人腦星形(xing)膠質(zhi)母細胞(bao)瘤(liu)_ 實(shi)驗(yan)

非(fei)常(chang)讓(rang)人著(zhe)迷(mi)的實驗(yan)，其成(cheng)功(gong)關(guan)鍵(jian)之壹是選(xuan)擇可(ke)信(xin)的實驗(yan)試(shi)劑。

我(wo)司細(xi)胞(bao)近3000種(zhong)，來源(yuan)於美國(guo)ATCC,細(xi)胞(bao)都是經過嚴(yan)格(ge)質(zhi)量控(kong)制(zhi)，在中(zhong)國(guo)大(da)陸努力(li)搭建正(zheng)牌(pai)細(xi)胞(bao)與(yu)國(guo)內(nei)廣大(da)科研人員(yuan)之間(jian)的溝通橋梁(liang)。為您(nin)提供人腦星形(xing)膠質(zhi)母細胞(bao)瘤(liu)外(wai)，還有更(geng)多(duo)相關實(shi)驗(yan)產(chan)品(pin)，標(biao)準(zhun)品(pin)，細胞(bao)株(zhu)和實(shi)驗(yan)技術服務(wu)等等前期後續服務。

人腦星形(xing)膠質(zhi)母細胞(bao)瘤(liu)的產品(pin)介紹

人腦星形(xing)膠質(zhi)母細胞(bao)瘤(liu)由(you)我(wo)司*銷(xiao)售人腦星形(xing)膠質(zhi)母細胞(bao)瘤(liu)。

人腦星形(xing)膠質(zhi)母細胞(bao)瘤(liu)細(xi)胞(bao)株(zhu)

　　Q1. 人腦星形(xing)膠質(zhi)母細胞(bao)瘤(liu)液(ye)體培養(yang)基的保存(cun)是冷藏好(hao)？還(hai)是冷凍(dong)好？

　　要冷藏！！因(yin)為液體培養(yang)基經冷凍(dong)後再經溶(rong)化(hua)時(shi)，其溶(rong)液(ye)的pH值會(hui)發(fa)生(sheng)改(gai)變，溶(rong)液(ye)往(wang)往(wang)變堿，某些(xie)成(cheng)分溶(rong)解(jie)也(ye)會受到(dao)影響對細(xi)胞(bao)生(sheng)長不(bu)利。故(gu)液體培養(yang)基壹定要存(cun)放在冷(leng)藏箱(xiang)中(zhong)，通常(chang)液體培養(yang)基在冷(leng)藏條(tiao)件下(xia)可存(cun)放6個(ge)月 ~ 壹年(nian)。

　　Q2.人腦星形(xing)膠質(zhi)母細胞(bao)瘤(liu) 液(ye)體培養(yang)基中(zhong)谷(gu)氨酰胺的作用，及(ji)使(shi)用(yong)方(fang)法。

　　幾乎所(suo)有的細胞(bao)對(dui)谷(gu)氨酰胺有較(jiao)高的要求，細(xi)胞(bao)需要谷(gu)氨酰胺合成(cheng)蛋(dan)白(bai)質(zhi)，在缺(que)少谷(gu)氨酰胺時(shi)，細胞(bao)生(sheng)長不(bu)良(liang)而(er)死亡(wang)。所(suo)以(yi)，各種(zhong)培養(yang)液中(zhong)都含(han)有較(jiao)大(da)量的谷(gu)氨酰胺。谷(gu)氨酰胺在溶(rong)液(ye)中(zhong)很(hen)不(bu)穩(wen)定，應(ying)置-20 ?C冰凍(dong)保存(cun)，用前加入培養(yang)基中(zhong)。加有谷(gu)氨酰胺的液體培養(yang)基4 ?C 冰箱(xiang)儲(chu)存(cun)兩周以(yi)上時(shi)，應(ying)重新加入原來量的谷(gu)氨酰胺。基礎(chu)醫學細(xi)胞(bao)中(zhong)心(xin)在其服務(wu)項目(mu)中(zhong)配(pei)制(zhi)分裝(zhuang)了(le)高濃度(du)（100倍）的谷(gu)氨酰胺溶(rong)液(ye)（1ml/支(zhi)）。每(mei)支(zhi)1ml的谷(gu)氨酰胺加到99ml*培養(yang)基中(zhong)，其終濃(nong)度(du)為2mM/ml培養(yang)基。包(bao)裝(zhuang)為粉紅色(se)，-24?C保存(cun)。

