人(ren)急性(xing)非B非T淋巴(ba)細胞性(xing)白(bai)血病(bing)細胞_復(fu)蘇(su)的(de)

非常(chang)讓(rang)人(ren)著迷的(de)實驗(yan)，其(qi)成功(gong)關鍵之壹(yi)是選擇可信(xin)的(de)實驗(yan)試劑。

我司(si)細胞近3000種，來(lai)源(yuan)於美(mei)國(guo)ATCC,細胞都是經(jing)過(guo)嚴(yan)格質量控制(zhi)，在中(zhong)國(guo)大陸努力(li)搭建正(zheng)牌細胞與(yu)國(guo)內廣(guang)大科(ke)研(yan)人(ren)員(yuan)之(zhi)間的(de)溝(gou)通橋梁。為(wei)您提(ti)供人(ren)急性(xing)非B非T淋巴(ba)細胞性(xing)白(bai)血病(bing)細胞外，還有更多(duo)相關(guan)實驗(yan)產品，標準(zhun)品(pin)，細胞株和(he)實驗(yan)技術(shu)服(fu)務等(deng)等前期(qi)後續服(fu)務。

人(ren)急性(xing)非B非T淋巴(ba)細胞性(xing)白(bai)血病(bing)細胞的(de)產品介(jie)紹

人(ren)急性(xing)非B非T淋巴(ba)細胞性(xing)白(bai)血病(bing)細胞由(you)我司(si)*銷(xiao)售人(ren)急性(xing)非B非T淋巴(ba)細胞性(xing)白(bai)血病(bing)細胞。

人(ren)急性(xing)非B非T淋巴(ba)細胞性(xing)白(bai)血病(bing)細胞細胞株

　　Q1. 人(ren)急性(xing)非B非T淋巴(ba)細胞性(xing)白(bai)血病(bing)細胞液(ye)體(ti)培養基(ji)的(de)保存(cun)是冷(leng)藏好？還是冷(leng)凍(dong)好？

　　要(yao)冷(leng)藏！！因(yin)為(wei)液(ye)體(ti)培養基(ji)經(jing)冷(leng)凍(dong)後再經(jing)溶(rong)化時(shi)，其(qi)溶(rong)液(ye)的(de)pH值(zhi)會(hui)發(fa)生改變，溶(rong)液(ye)往往(wang)變堿(jian)，某些成分溶(rong)解也(ye)會(hui)受到(dao)影(ying)響對細胞生長不利。故液(ye)體(ti)培養基(ji)壹(yi)定(ding)要(yao)存放在冷(leng)藏箱(xiang)中，通(tong)常(chang)液(ye)體(ti)培養基(ji)在(zai)冷(leng)藏條件(jian)下可存(cun)放6個月 ~ 壹(yi)年。

　　Q2.人(ren)急性(xing)非B非T淋巴(ba)細胞性(xing)白(bai)血病(bing)細胞 液(ye)體(ti)培養基(ji)中(zhong)谷氨(an)酰胺(an)的(de)作用，及(ji)使用(yong)方法(fa)。

　　幾乎(hu)所(suo)有的(de)細胞對谷氨(an)酰胺(an)有(you)較(jiao)高(gao)的(de)要(yao)求(qiu)，細胞需(xu)要(yao)谷氨(an)酰胺(an)合(he)成蛋(dan)白(bai)質，在缺少谷(gu)氨(an)酰胺(an)時(shi)，細胞生長不良(liang)而(er)死(si)亡(wang)。所(suo)以，各(ge)種培養液(ye)中都(dou)含(han)有(you)較大量的(de)谷(gu)氨(an)酰胺(an)。谷(gu)氨(an)酰胺(an)在(zai)溶(rong)液(ye)中很(hen)不穩(wen)定(ding)，應(ying)置(zhi)-20 ?C冰凍(dong)保存(cun)，用(yong)前加入(ru)培養基(ji)中(zhong)。加有谷(gu)氨(an)酰胺(an)的(de)液(ye)體(ti)培養基(ji)4 ?C 冰箱(xiang)儲存(cun)兩周(zhou)以(yi)上時(shi)，應(ying)重(zhong)新(xin)加入(ru)原來(lai)量的(de)谷(gu)氨(an)酰胺(an)。基(ji)礎(chu)醫(yi)學(xue)細胞中心(xin)在(zai)其(qi)服(fu)務項目中配制(zhi)分裝了(le)高(gao)濃(nong)度(du)（100倍）的(de)谷(gu)氨(an)酰胺(an)溶(rong)液(ye)（1ml/支(zhi)）。每(mei)支(zhi)1ml的(de)谷(gu)氨(an)酰胺(an)加到99ml*培養基(ji)中(zhong)，其(qi)終濃(nong)度(du)為(wei)2mM/ml培養基(ji)。包裝為(wei)粉紅(hong)色，-24?C保存(cun)。

