yang)基(ji)，輕輕打勻(yun)後吸(xi)出，在(zai)1000RPM條(tiao)件下(xia)離心(xin)4分鐘，棄去上清液(ye)，補加(jia)1-2mL培(pei)養(yang)液(ye)後吹(chui)勻(yun)。

4. 將細胞懸(xuan)液(ye)按(an)1：2到1：5的(de)比例分到新的含(han)8ml培(pei)養(yang)基(ji)的(de)新皿中或者瓶(ping)中。

對於懸(xuan)浮(fu)細胞，傳代(dai)可參考以(yi)下(xia)方(fang)法(fa)：

方(fang)法(fa)壹：收(shou)集細胞，1000RPM條(tiao)件下(xia)離心(xin)4分鐘，棄去上清液(ye)，補加(jia)1-2mL培(pei)養(yang)液(ye)後吹(chui)勻(yun)，將細胞懸(xuan)液(ye)按(an)1：2到1：5的(de)比例分到新的含(han)8ml培(pei)養(yang)基(ji)的(de)新皿中或者瓶(ping)中。

方(fang)法(fa)二：可選擇半(ban)數換液(ye)方(fang)式，棄去半(ban)數培(pei)養(yang)基(ji)後，將剩余(yu)細胞懸(xuan)起(qi)，將細胞懸(xuan)液(ye)按(an)1：2到1：3的(de)比例分到新的含(han)8ml培(pei)養(yang)基(ji)的(de)新皿中或者瓶(ping)中。

人(ren)非小細胞肺(fei)腺癌(ai)細胞 【細胞凍(dong)存】

待(dai)細胞生(sheng)長狀(zhuang)態(tai)良好(hao)時(shi)，可(ke)進(jin)行(xing)293/HEK-293細胞|細胞凍(dong)存。貼(tie)壁細胞凍(dong)存時(shi)，棄(qi)去培(pei)養(yang)基(ji)後加(jia)入少(shao)量(liang)胰酶，細胞變圓(yuan)脫(tuo)落(luo)後，加(jia)入約(yue)1ml含血(xue)清的(de)培(pei)養(yang)基(ji)後加(jia)入凍(dong)存管中，再(zai)添加(jia)10%DMSO後進(jin)行凍存(cun)。懸(xuan)浮(fu)細胞凍(dong)存時(shi)，應(ying)將細胞收(shou)集，1000RPM條(tiao)件下(xia)離心(xin)4分鐘，少(shao)量(liang)保存(cun)上清(qing)液(ye)(防(fang)止細胞吸(xi)走(zou))，加(jia)入部(bu)分新鮮培(pei)養(yang)基(ji)，加(jia)入到(dao)凍存管中，在(zai)凍存(cun)管(guan)中加(jia)入10%DMSO後進(jin)行凍存(cun)。

人(ren)非小細胞肺(fei)腺癌(ai)細胞 【復(fu)蘇的(de)原(yuan)則(ze)】

快速融化(hua)：必須(xu)將凍存(cun)在(zai)-196℃液(ye)氮(dan)中的(de)細胞快速融化(hua)至(zhi)37℃，使人(ren)非(fei)小細胞肺(fei)腺癌(ai)細胞|細胞外(wai)凍存(cun)時(shi)的(de)冰晶迅速融化(hua)，避免(mian)冰晶緩慢(man)融化(hua)時(shi)進(jin)入細胞形成再結晶，對細胞造(zao)成損害(hai)。

人非(fei)小細胞肺(fei)腺癌(ai)細胞 乾(qian)思|復(fu)旦(dan)細胞庫全國各(ge)地均(jun)可(ke)發(fa)貨，全(quan)國統壹價格(ge)，本(ben)公司出售的(de)所有(you)細胞僅(jin)供(gong)科(ke)研(yan)使用。

人非小細胞肺(fei)腺癌(ai)細胞 【註意事(shi)項(xiang)】

乾(qian)思(si)生(sheng)物(wu)實驗室(shi)專業(ye)人(ren)士(shi)提醒廣(guang)大科(ke)研(yan)實驗者，購(gou)買人(ren)非小細胞肺(fei)腺癌(ai)細胞培(pei)養(yang)，註意事(shi)項(xiang)：

1. 收(shou)到細胞後，若發(fa)現幹(gan)冰已(yi)揮(hui)發(fa)幹凈(jing)、凍存(cun)管瓶蓋(gai)脫落(luo)、破損(sun)及(ji)細胞有(you)汙染，請立(li)即與(yu)我(wo)們(men)。

2. 所有動物(wu)細胞均(jun)視(shi)為(wei)有(you)潛在(zai)的生(sheng)物(wu)危(wei)害性(xing)，必須(xu)在(zai)二級生(sheng)物安(an)全(quan)臺內(nei)操作(zuo)，並請(qing)註意防(fang)護，所有廢液(ye)及(ji)接觸(chu)過此(ci)細胞的(de)器(qi)皿(min)需(xu)要滅(mie)菌後方(fang)能(neng)丟(diu)棄。

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小徐20180323