　　Q3.細胞(bao)計(ji)數及(ji)存(cun)活測試(shi)
1、原理(li)：
(1)計(ji)算細(xi)胞(bao)數(shu)目可(ke)用(yong)血球(qiu)計(ji)數盤(pan)或(huo)是(shi)Coultercounter粒(li)子(zi)計(ji)數器(qi)自動計(ji)數。
(2)血球(qiu)計(ji)數盤(pan)壹般有二個(ge)chambers，每(mei)個(ge)chamber中(zhong)細刻9個(ge)1mm2大(da)正(zheng)方(fang)形(xing)，其中(zhong)4個(ge)角落之正(zheng)方(fang)形(xing)再細(xi)刻16個(ge)小格(ge)，深(shen)度(du)均為0.1mm。當(dang)chamber上方(fang)蓋(gai)上蓋(gai)玻片後，每(mei)個(ge)大(da)正(zheng)方(fang)形(xing)之體積為1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使(shi)用(yong)時(shi)，計(ji)數每(mei)個(ge)大(da)正(zheng)方(fang)形(xing)內(nei)之細(xi)胞(bao)數(shu)目，乘(cheng)以(yi)稀(xi)釋(shi)倍數(shu)，再乘(cheng)以104，即為每(mei)ml中(zhong)之細(xi)胞(bao)數(shu)目。
(3)存(cun)活測試(shi)之步(bu)驟(zhou)為dyeexclusion，利用(yong)染(ran)料(liao)會滲(shen)入死(si)細胞(bao)中(zhong)而(er)呈色(se)，而(er)活細胞(bao)因(yin)細胞(bao)膜完(wan)整，染(ran)料(liao)無(wu)法滲(shen)入而(er)不(bu)會(hui)呈色(se)。壹般使(shi)用(yong)藍(lan)色(se)之trypan blue染(ran)料(liao)，如果(guo)細(xi)胞(bao)不(bu)易吸收(shou)trypan blue，則(ze)用紅(hong)色(se)之Erythrosin bluish。計(ji)算細(xi)胞(bao)活率：活細胞(bao)數(shu)/(活細胞(bao)數(shu)+死細(xi)胞(bao)數(shu))×100%。計(ji)數應(ying)在臺(tai)盼(pan)蘭(lan)染(ran)色(se)後數分鐘(zhong)內(nei)完(wan)成(cheng)，隨(sui)時(shi)間(jian)延(yan)長(chang)，部分活細胞(bao)也(ye)開始(shi)攝(she)取染(ran)料(liao);因為臺(tai)盼(pan)蘭(lan)對蛋白質有很(hen)強(qiang)的親和(he)力(li)，用(yong)不(bu)含(han)血清的稀(xi)釋(shi)液，可(ke)以使(shi)染(ran)色(se)計(ji)數更(geng)為準(zhun)確(que)。

　　Q4.細胞(bao)特(te)性
在細(xi)胞(bao)培養(yang)之前，我(wo)們(men)要了(le)解壹下(xia)妳所(suo)要養(yang)細胞(bao)的基本(ben)特性(xing)，這(zhe)點(dian)可(ke)以從細(xi)胞(bao)的產品(pin)說明(ming)書或(huo)者(zhe)從(cong)ATCC細胞(bao)庫(ku)查詢。除(chu)此(ci)之外(wai)我(wo)們(men)還(hai)要知(zhi)道每(mei)管(guan)細(xi)胞(bao)的數量，建議分裂(lie)或(huo)傳代(dai)的比例(li)，和(he)已知(zhi)細胞(bao)的傳代(dai)代次(ci)等信(xin)息。

