人(ren)急(ji)性(xing)單核(he)細胞(bao)白(bai)血病(bing)細胞(bao)_細胞(bao)株(zhu)

非(fei)常(chang)讓人著(zhe)迷的實(shi)驗(yan)，其成功關鍵(jian)之壹(yi)是(shi)選(xuan)擇(ze)可信(xin)的(de)實(shi)驗試劑(ji)。

我司細胞(bao)近(jin)3000種，來(lai)源(yuan)於(yu)美國(guo)ATCC,細胞(bao)都是(shi)經(jing)過(guo)嚴格質量控(kong)制(zhi)，在(zai)中國(guo)大(da)陸(lu)努(nu)力(li)搭(da)建(jian)正牌細胞(bao)與(yu)國(guo)內廣(guang)大(da)科研人員之(zhi)間(jian)的(de)溝通(tong)橋(qiao)梁(liang)。為(wei)您(nin)提供人急(ji)性(xing)單核(he)細胞(bao)白(bai)血病(bing)細胞(bao)外(wai)，還(hai)有(you)更(geng)多相(xiang)關實(shi)驗產品，標準品，細胞(bao)株(zhu)和(he)實驗技(ji)術服務等等前(qian)期(qi)後(hou)續服務。

人急性(xing)單核(he)細胞(bao)白(bai)血病(bing)細胞(bao)的(de)產品介紹

人(ren)急性(xing)單核(he)細胞(bao)白(bai)血病(bing)細胞(bao)由我司*銷售人急性(xing)單核(he)細胞(bao)白(bai)血病(bing)細胞(bao)。

人急性(xing)單核(he)細胞(bao)白(bai)血病(bing)細胞(bao)細胞(bao)株(zhu)

　　Q1. 人(ren)急(ji)性(xing)單核(he)細胞(bao)白(bai)血病(bing)細胞(bao)液體培(pei)養基(ji)的保(bao)存(cun)是(shi)冷(leng)藏(zang)好？還是(shi)冷(leng)凍(dong)好？

　　要冷(leng)藏(zang)！！因(yin)為液體培(pei)養基(ji)經(jing)冷(leng)凍(dong)後(hou)再經(jing)溶化時，其溶液的pH值(zhi)會(hui)發生改(gai)變，溶(rong)液往往變堿(jian)，某(mou)些成(cheng)分(fen)溶(rong)解也(ye)會(hui)受(shou)到(dao)影(ying)響(xiang)對細胞(bao)生長不利。故液體培(pei)養基(ji)壹(yi)定(ding)要存(cun)放(fang)在(zai)冷(leng)藏(zang)箱中，通常液體培(pei)養基(ji)在(zai)冷(leng)藏(zang)條件下可存(cun)放(fang)6個月(yue) ~ 壹(yi)年。

　　Q2.人(ren)急性(xing)單核(he)細胞(bao)白(bai)血病(bing)細胞(bao) 液體培(pei)養基(ji)中谷(gu)氨酰(xian)胺(an)的(de)作(zuo)用，及(ji)使(shi)用(yong)方(fang)法(fa)。

　　幾乎(hu)所(suo)有(you)的(de)細胞(bao)對谷(gu)氨酰(xian)胺(an)有(you)較(jiao)高的(de)要求，細胞(bao)需(xu)要谷(gu)氨酰(xian)胺(an)合成(cheng)蛋(dan)白(bai)質，在(zai)缺(que)少谷(gu)氨酰(xian)胺(an)時(shi)，細胞(bao)生長不良(liang)而(er)死亡(wang)。所(suo)以，各種(zhong)培養液中都含(han)有(you)較(jiao)大(da)量(liang)的(de)谷(gu)氨酰(xian)胺(an)。谷(gu)氨酰(xian)胺(an)在(zai)溶(rong)液中很(hen)不穩定(ding)，應置(zhi)-20 ?C冰凍(dong)保存(cun)，用前(qian)加(jia)入培養基(ji)中。加(jia)有(you)谷(gu)氨酰(xian)胺(an)的(de)液體培(pei)養基(ji)4 ?C 冰箱儲(chu)存兩(liang)周(zhou)以上時(shi)，應重新(xin)加(jia)入原(yuan)來(lai)量(liang)的(de)谷(gu)氨酰(xian)胺(an)。基(ji)礎醫(yi)學細胞(bao)中心在(zai)其服務項目中配制(zhi)分裝了高濃度(du)（100倍）的(de)谷(gu)氨酰(xian)胺(an)溶(rong)液（1ml/支(zhi)）。每(mei)支(zhi)1ml的谷(gu)氨酰(xian)胺(an)加(jia)到99ml*培養基(ji)中，其終濃度(du)為2mM/ml培(pei)養基(ji)。包裝為(wei)粉(fen)紅色(se)，-24?C保(bao)存(cun)。

