人(ren)急(ji)性單核細(xi)胞白血(xue)病(bing)單核細(xi)胞_細胞株

非常(chang)讓(rang)人(ren)著(zhe)迷的(de)實驗(yan)，其(qi)成功關(guan)鍵(jian)之壹是選擇可信(xin)的(de)實驗(yan)試(shi)劑。

我(wo)司(si)細胞近(jin)3000種，來源於(yu)美國(guo)ATCC,細胞都是經過(guo)嚴(yan)格(ge)質(zhi)量(liang)控(kong)制，在中(zhong)國(guo)大(da)陸(lu)努力搭建(jian)正牌(pai)細胞與(yu)國(guo)內廣大(da)科研人(ren)員(yuan)之間的(de)溝(gou)通(tong)橋(qiao)梁(liang)。為(wei)您(nin)提供(gong)人(ren)急(ji)性單核細(xi)胞白血(xue)病(bing)單核細(xi)胞外，還有更(geng)多(duo)相關實驗(yan)產(chan)品(pin)，標(biao)準品，細(xi)胞株和實驗(yan)技(ji)術服(fu)務等(deng)等(deng)前期後續服(fu)務。

人(ren)急(ji)性單核細(xi)胞白血(xue)病(bing)單核細(xi)胞的(de)產(chan)品(pin)介紹(shao)

人(ren)急(ji)性單核細(xi)胞白血(xue)病(bing)單核細(xi)胞由我(wo)司(si)*銷(xiao)售(shou)人(ren)急(ji)性單核細(xi)胞白血(xue)病(bing)單核細(xi)胞。

人(ren)急(ji)性單核細(xi)胞白血(xue)病(bing)單核細(xi)胞細胞株

　　Q1. 人(ren)急(ji)性單核細(xi)胞白血(xue)病(bing)單核細(xi)胞液體(ti)培養基的(de)保存(cun)是冷藏好？還是冷凍(dong)好？

　　要(yao)冷(leng)藏！！因為(wei)液體(ti)培養基經冷(leng)凍(dong)後再經溶(rong)化(hua)時(shi)，其(qi)溶(rong)液的(de)pH值會發生(sheng)改(gai)變(bian)，溶(rong)液往(wang)往(wang)變堿(jian)，某(mou)些成(cheng)分(fen)溶(rong)解也會受(shou)到影響(xiang)對(dui)細(xi)胞生長不利。故液體(ti)培養基壹定要(yao)存(cun)放(fang)在冷藏箱中(zhong)，通(tong)常(chang)液體(ti)培養基在冷藏條件下(xia)可(ke)存放(fang)6個月(yue) ~ 壹年。

　　Q2.人(ren)急(ji)性單核細(xi)胞白血(xue)病(bing)單核細(xi)胞 液體(ti)培養基中(zhong)谷(gu)氨酰胺的(de)作用(yong)，及使用(yong)方法。

　　幾乎(hu)所有(you)的(de)細胞對(dui)谷(gu)氨酰胺有(you)較(jiao)高(gao)的(de)要(yao)求，細胞需(xu)要(yao)谷(gu)氨酰胺合(he)成蛋白質(zhi)，在缺(que)少谷氨酰胺時(shi)，細(xi)胞生長不良而(er)死亡。所以(yi)，各種(zhong)培養液中(zhong)都(dou)含(han)有較大(da)量(liang)的(de)谷氨酰胺。谷(gu)氨酰胺在溶液中(zhong)很(hen)不穩定，應(ying)置(zhi)-20 ?C冰凍保存(cun)，用(yong)前加(jia)入培養基中(zhong)。加(jia)有谷(gu)氨酰胺的(de)液體(ti)培養基4 ?C 冰箱(xiang)儲存兩(liang)周以(yi)上時(shi)，應(ying)重(zhong)新(xin)加(jia)入原(yuan)來量(liang)的(de)谷氨酰胺。基礎醫(yi)學(xue)細胞中(zhong)心(xin)在其服(fu)務項目(mu)中(zhong)配(pei)制(zhi)分裝了高(gao)濃度（100倍）的(de)谷氨酰胺溶(rong)液（1ml/支(zhi)）。每支1ml的(de)谷氨酰胺加(jia)到99ml*培養基中(zhong)，其(qi)終(zhong)濃度為(wei)2mM/ml培養基。包裝(zhuang)為(wei)粉紅色(se)，-24?C保存(cun)。

