人(ren)急性骨髓白血病細(xi)胞_細胞株

非常(chang)讓人(ren)著迷(mi)的實(shi)驗，其成功(gong)關(guan)鍵之壹(yi)是選(xuan)擇(ze)可信(xin)的實(shi)驗試劑(ji)。

我(wo)司(si)細胞近(jin)3000種(zhong)，來源(yuan)於美(mei)國(guo)ATCC,細(xi)胞都是(shi)經過(guo)嚴格(ge)質量(liang)控(kong)制(zhi)，在(zai)中(zhong)國(guo)大(da)陸(lu)努力(li)搭建正牌(pai)細(xi)胞與國(guo)內(nei)廣(guang)大(da)科研(yan)人(ren)員之間的溝通橋梁。為(wei)您(nin)提(ti)供人(ren)急性骨髓白血病細(xi)胞外(wai)，還有更(geng)多相(xiang)關(guan)實(shi)驗產(chan)品，標準(zhun)品，細(xi)胞株和(he)實(shi)驗技(ji)術(shu)服務(wu)等等(deng)前期(qi)後(hou)續服務(wu)。

人(ren)急性骨髓白血病細(xi)胞的產(chan)品介紹

人(ren)急性骨髓白血病細(xi)胞由(you)我(wo)司(si)*銷售(shou)人(ren)急性骨髓白血病細(xi)胞。

人(ren)急性骨髓白血病細(xi)胞細胞株

　　Q1. 人(ren)急性骨髓白血病細(xi)胞液體(ti)培養(yang)基(ji)的(de)保(bao)存(cun)是冷藏(zang)好？還是冷凍好？

　　要(yao)冷藏(zang)！！因(yin)為(wei)液體(ti)培養(yang)基(ji)經(jing)冷凍後(hou)再(zai)經(jing)溶化時(shi)，其溶液的(de)pH值會(hui)發生改變(bian)，溶液往(wang)往變(bian)堿(jian)，某些(xie)成分溶解也(ye)會受(shou)到(dao)影(ying)響(xiang)對細(xi)胞生長不(bu)利。故(gu)液體(ti)培養(yang)基(ji)壹(yi)定(ding)要(yao)存(cun)放在冷藏(zang)箱(xiang)中，通常液(ye)體培養(yang)基(ji)在(zai)冷藏(zang)條(tiao)件(jian)下可存(cun)放6個月(yue) ~ 壹(yi)年(nian)。

　　Q2.人(ren)急性骨髓白血病細(xi)胞 液體(ti)培養(yang)基(ji)中(zhong)谷(gu)氨酰胺的(de)作用，及(ji)使用方(fang)法(fa)。

　　幾乎所(suo)有的細(xi)胞對谷(gu)氨酰胺有(you)較高(gao)的(de)要(yao)求，細(xi)胞需要(yao)谷氨酰胺合(he)成蛋白質，在(zai)缺少(shao)谷氨酰胺時(shi)，細(xi)胞生長不(bu)良(liang)而死(si)亡。所(suo)以，各(ge)種(zhong)培養(yang)液(ye)中(zhong)都(dou)含有較大量的(de)谷氨酰胺。谷(gu)氨酰胺在(zai)溶液中(zhong)很(hen)不(bu)穩定(ding)，應置-20 ?C冰(bing)凍保存(cun)，用前加(jia)入(ru)培養(yang)基(ji)中(zhong)。加(jia)有谷氨酰胺的(de)液體(ti)培養(yang)基(ji)4 ?C 冰(bing)箱(xiang)儲存(cun)兩(liang)周以上時(shi)，應(ying)重(zhong)新加入(ru)原來量(liang)的谷氨酰胺。基(ji)礎醫學(xue)細胞中心(xin)在其服(fu)務(wu)項目中配制分裝(zhuang)了(le)高(gao)濃(nong)度（100倍）的(de)谷(gu)氨酰胺溶液（1ml/支）。每支1ml的(de)谷(gu)氨酰胺加(jia)到(dao)99ml*培養(yang)基(ji)中(zhong)，其終濃(nong)度為(wei)2mM/ml培養(yang)基(ji)。包(bao)裝(zhuang)為(wei)粉紅(hong)色(se)，-24?C保(bao)存(cun)。

