人(ren)乳(ru)腺癌組織(zhi)細胞(bao)_ 實(shi)驗(yan)

非常讓(rang)人(ren)著(zhe)迷(mi)的(de)實(shi)驗(yan)，其成(cheng)功關鍵之壹是(shi)選擇可信(xin)的(de)實(shi)驗(yan)試劑(ji)。

我司細胞(bao)近(jin)3000種(zhong)，來(lai)源(yuan)於(yu)美國(guo)ATCC,細胞(bao)都是經過嚴(yan)格質(zhi)量控(kong)制(zhi)，在(zai)中國大陸努力(li)搭(da)建正(zheng)牌(pai)細胞(bao)與國內廣大科(ke)研(yan)人員之間的(de)溝通(tong)橋(qiao)梁(liang)。為您提(ti)供(gong)人乳(ru)腺癌組織細胞(bao)外(wai)，還有更(geng)多(duo)相(xiang)關(guan)實(shi)驗(yan)產(chan)品(pin)，標(biao)準(zhun)品，細胞(bao)株(zhu)和(he)實(shi)驗(yan)技(ji)術(shu)服(fu)務(wu)等等前(qian)期(qi)後續(xu)服(fu)務(wu)。

人乳腺癌(ai)組(zu)織(zhi)細胞(bao)的(de)產(chan)品(pin)介(jie)紹

人(ren)乳(ru)腺癌(ai)組織細胞(bao)由(you)我(wo)司(si)*銷(xiao)售人(ren)乳腺(xian)癌組織細胞(bao)。

人乳腺(xian)癌組(zu)織(zhi)細胞(bao)細胞(bao)株(zhu)

　　Q1. 人(ren)乳(ru)腺(xian)癌組織細胞(bao)液(ye)體(ti)培養(yang)基的(de)保(bao)存(cun)是冷(leng)藏好？還(hai)是冷(leng)凍(dong)好(hao)？

　　要(yao)冷藏！！因(yin)為(wei)液(ye)體(ti)培養(yang)基經冷凍(dong)後再經溶化時，其(qi)溶液(ye)的(de)pH值(zhi)會發(fa)生(sheng)改(gai)變(bian)，溶液(ye)往往變堿，某(mou)些(xie)成(cheng)分溶解也(ye)會受(shou)到(dao)影響(xiang)對(dui)細胞(bao)生(sheng)長(chang)不(bu)利(li)。故(gu)液(ye)體(ti)培養(yang)基壹(yi)定要存放在(zai)冷(leng)藏箱(xiang)中，通常(chang)液(ye)體(ti)培養(yang)基在(zai)冷藏(zang)條件(jian)下可(ke)存放(fang)6個月(yue) ~ 壹年。

　　Q2.人乳腺癌組(zu)織(zhi)細胞(bao) 液(ye)體(ti)培養(yang)基中谷氨(an)酰胺(an)的(de)作用(yong)，及(ji)使(shi)用(yong)方法(fa)。

　　幾(ji)乎(hu)所(suo)有的(de)細胞(bao)對(dui)谷氨(an)酰胺(an)有較高的(de)要(yao)求(qiu)，細胞(bao)需要谷氨(an)酰胺(an)合(he)成(cheng)蛋(dan)白質(zhi)，在缺少谷氨(an)酰胺(an)時，細胞(bao)生(sheng)長(chang)不(bu)良而死亡。所以，各(ge)種(zhong)培養(yang)液(ye)中都含有較大量的(de)谷氨(an)酰胺(an)。谷氨(an)酰胺(an)在(zai)溶液(ye)中很不(bu)穩定，應置-20 ?C冰(bing)凍保(bao)存(cun)，用前(qian)加(jia)入培養(yang)基中。加有谷氨(an)酰胺(an)的(de)液(ye)體(ti)培養(yang)基4 ?C 冰(bing)箱(xiang)儲存兩(liang)周以上時，應(ying)重新加(jia)入(ru)原來(lai)量的(de)谷氨(an)酰胺(an)。基(ji)礎醫(yi)學(xue)細胞(bao)中心在(zai)其(qi)服(fu)務(wu)項(xiang)目中配制(zhi)分(fen)裝(zhuang)了(le)高(gao)濃度(du)（100倍(bei)）的(de)谷氨(an)酰胺(an)溶液(ye)（1ml/支(zhi)）。每(mei)支(zhi)1ml的(de)谷氨(an)酰胺(an)加(jia)到(dao)99ml*培養(yang)基中，其終(zhong)濃度(du)為(wei)2mM/ml培養(yang)基。包(bao)裝(zhuang)為粉(fen)紅色(se)，-24?C保存(cun)。

