人(ren)腦微(wei)血(xue)管(guan)平滑肌細(xi)胞_細胞株

非(fei)常讓人(ren)著迷(mi)的(de)實驗(yan)，其(qi)成(cheng)功關(guan)鍵之壹是(shi)選擇(ze)可(ke)信的(de)實驗(yan)試(shi)劑。

我司細(xi)胞近3000種(zhong)，來(lai)源(yuan)於(yu)美(mei)國ATCC,細(xi)胞都是(shi)經(jing)過嚴(yan)格(ge)質量控制(zhi)，在(zai)中(zhong)國大(da)陸(lu)努力(li)搭(da)建(jian)正(zheng)牌(pai)細胞與(yu)國內(nei)廣(guang)大(da)科(ke)研(yan)人(ren)員(yuan)之間(jian)的(de)溝(gou)通橋(qiao)梁(liang)。為(wei)您(nin)提供人(ren)腦微(wei)血(xue)管(guan)平滑肌細(xi)胞外，還(hai)有(you)更多相關(guan)實驗(yan)產(chan)品，標準(zhun)品，細胞株和(he)實驗(yan)技(ji)術服務等等前(qian)期(qi)後(hou)續(xu)服務。

人(ren)腦微(wei)血(xue)管(guan)平滑肌細(xi)胞的(de)產(chan)品介紹

人(ren)腦微(wei)血(xue)管(guan)平滑肌細(xi)胞由我司*銷(xiao)售(shou)人(ren)腦微(wei)血(xue)管(guan)平滑肌細(xi)胞。

人(ren)腦微(wei)血(xue)管(guan)平滑肌細(xi)胞細胞株

　　Q1. 人(ren)腦微(wei)血(xue)管(guan)平滑肌細(xi)胞液(ye)體(ti)培養(yang)基(ji)的(de)保(bao)存是(shi)冷藏好？還(hai)是(shi)冷凍好？

　　要冷藏！！因為(wei)液(ye)體(ti)培養(yang)基(ji)經(jing)冷凍後(hou)再(zai)經(jing)溶(rong)化(hua)時，其(qi)溶(rong)液(ye)的(de)pH值(zhi)會(hui)發(fa)生(sheng)改(gai)變(bian)，溶(rong)液(ye)往(wang)往(wang)變(bian)堿(jian)，某(mou)些成(cheng)分(fen)溶(rong)解也會(hui)受到(dao)影(ying)響(xiang)對(dui)細(xi)胞生(sheng)長不利。故液(ye)體(ti)培養(yang)基(ji)壹定要存放(fang)在(zai)冷藏箱(xiang)中(zhong)，通(tong)常液(ye)體(ti)培養(yang)基(ji)在(zai)冷藏條(tiao)件(jian)下可(ke)存放(fang)6個(ge)月 ~ 壹年。

　　Q2.人(ren)腦微(wei)血(xue)管(guan)平滑肌細(xi)胞 液(ye)體(ti)培養(yang)基(ji)中(zhong)谷氨酰(xian)胺的(de)作(zuo)用(yong)，及使用(yong)方法(fa)。

　　幾(ji)乎(hu)所(suo)有(you)的(de)細(xi)胞對谷氨酰(xian)胺有(you)較高的(de)要(yao)求，細(xi)胞需要(yao)谷氨酰(xian)胺合(he)成(cheng)蛋(dan)白質，在(zai)缺(que)少(shao)谷氨酰(xian)胺時，細(xi)胞生(sheng)長不良(liang)而死(si)亡(wang)。所(suo)以(yi)，各種(zhong)培養(yang)液(ye)中(zhong)都(dou)含(han)有(you)較大(da)量的(de)谷氨酰(xian)胺。谷氨酰(xian)胺在(zai)溶(rong)液(ye)中(zhong)很(hen)不(bu)穩(wen)定，應(ying)置(zhi)-20 ?C冰(bing)凍(dong)保存，用(yong)前(qian)加(jia)入(ru)培養(yang)基(ji)中(zhong)。加(jia)有(you)谷氨酰(xian)胺的(de)液(ye)體(ti)培養(yang)基(ji)4 ?C 冰(bing)箱(xiang)儲存(cun)兩(liang)周以(yi)上(shang)時，應(ying)重(zhong)新(xin)加(jia)入(ru)原(yuan)來(lai)量的(de)谷氨酰(xian)胺。基(ji)礎醫(yi)學(xue)細(xi)胞中(zhong)心在(zai)其(qi)服務項目中(zhong)配制(zhi)分(fen)裝(zhuang)了(le)高濃(nong)度（100倍(bei)）的(de)谷氨酰(xian)胺溶(rong)液(ye)（1ml/支）。每(mei)支1ml的(de)谷氨酰(xian)胺加到(dao)99ml*培養(yang)基(ji)中(zhong)，其(qi)終(zhong)濃(nong)度為(wei)2mM/ml培養(yang)基(ji)。包裝(zhuang)為(wei)粉紅色(se)，-24?C保存(cun)。

