人肺微(wei)血管內(nei)皮(pi)細胞(bao)

迷(mi)人的實(shi)驗(yan)，放(fang)心(xin)的選(xuan)擇

我司細胞(bao)近3000種(zhong)，來源於(yu)美國(guo)ATCC,細胞都(dou)是(shi)經(jing)過(guo)嚴(yan)格(ge)質量(liang)控制，在中國大陸努力(li)搭(da)建正牌細胞與國(guo)內(nei)廣大科研人員(yuan)之(zhi)間的溝通橋(qiao)梁。為您提(ti)供人肺微(wei)血管內(nei)皮(pi)細胞(bao)外(wai)，還有(you)更(geng)多相關(guan)實(shi)驗(yan)產(chan)品(pin)，標(biao)準品(pin)，細(xi)胞株和(he)實(shi)驗(yan)技(ji)術服務(wu)等(deng)等前(qian)期後續(xu)服務(wu)。 

人肺微(wei)血管內(nei)皮(pi)細胞(bao)的(de)產(chan)品(pin)介紹

由我司*銷售。

細胞株

　　Q1. 液體培養(yang)基的(de)保存是(shi)冷(leng)藏好？還是(shi)冷(leng)凍好(hao)？

　　要冷(leng)藏！！因(yin)為液體培養(yang)基經(jing)冷(leng)凍後(hou)再經溶(rong)化(hua)時，其(qi)溶(rong)液的pH值(zhi)會發(fa)生(sheng)改變(bian)，溶(rong)液往(wang)往(wang)變堿(jian)，某(mou)些成分(fen)溶(rong)解也(ye)會受到影響對(dui)細(xi)胞(bao)生(sheng)長不(bu)利。故液體培養(yang)基壹定(ding)要存放(fang)在(zai)冷(leng)藏箱中，通常(chang)液體培養(yang)基在(zai)冷(leng)藏條件(jian)下可(ke)存放(fang)6個(ge)月(yue) ~ 壹年。

雜交(jiao)瘤細(xi)胞http://www.。。ｃｏｍ/goodsid/fenleisan/3419899/1.html

　　Q2. 液體培養(yang)基中谷氨(an)酰(xian)胺(an)的(de)作用(yong)，及使用方法。

　　幾乎(hu)所(suo)有(you)的細(xi)胞對(dui)谷(gu)氨(an)酰(xian)胺(an)有(you)較高(gao)的(de)要(yao)求，細胞需(xu)要谷氨(an)酰(xian)胺(an)合(he)成蛋(dan)白質，在缺少(shao)谷(gu)氨(an)酰(xian)胺(an)時(shi)，細(xi)胞生(sheng)長不(bu)良而(er)死亡(wang)。所以(yi)，各種(zhong)培養(yang)液中都(dou)含(han)有(you)較大量的(de)谷氨(an)酰(xian)胺(an)。谷(gu)氨(an)酰(xian)胺(an)在(zai)溶(rong)液中很不穩定(ding)，應置-20 ?C冰凍保存，用(yong)前(qian)加入(ru)培養(yang)基中。加有(you)谷氨(an)酰(xian)胺(an)的(de)液體培養(yang)基4 ?C 冰(bing)箱(xiang)儲(chu)存兩周(zhou)以(yi)上時(shi)，應重(zhong)新(xin)加入(ru)原來量的(de)谷氨(an)酰(xian)胺(an)。基礎(chu)醫(yi)學細(xi)胞中心(xin)在其(qi)服務(wu)項(xiang)目(mu)中配制分(fen)裝(zhuang)了(le)高(gao)濃(nong)度(du)（100倍(bei)）的谷(gu)氨(an)酰(xian)胺(an)溶(rong)液（1ml/支）。每(mei)支(zhi)1ml的谷氨(an)酰(xian)胺(an)加(jia)到(dao)99ml*培養(yang)基中，其(qi)終濃(nong)度為2mM/ml培養(yang)基。包(bao)裝(zhuang)為粉紅(hong)色，-24?C保存。

　　Q3.細胞計數及存活(huo)測試
1、原理(li)：
(1)計(ji)算細胞(bao)數目(mu)可(ke)用(yong)血球計(ji)數盤(pan)或是(shi)Coultercounter粒(li)子計(ji)數(shu)器(qi)自動(dong)計(ji)數。
(2)血球計(ji)數盤(pan)壹般(ban)有(you)二(er)個(ge)chambers，每(mei)個(ge)chamber中細刻9個(ge)1mm2大正方(fang)形(xing)，其(qi)中4個(ge)角(jiao)落之(zhi)正方(fang)形(xing)再細刻(ke)16個(ge)小(xiao)格(ge)，深度均為0.1mm。當(dang)chamber上(shang)方蓋上蓋(gai)玻(bo)片後(hou)，每(mei)個(ge)大正方(fang)形(xing)之(zhi)體積為1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使用時，計(ji)數(shu)每(mei)個(ge)大正方(fang)形(xing)內之(zhi)細胞數目(mu)，乘以(yi)稀釋倍(bei)數，再乘以(yi)104，即為每ml中之(zhi)細胞數目(mu)。
(3)存活(huo)測試之(zhi)步驟(zhou)為dyeexclusion，利用染料(liao)會(hui)滲(shen)入(ru)死(si)細胞中而(er)呈(cheng)色，而(er)活細(xi)胞因(yin)細(xi)胞(bao)膜完(wan)整(zheng)，染(ran)料(liao)無(wu)法滲(shen)入(ru)而(er)不會(hui)呈(cheng)色。壹般(ban)使用藍色(se)之(zhi)trypan blue染料(liao)，如果(guo)細(xi)胞不(bu)易吸(xi)收trypan blue，則用(yong)紅(hong)色之(zhi)Erythrosin bluish。計算細胞活(huo)率：活(huo)細(xi)胞數/(活細胞數+死細胞數(shu))×100%。計數應在(zai)臺盼蘭(lan)染色(se)後(hou)數(shu)分(fen)鐘內(nei)完(wan)成，隨時間延(yan)長(chang)，部(bu)分(fen)活細(xi)胞也(ye)開始攝(she)取染(ran)料(liao);因(yin)為臺盼蘭(lan)對(dui)蛋(dan)白質有(you)很強(qiang)的親和(he)力(li)，用(yong)不含(han)血(xue)清(qing)的稀釋液，可(ke)以(yi)使染色計(ji)數(shu)更(geng)為準確。