　　Q5.準(zhun)備(bei)培養(yang)基
復蘇細(xi)胞(bao)時(shi)需要準(zhun)備(bei)合適(shi)的培養(yang)基，血清和細(xi)胞(bao)生(sheng)長所(suo)需的添加劑。大(da)部分培養(yang)細胞(bao)所(suo)用(yong)的培養(yang)體系(xi)，可(ke)以(yi)在訂(ding)購(gou)細胞(bao)系(xi)時(shi)獲得。
雖然大(da)多(duo)數細(xi)胞(bao)系(xi)可(ke)以(yi)在不(bu)止(zhi)壹種(zhong)培養(yang)基中(zhong)生長(chang)，但(dan)是當(dang)培養(yang)基改(gai)變時(shi)，細胞(bao)的性質(zhi)也(ye)會變化(hua)。因(yin)此(ci)，使(shi)用(yong)細(xi)胞(bao)庫(ku)推(tui)薦的培養(yang)基來培養(yang)細胞(bao)會(hui)獲得(de)的效果(guo)。

　　Q6.開啟凍存(cun)管
1.準(zhun)備(bei)壹個(ge)培養(yang)瓶，加入適(shi)宜細(xi)胞(bao)培養(yang)的培養(yang)基，液體體積按照說明(ming)書的推(tui)薦配(pei)置，並平衡培養(yang)基的溫度(du)和pH（CO2）。　
2.在37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)或細(xi)胞(bao)的正(zheng)常(chang)生長(chang)溫(wen)度(du)下(xia)將(jiang)凍存(cun)管輕輕搖動。解凍要快(kuai)，約(yue)2分鐘(zhong)或(huo)直到冰晶(jing)融化(hua)即可(ke)。
3.從水(shui)浴(yu)中(zhong)取出(chu)凍(dong)存(cun)管並用(yong)浸泡(pao)或噴(pen)灑70%乙(yi)醇的方(fang)式來消(xiao)毒。進壹步的操(cao)作均需在無(wu)菌操(cao)作臺(tai)中(zhong)嚴格(ge)無(wu)菌條件下(xia)進行。
4.擰(ning)開凍存(cun)管的管帽(mao)並將(jiang)內(nei)容物轉移到(dao)壹個(ge)含(han)有9 ml推(tui)薦培養(yang)基的無(wu)菌離心(xin)管(guan)中(zhong)。通過(guo)溫(wen)和(he)離心(xin)（125×g 10 min）除(chu)去冷(leng)凍保(bao)護(hu)劑（DMSO）。棄(qi)去上清，並用(yong)1或2 ml*培養(yang)基重懸(xuan)細(xi)胞(bao)。將(jiang)這(zhe)些(xie)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)轉移到(dao)含(han)有*培養(yang)基的培養(yang)瓶中(zhong)並輕輕搖動以*混(hun)勻。
5.培養(yang)24小時(shi)後檢查細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)並在需要時(shi)進行傳(chuan)代。

　　Q7. 人腦星形(xing)膠質(zhi)母細胞(bao)瘤(liu) 培養(yang)用液pH對細(xi)胞(bao)生(sheng)長的影響

　　由(you)於，大(da)多(duo)數細(xi)胞(bao)適(shi)宜pH為7.2~7.4，偏離此(ci)範(fan)圍(wei)對細胞(bao)將(jiang)產生(sheng)有害的影響。各種(zhong)細(xi)胞(bao)對(dui)pH的要求也(ye)不(bu)*相同，原代(dai)培養(yang)細胞(bao)壹般對(dui)pH變動耐(nai)受差(cha)，無(wu)限細(xi)胞(bao)系(xi)耐(nai)受力(li)強(qiang)。

　　但(dan)總(zong)體來說，細胞(bao)耐(nai)酸(suan)性比(bi)耐(nai)堿性強(qiang)壹些(xie)，偏酸環境中(zhong)更(geng)利於(yu)細胞(bao)生(sheng)長。因(yin)此(ci)，我(wo)們(men)在配(pei)制(zhi)培養(yang)用液時(shi)，可把液(ye)體的pH稍微(wei)調得(de)偏酸壹些(xie)。液體在經過0.10um或(huo)0.22um濾膜過濾時(shi)，溶(rong)液(ye)的pH還會(hui)向(xiang)上浮動0.2左右。

　　人腦星形(xing)膠質(zhi)母細胞(bao)瘤(liu)質(zhi)量可(ke)靠(kao)，售後有保障(zhang)（編(bian)輯：tanxi）