　　Q3.細胞計(ji)數及存活(huo)測試(shi)
1、原(yuan)理(li)：
(1)計(ji)算(suan)細胞數目可用(yong)血球計(ji)數盤(pan)或是Coultercounter粒(li)子(zi)計(ji)數器自動計(ji)數。
(2)血球計(ji)數盤(pan)壹(yi)般(ban)有(you)二(er)個(ge)chambers，每(mei)個chamber中細刻(ke)9個1mm2大正(zheng)方形(xing)，其(qi)中4個(ge)角落之正(zheng)方形(xing)再細刻(ke)16個小(xiao)格，深(shen)度(du)均為(wei)0.1mm。當chamber上方(fang)蓋上(shang)蓋玻(bo)片(pian)後，每(mei)個大正(zheng)方形(xing)之(zhi)體(ti)積為(wei)1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使用(yong)時，計(ji)數每(mei)個大正(zheng)方形(xing)內(nei)之(zhi)細胞數目，乘以稀釋倍數，再乘以104，即(ji)為(wei)每(mei)ml中之細胞數目。
(3)存活(huo)測試(shi)之(zhi)步驟為(wei)dyeexclusion，利用染料會(hui)滲入(ru)死(si)細胞中而(er)呈(cheng)色，而(er)活(huo)細胞因細胞膜完(wan)整(zheng)，染料無法(fa)滲入(ru)而不會(hui)呈(cheng)色。壹(yi)般(ban)使(shi)用(yong)藍色之(zhi)trypan blue染料，如果(guo)細胞不易吸(xi)收(shou)trypan blue，則(ze)用(yong)紅(hong)色之(zhi)Erythrosin bluish。計(ji)算(suan)細胞活(huo)率：活(huo)細胞數/(活(huo)細胞數+死(si)細胞數)×100%。計(ji)數應(ying)在(zai)臺盼(pan)蘭(lan)染色後數分鐘內完(wan)成(cheng)，隨(sui)時(shi)間延(yan)長(chang)，部分活(huo)細胞也(ye)開(kai)始(shi)攝(she)取染料;因為(wei)臺盼(pan)蘭(lan)對蛋白(bai)質有很(hen)強(qiang)的(de)親(qin)和力，用不含(han)血(xue)清的(de)稀釋液(ye)，可以(yi)使染色計(ji)數更為(wei)準確。

　　Q4.細胞特(te)性(xing)
在(zai)細胞培養之(zhi)前，我們(men)要(yao)了(le)解壹(yi)下妳所(suo)要(yao)養細胞的(de)基(ji)本(ben)特(te)性(xing)，這(zhe)點(dian)可以(yi)從(cong)細胞的(de)產品說明書或者從(cong)ATCC細胞庫查(zha)詢(xun)。除此之(zhi)外我們(men)還要(yao)知(zhi)道每(mei)管細胞的(de)數量，建議(yi)分裂或傳代的(de)比(bi)例，和已知(zhi)細胞的(de)傳代代次(ci)等(deng)信(xin)息。

　　Q5.準(zhun)備培養基(ji)
復(fu)蘇(su)細胞時需(xu)要(yao)準備合(he)適的(de)培養基(ji)，血(xue)清和(he)細胞生長所(suo)需(xu)的(de)添(tian)加劑。大部分培養細胞所(suo)用的(de)培養體(ti)系(xi)，可以(yi)在訂(ding)購(gou)細胞系(xi)時獲(huo)得(de)。
雖(sui)然大多數細胞系(xi)可以(yi)在不止(zhi)壹(yi)種培養基(ji)中(zhong)生長，但是當培養基(ji)改變時，細胞的(de)性(xing)質也(ye)會(hui)變化。因(yin)此，使(shi)用細胞庫推(tui)薦(jian)的(de)培養基(ji)來(lai)培養細胞會(hui)獲(huo)得的(de)效(xiao)果。