　　Q3.細胞(bao)計(ji)數及(ji)存(cun)活測(ce)試(shi)
1、原(yuan)理(li)：
(1)計算細胞(bao)數目可用血(xue)球(qiu)計(ji)數盤或(huo)是(shi)Coultercounter粒子計(ji)數器自動計數。
(2)血球計數盤壹(yi)般有(you)二(er)個chambers，每(mei)個chamber中細刻(ke)9個1mm2大(da)正(zheng)方(fang)形，其中4個角落(luo)之正(zheng)方(fang)形再(zai)細刻(ke)16個小(xiao)格，深度(du)均(jun)為(wei)0.1mm。當(dang)chamber上方蓋(gai)上(shang)蓋(gai)玻片(pian)後(hou)，每(mei)個大(da)正(zheng)方(fang)形之(zhi)體積(ji)為1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使用(yong)時(shi)，計數每(mei)個大(da)正(zheng)方(fang)形內之(zhi)細胞(bao)數目，乘以稀釋(shi)倍數，再乘以104，即為(wei)每(mei)ml中之細胞(bao)數目。
(3)存活測(ce)試(shi)之(zhi)步驟(zhou)為dyeexclusion，利用染料(liao)會(hui)滲入死細胞(bao)中而(er)呈色(se)，而(er)活細胞(bao)因(yin)細胞(bao)膜(mo)完整，染料(liao)無(wu)法(fa)滲(shen)入(ru)而(er)不會(hui)呈色(se)。壹(yi)般使(shi)用藍(lan)色(se)之(zhi)trypan blue染料(liao)，如(ru)果(guo)細胞(bao)不易吸收(shou)trypan blue，則用紅色(se)之(zhi)Erythrosin bluish。計(ji)算細胞(bao)活率(lv)：活細胞(bao)數/(活細胞(bao)數+死細胞(bao)數)×100%。計數應在(zai)臺(tai)盼蘭(lan)染色(se)後(hou)數分鐘內完(wan)成(cheng)，隨(sui)時(shi)間延長，部(bu)分(fen)活細胞(bao)也(ye)開始攝取染料(liao);因(yin)為臺(tai)盼蘭(lan)對蛋(dan)白(bai)質有(you)很(hen)強的(de)親(qin)和(he)力，用不含(han)血(xue)清的稀(xi)釋(shi)液，可以使染色(se)計(ji)數更(geng)為準確。

　　Q4.細胞(bao)特(te)性(xing)
在(zai)細胞(bao)培(pei)養之(zhi)前，我們要了解壹(yi)下妳(ni)所(suo)要養細胞(bao)的(de)基本(ben)特(te)性(xing)，這(zhe)點(dian)可(ke)以從細胞(bao)的(de)產品說明(ming)書(shu)或(huo)者(zhe)從ATCC細胞(bao)庫(ku)查詢(xun)。除此之(zhi)外(wai)我們還(hai)要知道每(mei)管細胞(bao)的(de)數量，建議分裂(lie)或(huo)傳(chuan)代(dai)的比例，和(he)已知細胞(bao)的(de)傳代(dai)代(dai)次(ci)等信(xin)息(xi)。

　　Q5.準備(bei)培養基(ji)
復蘇(su)細胞(bao)時(shi)需(xu)要準備(bei)合適的培養基(ji)，血清(qing)和(he)細胞(bao)生長所(suo)需(xu)的(de)添加(jia)劑(ji)。大(da)部(bu)分(fen)培(pei)養細胞(bao)所(suo)用的(de)培養體(ti)系，可(ke)以在(zai)訂(ding)購細胞(bao)系(xi)時獲得。
雖然(ran)大(da)多(duo)數細胞(bao)系(xi)可以在(zai)不止(zhi)壹(yi)種培(pei)養基(ji)中生長，但是(shi)當(dang)培養基(ji)改(gai)變時(shi)，細胞(bao)的(de)性(xing)質也(ye)會(hui)變化。因(yin)此，使(shi)用細胞(bao)庫(ku)推薦的培(pei)養基(ji)來(lai)培(pei)養細胞(bao)會(hui)獲得的效(xiao)果(guo)。