　　Q3.細胞計數及存活測(ce)試(shi)
1、原理(li)：
(1)計算細(xi)胞數目(mu)可用(yong)血(xue)球計數盤或是Coultercounter粒(li)子(zi)計數器自(zi)動(dong)計數。
(2)血(xue)球計數盤壹般有二個chambers，每個chamber中(zhong)細(xi)刻(ke)9個(ge)1mm2大(da)正方形(xing)，其中(zhong)4個(ge)角(jiao)落之正方形(xing)再細(xi)刻(ke)16個(ge)小格(ge)，深度均為(wei)0.1mm。當(dang)chamber上方蓋上(shang)蓋(gai)玻片後，每個大(da)正方形(xing)之體積(ji)為(wei)1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使用(yong)時(shi)，計數每個大(da)正方形(xing)內之細胞數目(mu)，乘以稀(xi)釋(shi)倍數，再乘以104，即(ji)為(wei)每ml中(zhong)之細胞數目(mu)。
(3)存活測(ce)試(shi)之步(bu)驟(zhou)為(wei)dyeexclusion，利(li)用(yong)染料會滲入死(si)細(xi)胞中(zhong)而(er)呈色(se)，而(er)活細胞因細(xi)胞膜完整，染料無法(fa)滲入而(er)不會呈色(se)。壹般使用(yong)藍(lan)色(se)之trypan blue染料，如果細胞不易吸(xi)收trypan blue，則(ze)用(yong)紅(hong)色(se)之Erythrosin bluish。計算細(xi)胞活率(lv)：活細胞數/(活細胞數+死細(xi)胞數)×100%。計數應(ying)在臺盼(pan)蘭(lan)染色(se)後數分鐘(zhong)內完成，隨(sui)時(shi)間延長，部(bu)分(fen)活細胞也開始攝取(qu)染料;因為(wei)臺(tai)盼(pan)蘭(lan)對(dui)蛋白質(zhi)有很(hen)強(qiang)的(de)親和力(li)，用(yong)不含血(xue)清(qing)的(de)稀釋(shi)液，可(ke)以(yi)使染色(se)計數更(geng)為(wei)準確(que)。

　　Q4.細(xi)胞特(te)性
在細胞培養之前，我(wo)們(men)要(yao)了解壹下(xia)妳所要(yao)養(yang)細(xi)胞的(de)基本特(te)性，這(zhe)點(dian)可以(yi)從細胞的(de)產(chan)品(pin)說(shuo)明(ming)書(shu)或者從ATCC細胞庫查詢(xun)。除此(ci)之外我(wo)們(men)還要(yao)知道每管細(xi)胞的(de)數量(liang)，建(jian)議分(fen)裂(lie)或傳(chuan)代的(de)比例(li)，和已知細胞的(de)傳(chuan)代代(dai)次等信(xin)息(xi)。

　　Q5.準備培養基
復蘇細胞時(shi)需(xu)要(yao)準備合(he)適的(de)培養基，血(xue)清(qing)和細(xi)胞生長所需(xu)的(de)添加(jia)劑。大(da)部(bu)分(fen)培養細(xi)胞所用(yong)的(de)培養體(ti)系(xi)，可以在訂(ding)購細胞系(xi)時(shi)獲得(de)。
雖然大(da)多數細胞系(xi)可以在不止壹種(zhong)培養基中(zhong)生(sheng)長，但是當培養基改(gai)變(bian)時(shi)，細(xi)胞的(de)性質(zhi)也會變化(hua)。因此(ci)，使用(yong)細(xi)胞庫推薦的(de)培養基來培養細(xi)胞會獲得(de)的(de)效果(guo)。

