人急(ji)性(xing)白血病細胞(bao)_細胞(bao)株

非(fei)常(chang)讓(rang)人著(zhe)迷(mi)的(de)實(shi)驗(yan)，其(qi)成功關鍵(jian)之(zhi)壹是(shi)選擇可(ke)信(xin)的(de)實(shi)驗(yan)試劑。

我司細胞(bao)近3000種(zhong)，來(lai)源於(yu)美(mei)國(guo)ATCC,細胞(bao)都(dou)是(shi)經過(guo)嚴格質量(liang)控制(zhi)，在(zai)中(zhong)國(guo)大陸努(nu)力(li)搭(da)建正牌細胞(bao)與國(guo)內(nei)廣(guang)大科研(yan)人員(yuan)之(zhi)間的(de)溝(gou)通(tong)橋(qiao)梁(liang)。為(wei)您(nin)提(ti)供(gong)人急(ji)性(xing)白血病細胞(bao)外(wai)，還有(you)更(geng)多(duo)相關實(shi)驗(yan)產(chan)品(pin)，標(biao)準品(pin)，細胞(bao)株和(he)實(shi)驗(yan)技術(shu)服(fu)務(wu)等等前(qian)期後(hou)續(xu)服務(wu)。

人急(ji)性(xing)白血病細胞(bao)的(de)產(chan)品(pin)介紹(shao)

人急(ji)性(xing)白血病細胞(bao)由(you)我(wo)司*銷售人急(ji)性(xing)白血病細胞(bao)。

人急(ji)性(xing)白血病細胞(bao)細胞(bao)株

　　Q1. 人急(ji)性(xing)白血病細胞(bao)液體培養基(ji)的(de)保(bao)存是(shi)冷(leng)藏(zang)好？還是(shi)冷(leng)凍(dong)好？

　　要冷(leng)藏(zang)！！因為(wei)液體培養基(ji)經冷(leng)凍(dong)後(hou)再(zai)經(jing)溶化時(shi)，其(qi)溶液的(de)pH值會發(fa)生(sheng)改(gai)變，溶液往往變堿，某些成分溶解(jie)也會(hui)受到(dao)影(ying)響對細胞(bao)生(sheng)長不(bu)利(li)。故液體培養基(ji)壹定要存(cun)放(fang)在(zai)冷(leng)藏(zang)箱中(zhong)，通常(chang)液體培養基(ji)在(zai)冷(leng)藏(zang)條件下(xia)可(ke)存放(fang)6個月 ~ 壹年。

　　Q2.人急(ji)性(xing)白血病細胞(bao) 液體培養基(ji)中(zhong)谷(gu)氨酰(xian)胺的(de)作(zuo)用(yong)，及使用(yong)方法(fa)。

　　幾乎(hu)所有(you)的(de)細胞(bao)對(dui)谷(gu)氨酰(xian)胺有較(jiao)高(gao)的(de)要求(qiu)，細胞(bao)需(xu)要谷(gu)氨酰(xian)胺合成蛋(dan)白質，在(zai)缺少(shao)谷(gu)氨酰(xian)胺時，細胞(bao)生(sheng)長不(bu)良(liang)而死亡(wang)。所(suo)以(yi)，各(ge)種(zhong)培養液中(zhong)都(dou)含(han)有較(jiao)大量(liang)的(de)谷(gu)氨酰(xian)胺。谷(gu)氨酰(xian)胺在(zai)溶液中(zhong)很不穩定，應(ying)置-20 ?C冰凍保存，用(yong)前(qian)加入培(pei)養基(ji)中(zhong)。加有谷(gu)氨酰(xian)胺的(de)液體培養基(ji)4 ?C 冰箱儲存(cun)兩周以(yi)上(shang)時，應(ying)重(zhong)新(xin)加(jia)入原來(lai)量(liang)的(de)谷(gu)氨酰(xian)胺。基礎(chu)醫(yi)學細胞(bao)中(zhong)心在(zai)其(qi)服務項目中(zhong)配制(zhi)分裝了高(gao)濃度(du)（100倍(bei)）的(de)谷(gu)氨酰(xian)胺溶液（1ml/支）。每支1ml的(de)谷(gu)氨酰(xian)胺加到(dao)99ml*培(pei)養基(ji)中(zhong)，其(qi)終濃度(du)為(wei)2mM/ml培(pei)養基(ji)。包裝為(wei)粉(fen)紅色(se)，-24?C保存(cun)。

