人(ren)羊(yang)膜(mo)間(jian)充質基(ji)質細(xi)胞(bao) 7140_復蘇的

非常(chang)讓人(ren)著(zhe)迷的實(shi)驗(yan)，其成(cheng)功(gong)關鍵(jian)之壹是選擇可信(xin)的(de)實驗(yan)試劑。

我司(si)細(xi)胞(bao)近3000種，來源於(yu)美(mei)國ATCC,細(xi)胞(bao)都是經過(guo)嚴格質量(liang)控制，在中(zhong)國大陸努力(li)搭建(jian)正(zheng)牌(pai)細(xi)胞(bao)與國內廣(guang)大科研人(ren)員之間(jian)的溝(gou)通(tong)橋(qiao)梁(liang)。為(wei)您(nin)提供人(ren)羊(yang)膜(mo)間(jian)充質基(ji)質細(xi)胞(bao) 7140外，還有更多(duo)相關(guan)實驗(yan)產品，標(biao)準品，細(xi)胞(bao)株(zhu)和實(shi)驗(yan)技(ji)術服務等等前(qian)期後(hou)續(xu)服(fu)務。

人(ren)羊(yang)膜(mo)間(jian)充質基(ji)質細(xi)胞(bao) 7140的產品介紹(shao)

人(ren)羊(yang)膜(mo)間(jian)充質基(ji)質細(xi)胞(bao) 7140由(you)我司(si)*銷售人(ren)羊(yang)膜(mo)間(jian)充質基(ji)質細(xi)胞(bao) 7140。

人(ren)羊(yang)膜(mo)間(jian)充質基(ji)質細(xi)胞(bao) 7140細(xi)胞(bao)株(zhu)

　　Q1. 人(ren)羊(yang)膜(mo)間(jian)充質基(ji)質細(xi)胞(bao) 7140液體(ti)培養(yang)基的(de)保存(cun)是冷藏(zang)好(hao)？還是冷凍好？

　　要冷藏(zang)！！因為(wei)液體(ti)培養(yang)基經(jing)冷凍後(hou)再(zai)經(jing)溶(rong)化時，其(qi)溶(rong)液(ye)的(de)pH值(zhi)會發生改變，溶(rong)液(ye)往往變堿(jian)，某(mou)些(xie)成分(fen)溶(rong)解(jie)也會受到影(ying)響對(dui)細(xi)胞(bao)生長不(bu)利(li)。故液(ye)體(ti)培養(yang)基壹定要存放在冷藏(zang)箱(xiang)中(zhong)，通(tong)常(chang)液(ye)體(ti)培養(yang)基在冷藏(zang)條(tiao)件下可存(cun)放6個月(yue) ~ 壹年。

　　Q2.人(ren)羊(yang)膜(mo)間(jian)充質基(ji)質細(xi)胞(bao) 7140 液體(ti)培養(yang)基中(zhong)谷(gu)氨酰胺的(de)作(zuo)用，及(ji)使(shi)用方(fang)法(fa)。

　　幾(ji)乎所有的細(xi)胞(bao)對谷(gu)氨酰胺有(you)較(jiao)高(gao)的要求，細(xi)胞(bao)需要谷(gu)氨酰胺合(he)成蛋(dan)白(bai)質，在缺(que)少(shao)谷(gu)氨酰胺時，細(xi)胞(bao)生長不(bu)良而死亡。所以，各(ge)種(zhong)培養(yang)液中(zhong)都含(han)有(you)較(jiao)大(da)量(liang)的(de)谷(gu)氨酰胺。谷(gu)氨酰胺在溶(rong)液(ye)中(zhong)很(hen)不(bu)穩(wen)定，應置(zhi)-20 ?C冰凍保存(cun)，用前(qian)加入培養(yang)基中(zhong)。加有谷(gu)氨酰胺的(de)液(ye)體(ti)培養(yang)基4 ?C 冰(bing)箱(xiang)儲(chu)存(cun)兩周以(yi)上時，應重(zhong)新加入原來量的谷(gu)氨酰胺。基(ji)礎(chu)醫(yi)學(xue)細(xi)胞(bao)中心在其(qi)服(fu)務項目中配制分(fen)裝了(le)高(gao)濃(nong)度(du)（100倍）的谷(gu)氨酰胺溶(rong)液(ye)（1ml/支(zhi)）。每(mei)支(zhi)1ml的谷(gu)氨酰胺加到99ml*培養(yang)基中(zhong)，其終(zhong)濃(nong)度(du)為(wei)2mM/ml培養(yang)基。包(bao)裝為(wei)粉紅(hong)色，-24?C保存(cun)。

