人(ren)類(lei)風(feng)濕(shi)關節(jie)炎滑膜成(cheng)纖維細胞(bao)_復蘇的

非常(chang)讓(rang)人(ren)著(zhe)迷的實驗(yan)，其(qi)成(cheng)功關鍵之壹(yi)是(shi)選(xuan)擇可(ke)信的(de)實驗(yan)試劑(ji)。

我(wo)司細胞(bao)近3000種，來(lai)源於(yu)美國ATCC,細胞(bao)都是(shi)經(jing)過嚴格質量(liang)控(kong)制，在中國大(da)陸努力(li)搭(da)建正牌細胞(bao)與國內(nei)廣(guang)大科(ke)研(yan)人(ren)員之間(jian)的溝(gou)通橋(qiao)梁(liang)。為您(nin)提(ti)供(gong)人(ren)類(lei)風(feng)濕(shi)關節(jie)炎滑膜成(cheng)纖維細胞(bao)外(wai)，還有更多相關實(shi)驗(yan)產(chan)品(pin)，標準(zhun)品(pin)，細胞(bao)株(zhu)和(he)實驗(yan)技(ji)術服務(wu)等等前期後(hou)續(xu)服務(wu)。

人(ren)類(lei)風(feng)濕(shi)關節(jie)炎滑膜成(cheng)纖維細胞(bao)的(de)產(chan)品(pin)介(jie)紹(shao)

人(ren)類(lei)風(feng)濕(shi)關節(jie)炎滑膜成(cheng)纖維細胞(bao)由我(wo)司*銷(xiao)售人(ren)類(lei)風(feng)濕(shi)關節(jie)炎滑膜成(cheng)纖維細胞(bao)。

人(ren)類(lei)風(feng)濕(shi)關節(jie)炎滑膜成(cheng)纖維細胞(bao)細胞(bao)株(zhu)

　　Q1. 人(ren)類(lei)風(feng)濕(shi)關節(jie)炎滑膜成(cheng)纖維細胞(bao)液體培養(yang)基(ji)的保(bao)存是(shi)冷藏好(hao)？還是(shi)冷凍(dong)好(hao)？

　　要冷藏！！因(yin)為液體培養(yang)基(ji)經(jing)冷(leng)凍(dong)後再經(jing)溶(rong)化時，其(qi)溶(rong)液的pH值會發(fa)生(sheng)改(gai)變(bian)，溶(rong)液往往變(bian)堿，某(mou)些成(cheng)分溶(rong)解(jie)也(ye)會受到(dao)影(ying)響(xiang)對細胞(bao)生(sheng)長不利。故(gu)液體培養(yang)基(ji)壹(yi)定(ding)要存放(fang)在(zai)冷藏箱(xiang)中，通常液體培養(yang)基(ji)在冷(leng)藏條(tiao)件(jian)下(xia)可(ke)存放(fang)6個(ge)月 ~ 壹(yi)年。

　　Q2.人(ren)類(lei)風(feng)濕(shi)關節(jie)炎滑膜成(cheng)纖維細胞(bao) 液體培養(yang)基(ji)中谷氨酰胺的作(zuo)用，及使用(yong)方法(fa)。

　　幾(ji)乎所有的(de)細胞(bao)對(dui)谷氨(an)酰胺(an)有較(jiao)高(gao)的要求，細胞(bao)需(xu)要谷氨酰胺(an)合成(cheng)蛋(dan)白(bai)質，在(zai)缺(que)少(shao)谷(gu)氨(an)酰(xian)胺時，細胞(bao)生(sheng)長不良而死亡。所以(yi)，各(ge)種培(pei)養(yang)液中都含(han)有較(jiao)大(da)量的(de)谷氨酰胺。谷(gu)氨酰(xian)胺在溶(rong)液中很不穩定(ding)，應置-20 ?C冰凍保(bao)存，用(yong)前加(jia)入(ru)培(pei)養(yang)基(ji)中。加(jia)有谷(gu)氨(an)酰胺(an)的液體培養(yang)基(ji)4 ?C 冰箱儲存兩(liang)周(zhou)以上時，應重新(xin)加(jia)入(ru)原(yuan)來(lai)量的(de)谷氨酰胺。基(ji)礎醫(yi)學(xue)細胞(bao)中心(xin)在其服務(wu)項(xiang)目中配制分裝(zhuang)了高濃度（100倍(bei)）的(de)谷氨酰胺(an)溶(rong)液（1ml/支(zhi)）。每(mei)支(zhi)1ml的谷(gu)氨(an)酰(xian)胺加(jia)到(dao)99ml*培(pei)養(yang)基(ji)中，其終(zhong)濃度為2mM/ml培(pei)養(yang)基(ji)。包裝為粉(fen)紅(hong)色(se)，-24?C保(bao)存。