　　Q3.細胞(bao)計(ji)數(shu)及存活測(ce)試(shi)
1、原理(li)：
(1)計(ji)算(suan)細胞(bao)數(shu)目(mu)可(ke)用(yong)血球計(ji)數(shu)盤或是Coultercounter粒子(zi)計(ji)數(shu)器自動計(ji)數(shu)。
(2)血球計(ji)數(shu)盤壹般有二(er)個chambers，每(mei)個chamber中細刻9個1mm2大正(zheng)方(fang)形(xing)，其中4個角落(luo)之正(zheng)方(fang)形(xing)再細刻16個小格(ge)，深(shen)度(du)均為(wei)0.1mm。當chamber上(shang)方(fang)蓋(gai)上(shang)蓋(gai)玻片(pian)後(hou)，每(mei)個大正(zheng)方(fang)形(xing)之體(ti)積為1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使(shi)用(yong)時，計(ji)數(shu)每(mei)個大正(zheng)方(fang)形(xing)內之細胞(bao)數(shu)目(mu)，乘以稀釋(shi)倍(bei)數(shu)，再乘以104，即(ji)為(wei)每(mei)ml中之細胞(bao)數(shu)目(mu)。
(3)存(cun)活(huo)測試之步驟(zhou)為dyeexclusion，利(li)用染料(liao)會滲入死(si)細胞(bao)中而呈色(se)，而活細胞(bao)因(yin)細胞(bao)膜完(wan)整(zheng)，染料(liao)無(wu)法(fa)滲入而不(bu)會呈色(se)。壹般(ban)使(shi)用(yong)藍色(se)之trypan blue染料(liao)，如果細胞(bao)不(bu)易吸收trypan blue，則用(yong)紅色(se)之Erythrosin bluish。計(ji)算(suan)細胞(bao)活(huo)率：活(huo)細胞(bao)數(shu)/(活(huo)細胞(bao)數(shu)+死(si)細胞(bao)數(shu))×100%。計(ji)數(shu)應在臺盼(pan)蘭染色(se)後數(shu)分(fen)鐘內完(wan)成(cheng)，隨時間(jian)延(yan)長(chang)，部分活細胞(bao)也(ye)開(kai)始(shi)攝(she)取染料(liao);因為(wei)臺盼(pan)蘭對蛋(dan)白質(zhi)有很強的(de)親(qin)和(he)力，用(yong)不(bu)含血清的(de)稀(xi)釋(shi)液(ye)，可(ke)以使(shi)染色(se)計(ji)數(shu)更(geng)為(wei)準確(que)。

　　Q4.細胞(bao)特(te)性(xing)
在(zai)細胞(bao)培養(yang)之前(qian)，我(wo)們要(yao)了(le)解(jie)壹下(xia)妳(ni)所(suo)要(yao)養(yang)細胞(bao)的(de)基(ji)本特性(xing)，這點可(ke)以從細胞(bao)的(de)產(chan)品(pin)說(shuo)明(ming)書或者從ATCC細胞(bao)庫查詢。除(chu)此(ci)之外(wai)我們還要知(zhi)道每(mei)管細胞(bao)的(de)數(shu)量，建議(yi)分(fen)裂或傳代的(de)比(bi)例(li)，和已知細胞(bao)的(de)傳(chuan)代(dai)代次等信(xin)息。

　　Q5.準備培養(yang)基
復蘇細胞(bao)時需要準備合適(shi)的(de)培養(yang)基，血清和細胞(bao)生(sheng)長(chang)所需的(de)添(tian)加(jia)劑。大部分培養(yang)細胞(bao)所(suo)用(yong)的(de)培養(yang)體(ti)系，可以在訂(ding)購(gou)細胞(bao)系(xi)時獲(huo)得(de)。
雖然(ran)大多(duo)數(shu)細胞(bao)系(xi)可(ke)以在不(bu)止(zhi)壹(yi)種(zhong)培養(yang)基中生長(chang)，但是當培養(yang)基改(gai)變(bian)時，細胞(bao)的(de)性(xing)質(zhi)也(ye)會變(bian)化。因此(ci)，使(shi)用(yong)細胞(bao)庫推薦的(de)培養(yang)基來(lai)培養(yang)細胞(bao)會(hui)獲(huo)得(de)的(de)效(xiao)果。