　　Q3.細胞計(ji)數(shu)及(ji)存(cun)活測(ce)試(shi)
1、原(yuan)理(li)：
(1)計(ji)算細(xi)胞數(shu)目可用(yong)血球計(ji)數(shu)盤(pan)或是(shi)Coultercounter粒(li)子計(ji)數(shu)器(qi)自(zi)動計(ji)數(shu)。
(2)血(xue)球計(ji)數(shu)盤(pan)壹(yi)般(ban)有(you)二個chambers，每個(ge)chamber中(zhong)細刻(ke)9個(ge)1mm2大(da)正方(fang)形，其中(zhong)4個(ge)角(jiao)落之正方(fang)形再(zai)細(xi)刻(ke)16個(ge)小格(ge)，深度(du)均為(wei)0.1mm。當chamber上方(fang)蓋上蓋玻(bo)片(pian)後(hou)，每個(ge)大(da)正方(fang)形之(zhi)體(ti)積(ji)為(wei)1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使用(yong)時(shi)，計(ji)數(shu)每個(ge)大(da)正方(fang)形內(nei)之(zhi)細(xi)胞數(shu)目，乘以稀釋倍數(shu)，再(zai)乘以104，即為(wei)每ml中(zhong)之(zhi)細胞數(shu)目。
(3)存(cun)活測(ce)試(shi)之(zhi)步(bu)驟(zhou)為(wei)dyeexclusion，利用(yong)染(ran)料(liao)會(hui)滲(shen)入(ru)死(si)細胞中而(er)呈色(se)，而(er)活(huo)細(xi)胞因(yin)細(xi)胞膜完整，染(ran)料(liao)無(wu)法(fa)滲入(ru)而不(bu)會呈色(se)。壹(yi)般(ban)使(shi)用藍(lan)色(se)之trypan blue染(ran)料(liao)，如(ru)果細胞不易(yi)吸(xi)收(shou)trypan blue，則(ze)用(yong)紅(hong)色(se)之Erythrosin bluish。計(ji)算細(xi)胞活率：活(huo)細(xi)胞數(shu)/(活(huo)細(xi)胞數(shu)+死(si)細胞數(shu))×100%。計(ji)數(shu)應(ying)在(zai)臺(tai)盼蘭染(ran)色(se)後(hou)數(shu)分鐘(zhong)內完(wan)成，隨(sui)時(shi)間(jian)延(yan)長，部分活(huo)細胞也開始攝取(qu)染(ran)料(liao);因(yin)為(wei)臺盼(pan)蘭(lan)對蛋(dan)白質有(you)很(hen)強的(de)親(qin)和(he)力(li)，用不(bu)含血清(qing)的(de)稀釋液，可以(yi)使染(ran)色(se)計(ji)數(shu)更(geng)為(wei)準確(que)。

　　Q4.細(xi)胞特性
在細胞培養(yang)之(zhi)前，我(wo)們(men)要(yao)了解(jie)壹(yi)下妳(ni)所(suo)要(yao)養細(xi)胞的基(ji)本特性，這點可以(yi)從細胞的產(chan)品說(shuo)明書(shu)或者(zhe)從ATCC細(xi)胞庫(ku)查(zha)詢。除此(ci)之外(wai)我們還要(yao)知道(dao)每管(guan)細胞的數(shu)量(liang)，建(jian)議(yi)分裂或傳代(dai)的比例，和(he)已知細胞的傳代(dai)代(dai)次等(deng)信(xin)息(xi)。

　　Q5.準(zhun)備培養(yang)基(ji)
復蘇細胞時(shi)需(xu)要(yao)準備合適的培養(yang)基(ji)，血(xue)清(qing)和(he)細(xi)胞生長所(suo)需的添(tian)加(jia)劑。大(da)部分培養(yang)細(xi)胞所(suo)用的培養(yang)體(ti)系(xi)，可以(yi)在訂(ding)購細(xi)胞系(xi)時(shi)獲得。
雖然(ran)大(da)多(duo)數(shu)細(xi)胞系(xi)可以(yi)在不止(zhi)壹(yi)種培養(yang)基(ji)中(zhong)生長，但(dan)是當培養(yang)基(ji)改(gai)變(bian)時(shi)，細(xi)胞的性質也(ye)會變化(hua)。因(yin)此(ci)，使用(yong)細胞庫(ku)推薦的培養(yang)基(ji)來培養(yang)細(xi)胞會獲得的效(xiao)果。