　　Q3.細胞(bao)計(ji)數及(ji)存活測試
1、原(yuan)理：
(1)計算(suan)細胞(bao)數(shu)目可(ke)用血(xue)球計數(shu)盤或(huo)是(shi)Coultercounter粒子(zi)計(ji)數器(qi)自(zi)動計數。
(2)血(xue)球計數(shu)盤壹(yi)般(ban)有二個(ge)chambers，每(mei)個(ge)chamber中細刻(ke)9個(ge)1mm2大正(zheng)方形，其中4個(ge)角落(luo)之正(zheng)方形再細刻(ke)16個(ge)小格(ge)，深(shen)度均(jun)為0.1mm。當(dang)chamber上方蓋上蓋玻片(pian)後(hou)，每(mei)個(ge)大正(zheng)方形之體(ti)積(ji)為1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使用(yong)時，計(ji)數(shu)每(mei)個(ge)大正(zheng)方形內之細胞(bao)數(shu)目，乘(cheng)以稀(xi)釋(shi)倍(bei)數(shu)，再乘(cheng)以104，即為每(mei)ml中之細胞(bao)數(shu)目。
(3)存活測試之步(bu)驟為dyeexclusion，利(li)用染料(liao)會滲入(ru)死細胞(bao)中而呈(cheng)色，而活細胞(bao)因(yin)細胞(bao)膜完(wan)整，染料無(wu)法(fa)滲入(ru)而不會呈(cheng)色。壹(yi)般(ban)使用(yong)藍色(se)之trypan blue染(ran)料，如(ru)果(guo)細胞(bao)不易(yi)吸收trypan blue，則(ze)用(yong)紅(hong)色(se)之Erythrosin bluish。計(ji)算細胞(bao)活率：活細胞(bao)數(shu)/(活細胞(bao)數(shu)+死細胞(bao)數(shu))×100%。計數(shu)應在臺(tai)盼蘭(lan)染(ran)色(se)後(hou)數(shu)分鐘(zhong)內完(wan)成，隨(sui)時(shi)間(jian)延(yan)長，部(bu)分活細胞(bao)也(ye)開始攝取染料(liao);因(yin)為臺(tai)盼蘭(lan)對(dui)蛋(dan)白(bai)質有很(hen)強(qiang)的親(qin)和(he)力(li)，用(yong)不含(han)血(xue)清的稀釋液，可以使染(ran)色計(ji)數(shu)更為準(zhun)確。

　　Q4.細胞(bao)特(te)性(xing)
在細胞(bao)培(pei)養(yang)之前，我(wo)們要了解壹(yi)下(xia)妳所要養(yang)細胞(bao)的(de)基(ji)本(ben)特(te)性(xing)，這點可(ke)以從(cong)細胞(bao)的(de)產(chan)品(pin)說(shuo)明(ming)書或(huo)者從(cong)ATCC細胞(bao)庫查(zha)詢。除(chu)此之外(wai)我(wo)們還(hai)要知道每(mei)管細胞(bao)的(de)數量(liang)，建議分裂(lie)或(huo)傳代的比(bi)例，和(he)已知(zhi)細胞(bao)的(de)傳代代次(ci)等信息(xi)。

　　Q5.準(zhun)備(bei)培(pei)養(yang)基(ji)
復蘇細胞(bao)時(shi)需(xu)要準(zhun)備(bei)合(he)適(shi)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)，血(xue)清和(he)細胞(bao)生(sheng)長所需(xu)的(de)添(tian)加(jia)劑(ji)。大部(bu)分培(pei)養(yang)細胞(bao)所用(yong)的(de)培養(yang)體(ti)系，可以在(zai)訂購細胞(bao)系(xi)時獲(huo)得。
雖然(ran)大多數(shu)細胞(bao)系(xi)可以(yi)在不止壹(yi)種培(pei)養(yang)基(ji)中生長，但是(shi)當培(pei)養(yang)基(ji)改(gai)變(bian)時，細胞(bao)的(de)性質也(ye)會變(bian)化。因此(ci)，使用(yong)細胞(bao)庫推(tui)薦(jian)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)來(lai)培養(yang)細胞(bao)會(hui)獲(huo)得的效果(guo)。