　　Q6.開啟凍(dong)存(cun)管
1.準備壹(yi)個培養瓶(ping)，加入(ru)適宜細胞培養的(de)培養基(ji)，液(ye)體(ti)體(ti)積按照(zhao)說明書的(de)推(tui)薦(jian)配置(zhi)，並(bing)平衡培養基(ji)的(de)溫(wen)度(du)和pH（CO2）。　
2.在(zai)37℃水(shui)浴中或細胞的(de)正(zheng)常(chang)生長溫(wen)度(du)下將(jiang)凍(dong)存(cun)管輕(qing)輕(qing)搖(yao)動。解凍(dong)要(yao)快，約2分鐘或直到(dao)冰晶融化即(ji)可。
3.從(cong)水浴中取(qu)出(chu)凍(dong)存(cun)管並用浸泡或噴(pen)灑70%乙(yi)醇(chun)的(de)方(fang)式(shi)來(lai)消毒。進(jin)壹(yi)步的(de)操(cao)作均需(xu)在無(wu)菌(jun)操(cao)作臺中嚴(yan)格無(wu)菌(jun)條件(jian)下進(jin)行(xing)。
4.擰(ning)開(kai)凍(dong)存(cun)管的(de)管(guan)帽並將內(nei)容(rong)物(wu)轉移到(dao)壹(yi)個含(han)有(you)9 ml推(tui)薦(jian)培養基(ji)的(de)無(wu)菌(jun)離心(xin)管(guan)中(zhong)。通(tong)過(guo)溫(wen)和(he)離心(xin)（125×g 10 min）除去(qu)冷(leng)凍(dong)保護(hu)劑（DMSO）。棄(qi)去上(shang)清(qing)，並(bing)用1或2 ml*培養基(ji)重(zhong)懸(xuan)細胞。將這(zhe)些細胞懸(xuan)液(ye)轉移(yi)到(dao)含(han)有(you)*培養基(ji)的(de)培養瓶(ping)中(zhong)並(bing)輕(qing)輕(qing)搖(yao)動以*混(hun)勻(yun)。
5.培養24小(xiao)時(shi)後檢查(zha)細胞狀態(tai)並在(zai)需(xu)要(yao)時進(jin)行(xing)傳代。

　　Q7. 人(ren)急性(xing)非B非T淋巴(ba)細胞性(xing)白(bai)血病(bing)細胞 培養用(yong)液(ye)pH對細胞生長的(de)影(ying)響

　　由(you)於，大多數細胞適宜pH為(wei)7.2~7.4，偏(pian)離此範(fan)圍對細胞將產生有害的(de)影(ying)響。各(ge)種細胞對pH的(de)要(yao)求(qiu)也(ye)不*相同，原代(dai)培養細胞壹(yi)般(ban)對pH變動耐受差(cha)，無(wu)限(xian)細胞系(xi)耐受力(li)強(qiang)。

　　但(dan)總(zong)體(ti)來(lai)說，細胞耐酸(suan)性(xing)比(bi)耐堿(jian)性(xing)強(qiang)壹(yi)些，偏(pian)酸環境(jing)中更(geng)利於細胞生長。因此，我們(men)在配制(zhi)培養用(yong)液(ye)時，可把液(ye)體(ti)的(de)pH稍微(wei)調(tiao)得偏(pian)酸壹(yi)些。液(ye)體(ti)在經(jing)過(guo)0.10um或0.22um濾膜過(guo)濾(lv)時(shi)，溶(rong)液(ye)的(de)pH還(hai)會(hui)向(xiang)上浮(fu)動0.2左右(you)。

　　人(ren)急性(xing)非B非T淋巴(ba)細胞性(xing)白(bai)血病(bing)細胞質量可靠(kao)，售後有保障（編輯：tanxi）