　　Q4.細胞特(te)性(xing)
在(zai)細胞培養(yang)之(zhi)前，我們(men)要(yao)了(le)解壹下妳所(suo)要(yao)養(yang)細胞(bao)的基本(ben)特(te)性(xing)，這(zhe)點(dian)可(ke)以(yi)從細胞(bao)的(de)產(chan)品(pin)說(shuo)明(ming)書或者(zhe)從ATCC細胞(bao)庫(ku)查詢。除(chu)此(ci)之(zhi)外(wai)我們(men)還要知道每管細(xi)胞(bao)的數(shu)量，建議分(fen)裂或傳代(dai)的(de)比(bi)例(li)，和(he)已知細胞的傳代(dai)代(dai)次(ci)等(deng)信(xin)息(xi)。

　　Q5.準備(bei)培養(yang)基
復蘇細胞時需要(yao)準(zhun)備(bei)合(he)適(shi)的(de)培養(yang)基，血(xue)清(qing)和(he)細胞(bao)生(sheng)長所(suo)需的添加劑。大部分(fen)培養(yang)細胞(bao)所用的培養(yang)體系，可(ke)以(yi)在訂(ding)購細胞(bao)系時獲得。
雖然大多數(shu)細胞(bao)系可(ke)以(yi)在不(bu)止(zhi)壹種培養(yang)基中生(sheng)長，但(dan)是(shi)當(dang)培養(yang)基改(gai)變(bian)時(shi)，細胞的性(xing)質(zhi)也(ye)會變化(hua)。因(yin)此(ci)，使用細胞(bao)庫(ku)推薦(jian)的培養(yang)基來培養(yang)細胞(bao)會獲得的效(xiao)果。

　　Q6.開啟凍存管
1.準(zhun)備(bei)壹個(ge)培養(yang)瓶，加(jia)入適(shi)宜細胞(bao)培養(yang)的培養(yang)基，液體體(ti)積按照(zhao)說(shuo)明(ming)書的(de)推(tui)薦(jian)配置，並平衡(heng)培養(yang)基的(de)溫(wen)度(du)和(he)pH（CO2）。　
2.在37℃水(shui)浴中或細(xi)胞(bao)的正常(chang)生(sheng)長溫(wen)度下將凍(dong)存管輕輕搖(yao)動(dong)。解(jie)凍要快(kuai)，約(yue)2分(fen)鐘或直(zhi)到(dao)冰晶融化(hua)即可(ke)。
3.從水(shui)浴中取出凍存管並用浸泡(pao)或噴灑70%乙(yi)醇(chun)的方(fang)式來消毒。進壹步的操(cao)作均(jun)需(xu)在無(wu)菌操作臺(tai)中嚴(yan)格(ge)無菌(jun)條(tiao)件下進行。
4.擰開凍(dong)存管的(de)管帽(mao)並將內(nei)容物(wu)轉移到(dao)壹個(ge)含(han)有(you)9 ml推薦(jian)培養(yang)基的(de)無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管中。通過(guo)溫(wen)和(he)離(li)心(xin)（125×g 10 min）除(chu)去(qu)冷(leng)凍保護劑（DMSO）。棄(qi)去(qu)上(shang)清，並用1或2 ml*培養(yang)基重(zhong)懸細胞。將這(zhe)些(xie)細(xi)胞懸液轉移(yi)到(dao)含有(you)*培養(yang)基的(de)培養(yang)瓶中並輕輕搖(yao)動(dong)以(yi)*混勻(yun)。
5.培養(yang)24小(xiao)時後(hou)檢查細胞狀態(tai)並在需(xu)要時進行傳代(dai)。

　　Q7. 培養(yang)用液pH對(dui)細(xi)胞(bao)生(sheng)長的(de)影響

　　由於，大多數(shu)細胞(bao)適(shi)宜pH為7.2~7.4，偏(pian)離(li)此(ci)範(fan)圍對(dui)細(xi)胞(bao)將產(chan)生(sheng)有(you)害的(de)影響(xiang)。各種細胞(bao)對(dui)pH的(de)要(yao)求也(ye)不*相同(tong)，原代(dai)培養(yang)細胞(bao)壹般(ban)對(dui)pH變(bian)動(dong)耐(nai)受差(cha)，無限(xian)細(xi)胞(bao)系耐受力(li)強(qiang)。

　　但(dan)總(zong)體(ti)來說，細(xi)胞耐(nai)酸性(xing)比(bi)耐(nai)堿性(xing)強(qiang)壹些，偏(pian)酸環(huan)境中更(geng)利於(yu)細(xi)胞生(sheng)長。因(yin)此(ci)，我們(men)在(zai)配(pei)制培養(yang)用液時，可(ke)把(ba)液體的(de)pH稍(shao)微(wei)調(tiao)得偏(pian)酸壹些。液體在(zai)經(jing)過(guo)0.10um或0.22um濾(lv)膜過(guo)濾(lv)時，溶(rong)液的pH還會向上浮動(dong)0.2左右(you)。

　　質量可(ke)靠(kao)，售後有(you)保障（編輯：tanxi）