人淋(lin)巴(ba)管(guan)內(nei)皮細胞(bao)_細胞(bao)株(zhu)

非(fei)常讓(rang)人著(zhe)迷(mi)的(de)實驗，其成功(gong)關(guan)鍵(jian)之(zhi)壹是選擇可(ke)信的(de)實驗試劑(ji)。

我司(si)細胞(bao)近(jin)3000種，來(lai)源(yuan)於(yu)美(mei)國ATCC,細胞(bao)都是(shi)經(jing)過(guo)嚴(yan)格(ge)質(zhi)量(liang)控(kong)制，在(zai)中國大陸努力搭建正牌細胞(bao)與(yu)國內(nei)廣(guang)大科(ke)研(yan)人員(yuan)之(zhi)間(jian)的(de)溝通橋(qiao)梁(liang)。為您提(ti)供人淋(lin)巴(ba)管(guan)內(nei)皮細胞(bao)外(wai)，還(hai)有更多相關實(shi)驗產品(pin)，標準(zhun)品(pin)，細胞(bao)株(zhu)和實(shi)驗技術服務(wu)等等前(qian)期後續服務(wu)。

人淋(lin)巴(ba)管(guan)內(nei)皮細胞(bao)的(de)產品(pin)介紹(shao)

人淋(lin)巴(ba)管(guan)內(nei)皮細胞(bao)由我(wo)司(si)*銷(xiao)售人淋(lin)巴(ba)管(guan)內(nei)皮細胞(bao)。

人淋(lin)巴(ba)管(guan)內(nei)皮細胞(bao)細胞(bao)株(zhu)

　　Q1. 人淋(lin)巴(ba)管(guan)內(nei)皮細胞(bao)液(ye)體培養基的(de)保存(cun)是冷(leng)藏好(hao)？還(hai)是冷(leng)凍(dong)好(hao)？

　　要(yao)冷(leng)藏！！因(yin)為(wei)液體培養基經(jing)冷(leng)凍(dong)後再(zai)經(jing)溶(rong)化(hua)時，其溶液(ye)的(de)pH值(zhi)會(hui)發生改變，溶(rong)液(ye)往(wang)往(wang)變堿(jian)，某(mou)些成(cheng)分(fen)溶(rong)解(jie)也(ye)會受到影(ying)響對(dui)細胞(bao)生(sheng)長不(bu)利。故液體培養基壹定要(yao)存(cun)放(fang)在(zai)冷(leng)藏箱中，通常液(ye)體培養基在(zai)冷(leng)藏條(tiao)件(jian)下可(ke)存(cun)放(fang)6個(ge)月 ~ 壹年(nian)。

　　Q2.人淋(lin)巴(ba)管(guan)內(nei)皮細胞(bao) 液(ye)體培養基中谷氨(an)酰胺的(de)作用(yong)，及(ji)使(shi)用(yong)方(fang)法(fa)。

　　幾(ji)乎(hu)所有(you)的(de)細胞(bao)對(dui)谷氨(an)酰胺有(you)較高(gao)的(de)要(yao)求(qiu)，細胞(bao)需(xu)要(yao)谷氨(an)酰胺合(he)成(cheng)蛋(dan)白(bai)質(zhi)，在(zai)缺少(shao)谷氨(an)酰胺時，細胞(bao)生(sheng)長不(bu)良而(er)死(si)亡。所以，各(ge)種培養液中都含(han)有較大量(liang)的(de)谷氨(an)酰胺。谷氨(an)酰胺在(zai)溶液(ye)中很(hen)不穩(wen)定(ding)，應置(zhi)-20 ?C冰(bing)凍(dong)保存(cun)，用(yong)前(qian)加(jia)入培養基中。加(jia)有谷氨(an)酰胺的(de)液體培養基4 ?C 冰箱儲(chu)存(cun)兩周以上(shang)時，應重新(xin)加(jia)入原來量(liang)的(de)谷氨(an)酰胺。基礎醫(yi)學細胞(bao)中心在(zai)其服(fu)務(wu)項(xiang)目(mu)中配(pei)制分(fen)裝(zhuang)了(le)高(gao)濃度(du)（100倍(bei)）的(de)谷氨(an)酰胺溶(rong)液(ye)（1ml/支(zhi)）。每(mei)支(zhi)1ml的(de)谷氨(an)酰胺加(jia)到99ml*培養基中，其終濃(nong)度(du)為(wei)2mM/ml培養基。包(bao)裝為(wei)粉(fen)紅色(se)，-24?C保(bao)存(cun)。