　　Q3.細(xi)胞計數(shu)及存(cun)活(huo)測試(shi)
1、原(yuan)理(li)：
(1)計(ji)算細胞數(shu)目(mu)可(ke)用(yong)血球(qiu)計(ji)數(shu)盤(pan)或是(shi)Coultercounter粒(li)子(zi)計(ji)數(shu)器自動計(ji)數(shu)。
(2)血(xue)球(qiu)計(ji)數(shu)盤(pan)壹般有(you)二(er)個(ge)chambers，每(mei)個(ge)chamber中(zhong)細(xi)刻(ke)9個(ge)1mm2大(da)正(zheng)方(fang)形，其(qi)中(zhong)4個(ge)角落(luo)之正(zheng)方(fang)形再細(xi)刻(ke)16個(ge)小格(ge)，深(shen)度均(jun)為(wei)0.1mm。當(dang)chamber上(shang)方(fang)蓋上(shang)蓋(gai)玻片(pian)後(hou)，每(mei)個(ge)大(da)正(zheng)方(fang)形之體積為(wei)1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使用(yong)時，計(ji)數(shu)每(mei)個(ge)大(da)正(zheng)方(fang)形內之細胞數(shu)目(mu)，乘(cheng)以(yi)稀釋倍(bei)數(shu)，再(zai)乘(cheng)以(yi)104，即(ji)為(wei)每(mei)ml中(zhong)之細胞數(shu)目(mu)。
(3)存(cun)活(huo)測試(shi)之步驟(zhou)為(wei)dyeexclusion，利(li)用(yong)染料會(hui)滲入(ru)死(si)細(xi)胞中(zhong)而(er)呈(cheng)色(se)，而活(huo)細(xi)胞因細(xi)胞膜(mo)完(wan)整(zheng)，染料無法(fa)滲入(ru)而(er)不(bu)會(hui)呈色(se)。壹般使用(yong)藍色(se)之trypan blue染料，如(ru)果細胞不易(yi)吸(xi)收trypan blue，則(ze)用(yong)紅色(se)之Erythrosin bluish。計算細胞活率：活(huo)細胞數(shu)/(活(huo)細(xi)胞數(shu)+死(si)細(xi)胞數(shu))×100%。計(ji)數(shu)應(ying)在(zai)臺(tai)盼(pan)蘭(lan)染色(se)後(hou)數(shu)分(fen)鐘(zhong)內(nei)完成(cheng)，隨時間(jian)延(yan)長，部分(fen)活(huo)細胞也開始(shi)攝取(qu)染料;因為(wei)臺(tai)盼(pan)蘭(lan)對(dui)蛋(dan)白質有(you)很(hen)強(qiang)的(de)親(qin)和力(li)，用(yong)不含(han)血(xue)清(qing)的(de)稀釋液(ye)，可(ke)以(yi)使染色(se)計數(shu)更為(wei)準(zhun)確。

　　Q4.細(xi)胞特性(xing)
在(zai)細(xi)胞培養(yang)之前(qian)，我們要(yao)了(le)解壹下妳(ni)所(suo)要(yao)養(yang)細(xi)胞的(de)基(ji)本(ben)特性，這點可(ke)以(yi)從(cong)細胞的(de)產(chan)品說明書或(huo)者(zhe)從ATCC細胞庫查(zha)詢(xun)。除此(ci)之外我們還(hai)要知道(dao)每(mei)管細(xi)胞的(de)數(shu)量，建議(yi)分(fen)裂或(huo)傳代的(de)比(bi)例(li)，和(he)已知細胞的(de)傳代代次等信息。