　　Q6.開啟凍(dong)存管(guan)
1.準備(bei)壹(yi)個培(pei)養瓶(ping)，加(jia)入適宜細胞(bao)培(pei)養的(de)培養基(ji)，液體體(ti)積按(an)照說明(ming)書(shu)的推薦配置(zhi)，並平(ping)衡(heng)培(pei)養基(ji)的溫(wen)度(du)和(he)pH（CO2）。　
2.在(zai)37℃水(shui)浴(yu)中或(huo)細胞(bao)的(de)正常生長溫度(du)下將(jiang)凍(dong)存管(guan)輕(qing)輕(qing)搖動。解凍(dong)要快(kuai)，約(yue)2分(fen)鐘或(huo)直(zhi)到(dao)冰晶(jing)融化即(ji)可(ke)。
3.從(cong)水(shui)浴(yu)中取出凍(dong)存管(guan)並用(yong)浸泡或(huo)噴(pen)灑(sa)70%乙(yi)醇的(de)方(fang)式來(lai)消(xiao)毒(du)。進(jin)壹(yi)步的(de)操作(zuo)均(jun)需(xu)在(zai)無(wu)菌(jun)操(cao)作(zuo)臺(tai)中嚴格無(wu)菌(jun)條件下進(jin)行。
4.擰開凍(dong)存管(guan)的管(guan)帽並將內容(rong)物(wu)轉(zhuan)移(yi)到壹(yi)個含(han)有(you)9 ml推(tui)薦培養基(ji)的無(wu)菌(jun)離(li)心管(guan)中。通過(guo)溫和(he)離(li)心（125×g 10 min）除去(qu)冷(leng)凍(dong)保護(hu)劑(ji)（DMSO）。棄去(qu)上清(qing)，並(bing)用1或(huo)2 ml*培(pei)養基(ji)重懸細胞(bao)。將(jiang)這(zhe)些細胞(bao)懸液轉移(yi)到含(han)有(you)*培(pei)養基(ji)的培(pei)養瓶(ping)中並輕(qing)輕(qing)搖動以*混勻。
5.培養24小(xiao)時後(hou)檢查細胞(bao)狀(zhuang)態並在(zai)需(xu)要時(shi)進(jin)行傳代(dai)。

　　Q7. 人急性(xing)單核(he)細胞(bao)白(bai)血病(bing)細胞(bao) 培(pei)養用(yong)液pH對細胞(bao)生長的影響

　　由於(yu)，大(da)多(duo)數細胞(bao)適宜pH為7.2~7.4，偏離(li)此範(fan)圍對細胞(bao)將(jiang)產生有(you)害的影(ying)響(xiang)。各種細胞(bao)對pH的要求也(ye)不*相同，原(yuan)代(dai)培養細胞(bao)壹(yi)般對pH變動耐受(shou)差(cha)，無(wu)限(xian)細胞(bao)系(xi)耐受(shou)力(li)強(qiang)。

　　但總(zong)體(ti)來(lai)說(shuo)，細胞(bao)耐酸(suan)性(xing)比耐堿(jian)性(xing)強壹(yi)些，偏(pian)酸(suan)環(huan)境(jing)中更(geng)利於細胞(bao)生長。因(yin)此，我們在(zai)配(pei)制(zhi)培養用(yong)液時，可(ke)把液體的(de)pH稍微(wei)調(tiao)得偏酸(suan)壹(yi)些。液體在(zai)經(jing)過(guo)0.10um或(huo)0.22um濾膜過(guo)濾時，溶(rong)液的pH還(hai)會(hui)向(xiang)上(shang)浮動(dong)0.2左右。

　　人(ren)急(ji)性(xing)單核(he)細胞(bao)白(bai)血病(bing)細胞(bao)質量可(ke)靠，售後(hou)有(you)保(bao)障(zhang)（編(bian)輯(ji)：tanxi）