　　Q3.細胞(bao)計數及(ji)存(cun)活測(ce)試
1、原理(li)：
(1)計算(suan)細胞(bao)數(shu)目(mu)可(ke)用(yong)血(xue)球計數盤(pan)或是(shi)Coultercounter粒(li)子計數器自動計數。
(2)血(xue)球計數盤(pan)壹般有二個(ge)chambers，每個(ge)chamber中細刻(ke)9個(ge)1mm2大正(zheng)方(fang)形(xing)，其中4個(ge)角落之(zhi)正(zheng)方(fang)形(xing)再細刻(ke)16個(ge)小(xiao)格(ge)，深度(du)均(jun)為(wei)0.1mm。當(dang)chamber上(shang)方蓋(gai)上(shang)蓋玻(bo)片後，每個(ge)大正(zheng)方(fang)形(xing)之(zhi)體積(ji)為(wei)1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使(shi)用(yong)時，計數每(mei)個(ge)大正(zheng)方(fang)形(xing)內之(zhi)細胞(bao)數(shu)目(mu)，乘(cheng)以稀釋倍(bei)數(shu)，再(zai)乘(cheng)以104，即為每(mei)ml中之(zhi)細胞(bao)數(shu)目(mu)。
(3)存(cun)活測(ce)試之(zhi)步(bu)驟(zhou)為(wei)dyeexclusion，利(li)用(yong)染(ran)料(liao)會滲入(ru)死細胞(bao)中而(er)呈(cheng)色(se)，而(er)活(huo)細胞(bao)因(yin)細胞(bao)膜(mo)完(wan)整，染(ran)料(liao)無(wu)法滲入而(er)不(bu)會(hui)呈色。壹般使用(yong)藍(lan)色(se)之(zhi)trypan blue染(ran)料(liao)，如(ru)果(guo)細胞(bao)不(bu)易(yi)吸(xi)收(shou)trypan blue，則(ze)用(yong)紅色(se)之(zhi)Erythrosin bluish。計算(suan)細胞(bao)活(huo)率：活細胞(bao)數(shu)/(活細胞(bao)數(shu)+死細胞(bao)數(shu))×100%。計數應(ying)在(zai)臺盼(pan)蘭(lan)染(ran)色後數(shu)分(fen)鐘內完(wan)成，隨(sui)時間(jian)延(yan)長，部(bu)分(fen)活(huo)細胞(bao)也(ye)開始(shi)攝取染料;因(yin)為臺(tai)盼蘭對(dui)蛋(dan)白(bai)質(zhi)有(you)很(hen)強的(de)親和力，用(yong)不(bu)含(han)血清(qing)的(de)稀釋液(ye)，可(ke)以使染色(se)計數更(geng)為準(zhun)確。

　　Q4.細胞(bao)特(te)性
在(zai)細胞(bao)培養之(zhi)前(qian)，我(wo)們要(yao)了(le)解壹下妳(ni)所要(yao)養細胞(bao)的(de)基本特(te)性，這點(dian)可(ke)以從細胞(bao)的(de)產品(pin)說明書或者(zhe)從(cong)ATCC細胞(bao)庫(ku)查詢(xun)。除此之(zhi)外(wai)我(wo)們還(hai)要(yao)知(zhi)道每(mei)管(guan)細胞(bao)的(de)數量(liang)，建議分(fen)裂(lie)或傳(chuan)代(dai)的(de)比例，和已(yi)知細胞(bao)的(de)傳(chuan)代(dai)代(dai)次等信息。