　　Q3.細胞(bao)計數(shu)及(ji)存(cun)活(huo)測(ce)試(shi)
1、原理(li)：
(1)計算細胞(bao)數(shu)目可(ke)用(yong)血球計數(shu)盤(pan)或是(shi)Coultercounter粒子(zi)計數(shu)器自動(dong)計數(shu)。
(2)血球計數(shu)盤(pan)壹般(ban)有二個chambers，每個chamber中(zhong)細刻9個1mm2大正方形(xing)，其(qi)中(zhong)4個角(jiao)落(luo)之(zhi)正方形(xing)再(zai)細刻16個小(xiao)格(ge)，深(shen)度(du)均(jun)為(wei)0.1mm。當chamber上(shang)方蓋(gai)上(shang)蓋(gai)玻(bo)片(pian)後(hou)，每(mei)個大正方形(xing)之(zhi)體積為(wei)1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使用(yong)時，計數(shu)每(mei)個大正方形(xing)內(nei)之細胞(bao)數(shu)目，乘以(yi)稀(xi)釋倍數(shu)，再(zai)乘以(yi)104，即(ji)為(wei)每(mei)ml中(zhong)之細胞(bao)數(shu)目。
(3)存(cun)活(huo)測(ce)試(shi)之步(bu)驟(zhou)為(wei)dyeexclusion，利(li)用(yong)染料(liao)會(hui)滲(shen)入(ru)死細胞(bao)中(zhong)而呈色(se)，而活細胞(bao)因(yin)細胞(bao)膜(mo)完整，染料(liao)無(wu)法(fa)滲入(ru)而不會呈(cheng)色(se)。壹般(ban)使用(yong)藍色(se)之trypan blue染料(liao)，如(ru)果(guo)細胞(bao)不(bu)易(yi)吸(xi)收(shou)trypan blue，則用(yong)紅色(se)之Erythrosin bluish。計算細胞(bao)活(huo)率(lv)：活(huo)細胞(bao)數(shu)/(活(huo)細胞(bao)數(shu)+死細胞(bao)數(shu))×100%。計數(shu)應(ying)在(zai)臺(tai)盼蘭(lan)染色(se)後(hou)數(shu)分鐘內(nei)完成，隨(sui)時間(jian)延(yan)長，部分活細胞(bao)也(ye)開(kai)始(shi)攝取染料(liao);因(yin)為(wei)臺(tai)盼蘭(lan)對(dui)蛋(dan)白質有(you)很強的(de)親(qin)和(he)力(li)，用(yong)不含(han)血清(qing)的(de)稀(xi)釋液，可以(yi)使染色(se)計數(shu)更(geng)為(wei)準(zhun)確。

　　Q4.細胞(bao)特(te)性(xing)
在(zai)細胞(bao)培(pei)養之(zhi)前(qian)，我們要了解(jie)壹下妳所要養細胞(bao)的(de)基(ji)本(ben)特(te)性(xing)，這(zhe)點(dian)可以(yi)從(cong)細胞(bao)的(de)產(chan)品(pin)說(shuo)明(ming)書(shu)或者從(cong)ATCC細胞(bao)庫(ku)查(zha)詢(xun)。除(chu)此(ci)之(zhi)外我們還要知(zhi)道(dao)每(mei)管(guan)細胞(bao)的(de)數(shu)量(liang)，建議分裂(lie)或傳代(dai)的(de)比(bi)例，和(he)已(yi)知(zhi)細胞(bao)的(de)傳(chuan)代代次(ci)等信(xin)息。

　　Q5.準備培養基(ji)
復蘇細胞(bao)時(shi)需(xu)要準(zhun)備合適(shi)的(de)培(pei)養基(ji)，血清(qing)和(he)細胞(bao)生(sheng)長所(suo)需(xu)的(de)添(tian)加(jia)劑。大部分培養細胞(bao)所(suo)用(yong)的(de)培(pei)養體(ti)系，可(ke)以(yi)在(zai)訂購(gou)細胞(bao)系時(shi)獲得(de)。
雖然大多(duo)數(shu)細胞(bao)系可(ke)以(yi)在(zai)不(bu)止壹種(zhong)培養基(ji)中(zhong)生(sheng)長，但(dan)是(shi)當培(pei)養基(ji)改(gai)變時，細胞(bao)的(de)性(xing)質(zhi)也(ye)會變化。因(yin)此(ci)，使用(yong)細胞(bao)庫(ku)推薦(jian)的(de)培(pei)養基(ji)來(lai)培養細胞(bao)會(hui)獲得(de)的(de)效果(guo)。