　　Q3.細(xi)胞(bao)計(ji)數(shu)及(ji)存(cun)活(huo)測試
1、原理：
(1)計(ji)算細(xi)胞(bao)數目可用血(xue)球(qiu)計(ji)數(shu)盤(pan)或是Coultercounter粒子(zi)計(ji)數(shu)器(qi)自動計(ji)數(shu)。
(2)血(xue)球(qiu)計(ji)數(shu)盤(pan)壹般有二個chambers，每(mei)個chamber中(zhong)細(xi)刻(ke)9個1mm2大(da)正(zheng)方(fang)形(xing)，其中(zhong)4個角(jiao)落之正(zheng)方(fang)形(xing)再(zai)細(xi)刻(ke)16個小(xiao)格(ge)，深(shen)度(du)均為(wei)0.1mm。當chamber上方(fang)蓋(gai)上蓋玻(bo)片(pian)後(hou)，每(mei)個大(da)正(zheng)方(fang)形(xing)之體(ti)積為(wei)1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使(shi)用時，計(ji)數(shu)每(mei)個大(da)正(zheng)方(fang)形(xing)內之細(xi)胞(bao)數目，乘(cheng)以(yi)稀(xi)釋倍數，再(zai)乘(cheng)以(yi)104，即(ji)為(wei)每ml中(zhong)之細(xi)胞(bao)數目。
(3)存(cun)活(huo)測試之步(bu)驟(zhou)為(wei)dyeexclusion，利用染(ran)料(liao)會滲(shen)入死細(xi)胞(bao)中而呈(cheng)色，而活(huo)細(xi)胞(bao)因細(xi)胞(bao)膜(mo)完整，染(ran)料(liao)無(wu)法(fa)滲(shen)入而不(bu)會呈色。壹般使(shi)用藍(lan)色之trypan blue染(ran)料(liao)，如(ru)果(guo)細(xi)胞(bao)不(bu)易(yi)吸收(shou)trypan blue，則用紅(hong)色之Erythrosin bluish。計(ji)算細(xi)胞(bao)活(huo)率：活(huo)細(xi)胞(bao)數/(活(huo)細(xi)胞(bao)數+死細(xi)胞(bao)數)×100%。計(ji)數(shu)應在臺(tai)盼(pan)蘭(lan)染(ran)色後(hou)數(shu)分(fen)鐘(zhong)內(nei)完成，隨(sui)時間(jian)延長，部(bu)分(fen)活(huo)細(xi)胞(bao)也開(kai)始(shi)攝取染(ran)料(liao);因為(wei)臺盼(pan)蘭(lan)對蛋(dan)白(bai)質有(you)很強的親(qin)和力(li)，用不(bu)含(han)血(xue)清的(de)稀(xi)釋液(ye)，可以(yi)使(shi)染(ran)色計(ji)數(shu)更為(wei)準確。

　　Q4.細(xi)胞(bao)特性
在細(xi)胞(bao)培養(yang)之前(qian)，我們要了解(jie)壹下妳(ni)所要養(yang)細(xi)胞(bao)的基本特性，這點(dian)可以(yi)從(cong)細(xi)胞(bao)的產品說(shuo)明(ming)書(shu)或者(zhe)從(cong)ATCC細(xi)胞(bao)庫查(zha)詢(xun)。除(chu)此之外(wai)我們還要知道每(mei)管細(xi)胞(bao)的數量(liang)，建(jian)議分(fen)裂(lie)或傳(chuan)代的比例(li)，和已(yi)知細(xi)胞(bao)的傳代代次等信息(xi)。