　　Q5.準(zhun)備(bei)培養基
復蘇(su)細胞(bao)時需要(yao)準(zhun)備(bei)合適的(de)培養基，血清(qing)和細胞(bao)生(sheng)長所(suo)需的(de)添加(jia)劑(ji)。大部(bu)分(fen)培養細胞(bao)所(suo)用(yong)的(de)培養體系(xi)，可(ke)以在(zai)訂購細胞(bao)系(xi)時獲(huo)得(de)。
雖然大多數細胞(bao)系(xi)可(ke)以在(zai)不止(zhi)壹種培養基中生長(chang)，但(dan)是當(dang)培養基改變(bian)時，細胞(bao)的(de)性質(zhi)也會變化(hua)。因(yin)此，使用(yong)細胞(bao)庫(ku)推(tui)薦(jian)的(de)培養基來培養細胞(bao)會(hui)獲(huo)得(de)的(de)效果(guo)。

　　Q6.開啟凍(dong)存(cun)管(guan)
1.準(zhun)備(bei)壹個(ge)培養瓶，加(jia)入適宜細胞(bao)培養的(de)培養基，液體體積(ji)按(an)照(zhao)說明書的(de)推(tui)薦(jian)配(pei)置，並(bing)平(ping)衡(heng)培養基的(de)溫度(du)和pH（CO2）。　
2.在(zai)37℃水浴中或細胞(bao)的(de)正常生(sheng)長(chang)溫度(du)下將凍(dong)存(cun)管(guan)輕(qing)輕(qing)搖(yao)動。解凍(dong)要(yao)快，約(yue)2分(fen)鐘或直(zhi)到冰(bing)晶融化(hua)即(ji)可(ke)。
3.從(cong)水浴中取出凍(dong)存(cun)管(guan)並(bing)用(yong)浸泡或噴(pen)灑(sa)70%乙(yi)醇的(de)方式來消(xiao)毒(du)。進壹步(bu)的(de)操作均(jun)需(xu)在(zai)無菌(jun)操作臺(tai)中嚴(yan)格(ge)無(wu)菌(jun)條(tiao)件(jian)下進行。
4.擰開(kai)凍(dong)存(cun)管(guan)的(de)管(guan)帽(mao)並將內容物轉(zhuan)移(yi)到壹個(ge)含(han)有9 ml推(tui)薦(jian)培養基的(de)無菌(jun)離(li)心管(guan)中。通過(guo)溫和離(li)心（125×g 10 min）除去冷(leng)凍(dong)保護(hu)劑(ji)（DMSO）。棄去(qu)上(shang)清(qing)，並(bing)用(yong)1或2 ml*培養基重懸(xuan)細胞(bao)。將這些(xie)細胞(bao)懸(xuan)液轉(zhuan)移到含(han)有*培養基的(de)培養瓶中並輕(qing)輕(qing)搖(yao)動以*混(hun)勻(yun)。
5.培養24小(xiao)時後檢查(zha)細胞(bao)狀(zhuang)態並(bing)在(zai)需要(yao)時進行傳(chuan)代(dai)。

　　Q7. 人淋(lin)巴(ba)管(guan)內(nei)皮細胞(bao) 培養用(yong)液(ye)pH對(dui)細胞(bao)生(sheng)長的(de)影(ying)響

　　由於(yu)，大多數細胞(bao)適宜pH為7.2~7.4，偏(pian)離(li)此範(fan)圍對(dui)細胞(bao)將產生(sheng)有(you)害(hai)的(de)影(ying)響。各(ge)種細胞(bao)對(dui)pH的(de)要(yao)求(qiu)也不*相同(tong)，原代(dai)培養細胞(bao)壹般對(dui)pH變(bian)動(dong)耐受差(cha)，無限細胞(bao)系(xi)耐受力強。

　　但(dan)總(zong)體來說，細胞(bao)耐酸性比耐堿(jian)性強(qiang)壹些，偏酸環境(jing)中更利(li)於(yu)細胞(bao)生(sheng)長。因(yin)此，我們在(zai)配(pei)制培養用(yong)液(ye)時，可(ke)把液(ye)體的(de)pH稍(shao)微(wei)調得偏酸壹些。液體在(zai)經(jing)過(guo)0.10um或0.22um濾(lv)膜(mo)過(guo)濾(lv)時，溶液的(de)pH還(hai)會向上(shang)浮(fu)動0.2左(zuo)右。

　　人淋(lin)巴(ba)管(guan)內(nei)皮細胞(bao)質(zhi)量(liang)可(ke)靠，售後有(you)保障（編(bian)輯(ji)：tanxi）