　　Q6.開啟凍存(cun)管(guan)
1.準備壹(yi)個培養(yang)瓶(ping)，加入(ru)適宜(yi)細胞培養(yang)的(de)培養(yang)基(ji)，液(ye)體(ti)體積按照(zhao)說(shuo)明書(shu)的(de)推薦配置，並(bing)平衡培養(yang)基(ji)的(de)溫(wen)度和(he)pH（CO2）。　
2.在(zai)37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)或細(xi)胞的正常(chang)生長溫(wen)度(du)下將凍存(cun)管(guan)輕輕搖(yao)動(dong)。解(jie)凍要(yao)快，約(yue)2分鐘(zhong)或直到(dao)冰(bing)晶(jing)融化(hua)即可。
3.從(cong)水浴(yu)中(zhong)取(qu)出(chu)凍存(cun)管(guan)並用浸(jin)泡或噴(pen)灑(sa)70%乙(yi)醇(chun)的(de)方(fang)式(shi)來消毒。進壹(yi)步的(de)操(cao)作均需在(zai)無菌操(cao)作臺中(zhong)嚴格(ge)無菌條件下(xia)進行(xing)。
4.擰開凍存(cun)管(guan)的管(guan)帽(mao)並(bing)將內(nei)容(rong)物(wu)轉(zhuan)移到(dao)壹(yi)個含有9 ml推薦培養(yang)基(ji)的(de)無(wu)菌離心管(guan)中。通過溫(wen)和(he)離(li)心(xin)（125×g 10 min）除去(qu)冷凍保護(hu)劑（DMSO）。棄去(qu)上清(qing)，並(bing)用1或2 ml*培養(yang)基(ji)重(zhong)懸細(xi)胞。將這(zhe)些(xie)細(xi)胞懸液(ye)轉(zhuan)移到(dao)含有*培養(yang)基(ji)的(de)培養(yang)瓶(ping)中並(bing)輕輕搖(yao)動(dong)以(yi)*混勻。
5.培養(yang)24小時(shi)後(hou)檢(jian)查(zha)細胞狀態(tai)並在(zai)需(xu)要(yao)時(shi)進行(xing)傳代(dai)。

　　Q7. 人(ren)急性骨髓白血病細(xi)胞 培養(yang)用(yong)液(ye)pH對細(xi)胞生長的(de)影(ying)響(xiang)

　　由(you)於，大(da)多(duo)數(shu)細(xi)胞適宜(yi)pH為(wei)7.2~7.4，偏(pian)離(li)此(ci)範(fan)圍(wei)對細(xi)胞將產(chan)生有害(hai)的影(ying)響(xiang)。各(ge)種(zhong)細胞對pH的(de)要(yao)求也(ye)不(bu)*相(xiang)同(tong)，原代(dai)培養(yang)細(xi)胞壹(yi)般(ban)對pH變(bian)動耐(nai)受(shou)差(cha)，無(wu)限(xian)細胞系(xi)耐(nai)受(shou)力(li)強。

　　但(dan)總體來說(shuo)，細(xi)胞耐(nai)酸性比耐(nai)堿(jian)性強壹(yi)些(xie)，偏(pian)酸環(huan)境(jing)中更(geng)利於細(xi)胞生長。因(yin)此(ci)，我們(men)在配制培養(yang)用(yong)液(ye)時(shi)，可把(ba)液體的(de)pH稍(shao)微調(tiao)得(de)偏(pian)酸壹(yi)些(xie)。液(ye)體(ti)在經過0.10um或0.22um濾(lv)膜過濾(lv)時(shi)，溶液的(de)pH還會向(xiang)上浮(fu)動(dong)0.2左(zuo)右。

　　人(ren)急性骨髓白血病細(xi)胞質量(liang)可靠，售(shou)後(hou)有(you)保(bao)障(zhang)（編(bian)輯(ji)：tanxi）