　　Q5.準備(bei)培養(yang)基
復(fu)蘇細(xi)胞(bao)時需要準備(bei)合(he)適的(de)培養(yang)基，血(xue)清和細(xi)胞(bao)生長所需的添(tian)加劑。大(da)部(bu)分(fen)培養(yang)細(xi)胞(bao)所用的(de)培養(yang)體(ti)系，可以(yi)在訂(ding)購細(xi)胞(bao)系時獲(huo)得(de)。
雖然(ran)大(da)多(duo)數細(xi)胞(bao)系可以(yi)在不(bu)止(zhi)壹種培養(yang)基中(zhong)生長，但是當培養(yang)基改(gai)變時，細(xi)胞(bao)的性質也會變化。因此，使(shi)用細(xi)胞(bao)庫推(tui)薦的(de)培養(yang)基來培養(yang)細(xi)胞(bao)會獲(huo)得(de)的(de)效(xiao)果(guo)。

　　Q6.開(kai)啟凍存管
1.準(zhun)備(bei)壹個培養(yang)瓶，加入適宜細(xi)胞(bao)培養(yang)的培養(yang)基，液(ye)體(ti)體(ti)積按(an)照(zhao)說明(ming)書(shu)的(de)推(tui)薦配(pei)置(zhi)，並(bing)平(ping)衡(heng)培養(yang)基的(de)溫度(du)和pH（CO2）。　
2.在37℃水(shui)浴(yu)中或細(xi)胞(bao)的正(zheng)常(chang)生長溫度(du)下(xia)將凍存管輕(qing)輕(qing)搖(yao)動。解(jie)凍要快(kuai)，約2分(fen)鐘(zhong)或直到冰(bing)晶融(rong)化即(ji)可。
3.從(cong)水(shui)浴中取出凍存管並(bing)用浸(jin)泡或噴(pen)灑70%乙醇(chun)的方(fang)式(shi)來消毒。進(jin)壹步(bu)的(de)操(cao)作(zuo)均需在無(wu)菌操(cao)作(zuo)臺(tai)中嚴(yan)格無(wu)菌條(tiao)件下進(jin)行。
4.擰(ning)開(kai)凍存管的(de)管帽(mao)並(bing)將(jiang)內容物轉(zhuan)移(yi)到壹個含(han)有(you)9 ml推(tui)薦培養(yang)基的(de)無(wu)菌離心管中(zhong)。通(tong)過(guo)溫(wen)和離心（125×g 10 min）除(chu)去冷凍保護(hu)劑（DMSO）。棄(qi)去上清，並(bing)用1或2 ml*培養(yang)基重(zhong)懸細(xi)胞(bao)。將這些(xie)細(xi)胞(bao)懸液轉移到(dao)含(han)有(you)*培養(yang)基的(de)培養(yang)瓶中(zhong)並(bing)輕(qing)輕(qing)搖(yao)動以*混勻。
5.培養(yang)24小(xiao)時後(hou)檢查(zha)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態並(bing)在需要時進(jin)行傳(chuan)代。

　　Q7. 人(ren)羊(yang)膜(mo)間(jian)充質基(ji)質細(xi)胞(bao) 7140 培養(yang)用液(ye)pH對細(xi)胞(bao)生長的影響

　　由(you)於(yu)，大(da)多(duo)數細(xi)胞(bao)適宜pH為(wei)7.2~7.4，偏(pian)離此範圍對(dui)細(xi)胞(bao)將產生有害的影響(xiang)。各(ge)種(zhong)細(xi)胞(bao)對pH的要求也不(bu)*相(xiang)同(tong)，原代培養(yang)細(xi)胞(bao)壹般對pH變動耐受差，無(wu)限細(xi)胞(bao)系耐受力(li)強。

　　但總體(ti)來說，細(xi)胞(bao)耐酸(suan)性比耐堿(jian)性強壹些(xie)，偏(pian)酸(suan)環(huan)境(jing)中(zhong)更利(li)於(yu)細(xi)胞(bao)生長。因此，我們在配(pei)制培養(yang)用液(ye)時，可把(ba)液(ye)體(ti)的pH稍微調(tiao)得偏(pian)酸(suan)壹些(xie)。液體(ti)在經(jing)過(guo)0.10um或0.22um濾(lv)膜(mo)過(guo)濾時，溶(rong)液(ye)的(de)pH還會向上浮動0.2左右(you)。

　　人(ren)羊(yang)膜(mo)間(jian)充質基(ji)質細(xi)胞(bao) 7140質量(liang)可靠(kao)，售後(hou)有(you)保障（編輯(ji)：tanxi）