　　Q6.開(kai)啟(qi)凍(dong)存(cun)管
1.準(zhun)備壹個培養瓶，加入(ru)適(shi)宜細胞(bao)培(pei)養的(de)培(pei)養基(ji)，液體體積(ji)按(an)照說(shuo)明(ming)書(shu)的(de)推薦(jian)配置，並(bing)平衡培養基(ji)的(de)溫(wen)度和(he)pH（CO2）。　
2.在(zai)37℃水(shui)浴中(zhong)或細胞(bao)的(de)正常(chang)生(sheng)長溫(wen)度下(xia)將凍(dong)存(cun)管輕(qing)輕(qing)搖動(dong)。解(jie)凍要快(kuai)，約(yue)2分鐘或直到(dao)冰晶融(rong)化即(ji)可。
3.從水(shui)浴中(zhong)取出凍(dong)存管(guan)並(bing)用(yong)浸泡或噴(pen)灑(sa)70%乙醇的(de)方(fang)式(shi)來(lai)消(xiao)毒。進壹步的(de)操(cao)作均(jun)需(xu)在(zai)無(wu)菌操(cao)作臺(tai)中(zhong)嚴格無菌條件下(xia)進行(xing)。
4.擰(ning)開(kai)凍存管的(de)管(guan)帽並(bing)將內(nei)容物轉移(yi)到壹個含(han)有9 ml推薦(jian)培養基(ji)的(de)無(wu)菌離(li)心管中(zhong)。通過溫(wen)和(he)離(li)心（125×g 10 min）除(chu)去冷(leng)凍(dong)保(bao)護劑（DMSO）。棄去上(shang)清(qing)，並(bing)用(yong)1或2 ml*培養基(ji)重(zhong)懸細胞(bao)。將這(zhe)些(xie)細胞(bao)懸(xuan)液轉移(yi)到含(han)有*培養基(ji)的(de)培(pei)養瓶中(zhong)並(bing)輕輕搖動(dong)以(yi)*混(hun)勻。
5.培養24小(xiao)時(shi)後(hou)檢(jian)查(zha)細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)並(bing)在(zai)需(xu)要時(shi)進行(xing)傳(chuan)代。

　　Q7. 人急(ji)性(xing)白血病細胞(bao) 培(pei)養用(yong)液pH對細胞(bao)生(sheng)長的(de)影(ying)響

　　由(you)於(yu)，大多(duo)數(shu)細胞(bao)適(shi)宜pH為(wei)7.2~7.4，偏離(li)此(ci)範圍(wei)對(dui)細胞(bao)將產(chan)生(sheng)有害的(de)影(ying)響。各種(zhong)細胞(bao)對(dui)pH的(de)要求(qiu)也(ye)不*相(xiang)同，原(yuan)代(dai)培養細胞(bao)壹般(ban)對pH變動(dong)耐(nai)受(shou)差(cha)，無(wu)限細胞(bao)系耐(nai)受(shou)力(li)強。

　　但(dan)總(zong)體來(lai)說(shuo)，細胞(bao)耐(nai)酸(suan)性(xing)比(bi)耐(nai)堿性(xing)強(qiang)壹些，偏酸(suan)環(huan)境中(zhong)更(geng)利於(yu)細胞(bao)生(sheng)長。因(yin)此(ci)，我(wo)們在(zai)配制(zhi)培(pei)養用(yong)液時，可把(ba)液體的(de)pH稍(shao)微(wei)調得(de)偏酸(suan)壹些。液體在(zai)經(jing)過0.10um或0.22um濾膜(mo)過濾時，溶液的(de)pH還會(hui)向(xiang)上(shang)浮動(dong)0.2左(zuo)右。

　　人急(ji)性(xing)白血病細胞(bao)質(zhi)量(liang)可靠(kao)，售(shou)後(hou)有(you)保障(zhang)（編輯：tanxi）