　　Q6.開啟(qi)凍(dong)存(cun)管
1.準備壹(yi)個(ge)培養瓶(ping)，加(jia)入適(shi)宜(yi)細胞培養的(de)培養基，液體(ti)體(ti)積按(an)照(zhao)說明(ming)書(shu)的(de)推薦配置(zhi)，並平(ping)衡培養基的(de)溫(wen)度和pH（CO2）。　
2.在37℃水(shui)浴中(zhong)或細(xi)胞的(de)正常(chang)生長溫(wen)度下將凍存(cun)管(guan)輕(qing)輕搖動(dong)。解(jie)凍(dong)要(yao)快(kuai)，約(yue)2分(fen)鐘(zhong)或直(zhi)到(dao)冰晶(jing)融化(hua)即可。
3.從水(shui)浴中(zhong)取(qu)出(chu)凍(dong)存(cun)管(guan)並用(yong)浸泡或噴灑(sa)70%乙(yi)醇(chun)的(de)方式來消(xiao)毒(du)。進(jin)壹步(bu)的(de)操作(zuo)均需(xu)在無菌(jun)操作(zuo)臺中(zhong)嚴(yan)格(ge)無(wu)菌(jun)條件下(xia)進(jin)行(xing)。
4.擰(ning)開凍(dong)存(cun)管(guan)的(de)管帽(mao)並將內容物(wu)轉(zhuan)移(yi)到(dao)壹(yi)個含(han)有(you)9 ml推薦培養基的(de)無菌(jun)離心(xin)管中(zhong)。通(tong)過(guo)溫(wen)和離(li)心(xin)（125×g 10 min）除去冷凍(dong)保護(hu)劑（DMSO）。棄(qi)去上清(qing)，並(bing)用(yong)1或2 ml*培養基重(zhong)懸細(xi)胞。將這些(xie)細(xi)胞懸液轉(zhuan)移(yi)到(dao)含(han)有*培養基的(de)培養瓶(ping)中(zhong)並(bing)輕(qing)輕搖動(dong)以(yi)*混勻(yun)。
5.培養24小時(shi)後檢(jian)查細胞狀態(tai)並在需(xu)要(yao)時(shi)進(jin)行(xing)傳(chuan)代。

　　Q7. 人(ren)急(ji)性單核細(xi)胞白血(xue)病(bing)單核細(xi)胞 培養用(yong)液pH對(dui)細(xi)胞生長的(de)影響(xiang)

　　由於(yu)，大(da)多數細胞適宜(yi)pH為(wei)7.2~7.4，偏(pian)離此(ci)範圍(wei)對(dui)細(xi)胞將產(chan)生(sheng)有(you)害的(de)影響(xiang)。各種(zhong)細(xi)胞對(dui)pH的(de)要(yao)求也不*相同，原代(dai)培養細(xi)胞壹般對(dui)pH變(bian)動(dong)耐受(shou)差(cha)，無(wu)限細(xi)胞系(xi)耐受(shou)力強。

　　但總(zong)體來說，細胞耐酸(suan)性比(bi)耐堿(jian)性強(qiang)壹(yi)些，偏(pian)酸(suan)環(huan)境(jing)中(zhong)更(geng)利(li)於(yu)細胞生長。因(yin)此(ci)，我(wo)們(men)在配制(zhi)培養用(yong)液時(shi)，可(ke)把(ba)液體(ti)的(de)pH稍(shao)微調(tiao)得(de)偏酸(suan)壹(yi)些(xie)。液體(ti)在經過(guo)0.10um或0.22um濾(lv)膜過濾(lv)時(shi)，溶(rong)液的(de)pH還會向上(shang)浮(fu)動(dong)0.2左(zuo)右(you)。

　　人(ren)急(ji)性單核細(xi)胞白血(xue)病(bing)單核細(xi)胞質(zhi)量(liang)可(ke)靠(kao)，售後有保障(zhang)（編(bian)輯(ji)：tanxi）