　　Q6.開(kai)啟(qi)凍存管(guan)
1.準備壹個培養(yang)瓶，加入(ru)適(shi)宜細胞(bao)培養(yang)的(de)培養(yang)基，液(ye)體(ti)體(ti)積按照(zhao)說(shuo)明書的(de)推薦配(pei)置，並平衡(heng)培養(yang)基的(de)溫(wen)度(du)和pH（CO2）。　
2.在(zai)37℃水(shui)浴(yu)中或細胞(bao)的(de)正(zheng)常(chang)生(sheng)長(chang)溫度(du)下將(jiang)凍存管(guan)輕(qing)輕搖(yao)動(dong)。解凍要(yao)快(kuai)，約(yue)2分鐘或直到(dao)冰(bing)晶融化即(ji)可(ke)。
3.從水(shui)浴(yu)中取出凍存管並用浸泡或噴灑70%乙(yi)醇(chun)的(de)方(fang)式(shi)來消(xiao)毒。進(jin)壹步的(de)操(cao)作均需在無(wu)菌(jun)操作臺(tai)中嚴格(ge)無(wu)菌(jun)條件(jian)下進(jin)行。
4.擰(ning)開(kai)凍(dong)存管的(de)管(guan)帽(mao)並將內容(rong)物(wu)轉(zhuan)移到(dao)壹個含(han)有9 ml推薦培養(yang)基的(de)無(wu)菌(jun)離心管中。通過溫(wen)和離(li)心(xin)（125×g 10 min）除(chu)去冷(leng)凍保護劑（DMSO）。棄去上清，並用1或2 ml*培養(yang)基重(zhong)懸(xuan)細胞(bao)。將(jiang)這(zhe)些(xie)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移到(dao)含有*培養(yang)基的(de)培養(yang)瓶中並輕輕(qing)搖(yao)動以*混勻(yun)。
5.培養(yang)24小時後(hou)檢查細胞(bao)狀(zhuang)態並在需要時進(jin)行傳代(dai)。

　　Q7. 人(ren)乳(ru)腺(xian)癌(ai)組織(zhi)細胞(bao) 培養(yang)用液(ye)pH對(dui)細胞(bao)生(sheng)長(chang)的(de)影(ying)響(xiang)

　　由(you)於(yu)，大多(duo)數(shu)細胞(bao)適(shi)宜pH為(wei)7.2~7.4，偏離(li)此(ci)範圍(wei)對細胞(bao)將(jiang)產(chan)生(sheng)有害的(de)影(ying)響(xiang)。各(ge)種(zhong)細胞(bao)對(dui)pH的(de)要(yao)求(qiu)也(ye)不(bu)*相同，原代(dai)培養(yang)細胞(bao)壹(yi)般(ban)對(dui)pH變(bian)動耐受差(cha)，無(wu)限(xian)細胞(bao)系(xi)耐(nai)受(shou)力(li)強。

　　但總體(ti)來說，細胞(bao)耐(nai)酸(suan)性比(bi)耐(nai)堿性(xing)強壹(yi)些(xie)，偏酸(suan)環境(jing)中更(geng)利(li)於(yu)細胞(bao)生(sheng)長(chang)。因此(ci)，我們(men)在配(pei)制(zhi)培養(yang)用液(ye)時，可(ke)把液(ye)體(ti)的(de)pH稍微調得(de)偏酸(suan)壹些(xie)。液(ye)體(ti)在經過0.10um或0.22um濾膜過濾時，溶液(ye)的(de)pH還(hai)會(hui)向上(shang)浮(fu)動0.2左右(you)。

　　人乳腺(xian)癌(ai)組(zu)織(zhi)細胞(bao)質(zhi)量可(ke)靠，售後(hou)有保障(zhang)（編輯：tanxi）