　　Q5.準(zhun)備(bei)培養(yang)基(ji)
復蘇(su)細胞時需(xu)要準(zhun)備(bei)合(he)適(shi)的(de)培養(yang)基(ji)，血清(qing)和細胞生(sheng)長所(suo)需(xu)的(de)添(tian)加劑。大(da)部(bu)分(fen)培養(yang)細(xi)胞所(suo)用(yong)的(de)培養(yang)體(ti)系(xi)，可(ke)以(yi)在(zai)訂(ding)購(gou)細(xi)胞系時獲(huo)得。
雖然(ran)大(da)多數(shu)細(xi)胞系可(ke)以(yi)在(zai)不(bu)止(zhi)壹種培養(yang)基(ji)中(zhong)生(sheng)長，但是(shi)當(dang)培養(yang)基(ji)改變(bian)時，細(xi)胞的(de)性(xing)質也會(hui)變(bian)化(hua)。因此(ci)，使用(yong)細胞庫推(tui)薦(jian)的(de)培養(yang)基(ji)來(lai)培養(yang)細(xi)胞會(hui)獲(huo)得的(de)效(xiao)果。

　　Q6.開啟(qi)凍(dong)存管
1.準備(bei)壹個(ge)培養(yang)瓶，加(jia)入(ru)適(shi)宜(yi)細胞培養(yang)的(de)培養(yang)基(ji)，液(ye)體(ti)體積按(an)照(zhao)說明書的(de)推(tui)薦配置，並平衡培養(yang)基(ji)的(de)溫(wen)度和(he)pH（CO2）。　
2.在(zai)37℃水(shui)浴中(zhong)或(huo)細(xi)胞的(de)正(zheng)常生(sheng)長溫度下將凍存(cun)管輕(qing)輕(qing)搖(yao)動(dong)。解凍(dong)要(yao)快，約2分(fen)鐘(zhong)或(huo)直(zhi)到(dao)冰(bing)晶(jing)融(rong)化(hua)即(ji)可(ke)。
3.從水(shui)浴中(zhong)取(qu)出(chu)凍(dong)存管並用(yong)浸(jin)泡或(huo)噴灑70%乙醇(chun)的(de)方(fang)式(shi)來(lai)消毒。進(jin)壹步的(de)操(cao)作均(jun)需在(zai)無菌操(cao)作(zuo)臺(tai)中(zhong)嚴(yan)格(ge)無菌條(tiao)件(jian)下進(jin)行。
4.擰(ning)開凍(dong)存管(guan)的(de)管(guan)帽並將內容(rong)物轉移(yi)到(dao)壹個(ge)含(han)有(you)9 ml推(tui)薦(jian)培養(yang)基(ji)的(de)無菌離心管(guan)中(zhong)。通(tong)過(guo)溫(wen)和離心（125×g 10 min）除(chu)去(qu)冷凍保(bao)護(hu)劑（DMSO）。棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)，並用(yong)1或2 ml*培養(yang)基(ji)重懸(xuan)細胞。將這些細胞懸液(ye)轉(zhuan)移到(dao)含(han)有(you)*培養(yang)基(ji)的(de)培養(yang)瓶中(zhong)並輕(qing)輕(qing)搖(yao)動(dong)以(yi)*混勻(yun)。
5.培養(yang)24小時後(hou)檢(jian)查(zha)細胞狀(zhuang)態(tai)並在(zai)需(xu)要(yao)時進(jin)行傳代。

　　Q7. 人(ren)腦微(wei)血(xue)管(guan)平滑肌細(xi)胞 培養(yang)用(yong)液(ye)pH對(dui)細胞生(sheng)長的(de)影(ying)響

　　由(you)於，大(da)多數(shu)細(xi)胞適宜(yi)pH為(wei)7.2~7.4，偏(pian)離此(ci)範(fan)圍對細(xi)胞將產生(sheng)有(you)害(hai)的(de)影(ying)響。各種(zhong)細胞對pH的(de)要(yao)求也不*相同(tong)，原(yuan)代培養(yang)細(xi)胞壹般對pH變(bian)動耐受差(cha)，無限細(xi)胞系耐受力(li)強。

　　但總(zong)體(ti)來(lai)說，細(xi)胞耐酸性(xing)比耐堿(jian)性(xing)強(qiang)壹些，偏酸(suan)環(huan)境中(zhong)更利於(yu)細胞生(sheng)長。因此(ci)，我們在(zai)配制(zhi)培養(yang)用(yong)液(ye)時，可(ke)把(ba)液(ye)體(ti)的(de)pH稍微調(tiao)得偏(pian)酸(suan)壹些。液(ye)體(ti)在(zai)經(jing)過0.10um或(huo)0.22um濾膜(mo)過(guo)濾(lv)時，溶(rong)液(ye)的(de)pH還(hai)會(hui)向上(shang)浮動0.2左右(you)。

　　人(ren)腦微(wei)血(xue)管(guan)平滑肌細(xi)胞質量可(ke)靠(kao)，售(shou)後(hou)有(you)保(bao)障(zhang)（編(bian)輯：tanxi）