　　Q6.開啟(qi)凍存管
1.準(zhun)備(bei)壹(yi)個(ge)培養(yang)瓶(ping)，加(jia)入(ru)適(shi)宜(yi)細胞(bao)培(pei)養(yang)的(de)培養(yang)基(ji)，液體體積(ji)按照說(shuo)明書的推(tui)薦(jian)配(pei)置(zhi)，並平(ping)衡培(pei)養(yang)基(ji)的溫(wen)度和(he)pH（CO2）。　
2.在37℃水浴(yu)中或(huo)細胞(bao)的(de)正常(chang)生長溫(wen)度下(xia)將凍存管輕輕(qing)搖(yao)動。解凍(dong)要快(kuai)，約(yue)2分鐘(zhong)或(huo)直(zhi)到(dao)冰晶(jing)融(rong)化即可(ke)。
3.從(cong)水浴(yu)中取出(chu)凍(dong)存管並用(yong)浸(jin)泡(pao)或(huo)噴灑70%乙醇的(de)方式來(lai)消(xiao)毒。進(jin)壹(yi)步(bu)的操作(zuo)均(jun)需(xu)在(zai)無(wu)菌(jun)操作(zuo)臺(tai)中嚴格無(wu)菌(jun)條件(jian)下(xia)進(jin)行(xing)。
4.擰開凍存管的管帽(mao)並將內容物(wu)轉移(yi)到(dao)壹(yi)個(ge)含(han)有9 ml推(tui)薦(jian)培(pei)養(yang)基(ji)的無(wu)菌(jun)離心(xin)管中。通過溫(wen)和(he)離心(xin)（125×g 10 min）除(chu)去冷(leng)凍(dong)保(bao)護(hu)劑(ji)（DMSO）。棄去(qu)上清，並用(yong)1或(huo)2 ml*培(pei)養(yang)基(ji)重懸(xuan)細胞(bao)。將這些細胞(bao)懸(xuan)液轉移(yi)到(dao)含(han)有*培(pei)養(yang)基(ji)的培(pei)養(yang)瓶(ping)中並輕(qing)輕(qing)搖動(dong)以(yi)*混勻。
5.培養(yang)24小(xiao)時後檢查(zha)細胞(bao)狀(zhuang)態並在(zai)需(xu)要時進行(xing)傳代。

　　Q7. 人(ren)類(lei)風(feng)濕(shi)關節(jie)炎滑膜成(cheng)纖維細胞(bao) 培(pei)養(yang)用(yong)液pH對細胞(bao)生(sheng)長的影響(xiang)

　　由於，大多數(shu)細胞(bao)適(shi)宜(yi)pH為7.2~7.4，偏離此(ci)範圍對(dui)細胞(bao)將產(chan)生(sheng)有害的(de)影響(xiang)。各(ge)種細胞(bao)對(dui)pH的要求也不*相同(tong)，原代培養(yang)細胞(bao)壹(yi)般(ban)對pH變(bian)動耐(nai)受差(cha)，無(wu)限(xian)細胞(bao)系(xi)耐受力(li)強(qiang)。

　　但總體(ti)來(lai)說，細胞(bao)耐(nai)酸性(xing)比(bi)耐堿性強(qiang)壹(yi)些，偏酸環(huan)境(jing)中更利於(yu)細胞(bao)生(sheng)長。因此，我(wo)們在(zai)配(pei)制培養(yang)用(yong)液時，可把(ba)液體的pH稍(shao)微調得偏酸壹(yi)些。液體在經(jing)過0.10um或(huo)0.22um濾(lv)膜過濾(lv)時(shi)，溶(rong)液的pH還會(hui)向(xiang)上(shang)浮動0.2左(zuo)右。

　　人(ren)類(lei)風(feng)濕(shi)關節(jie)炎滑膜成(cheng)纖維細胞(bao)質量(liang)可靠(kao)，售後(hou)有保(bao)障（編輯：tanxi）