人肺細(xi)胞(bao)

迷人的實驗(yan)，放(fang)心的選(xuan)擇

我(wo)司(si)細(xi)胞(bao)近3000種，來(lai)源於美國(guo)ATCC,細(xi)胞(bao)都(dou)是(shi)經(jing)過嚴格(ge)質(zhi)量控制(zhi)，在(zai)中國(guo)大陸(lu)努力搭(da)建正牌細(xi)胞(bao)與(yu)國(guo)內廣大(da)科研(yan)人員(yuan)之(zhi)間(jian)的溝通(tong)橋(qiao)梁。為您(nin)提供人肺細(xi)胞(bao)外(wai)，還有(you)更多(duo)相(xiang)關(guan)實驗(yan)產(chan)品(pin)，標(biao)準品(pin)，細(xi)胞(bao)株(zhu)和(he)實驗(yan)技術(shu)服務等等前期後(hou)續(xu)服務。 

人肺細(xi)胞(bao)的產(chan)品(pin)介(jie)紹(shao)

由(you)我司*銷售。

細(xi)胞(bao)株(zhu)

　　Q1. 液(ye)體(ti)培養(yang)基的保存是(shi)冷(leng)藏(zang)好？還(hai)是(shi)冷(leng)凍好？

　　要冷(leng)藏(zang)！！因(yin)為液(ye)體培(pei)養(yang)基經(jing)冷(leng)凍後(hou)再經(jing)溶化時，其(qi)溶液的pH值會(hui)發(fa)生(sheng)改變，溶液往(wang)往(wang)變(bian)堿，某些(xie)成(cheng)分溶解也會受(shou)到(dao)影響(xiang)對(dui)細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)不(bu)利。故液體(ti)培養(yang)基壹(yi)定要存放(fang)在(zai)冷(leng)藏(zang)箱(xiang)中，通(tong)常(chang)液(ye)體培養(yang)基在(zai)冷(leng)藏(zang)條(tiao)件下(xia)可存放(fang)6個(ge)月(yue) ~ 壹(yi)年(nian)。

人膠質細(xi)胞(bao)-少(shao)突細(xi)胞(bao)http://www.。。ｃｏｍ/goodsid/fenleisan/3429485/1.html

　　Q2. 液(ye)體(ti)培養(yang)基中谷(gu)氨酰(xian)胺(an)的作(zuo)用，及使(shi)用方法(fa)。

　　幾(ji)乎所有(you)的細(xi)胞(bao)對(dui)谷(gu)氨酰(xian)胺(an)有(you)較(jiao)高(gao)的要求(qiu)，細(xi)胞(bao)需要谷(gu)氨酰(xian)胺(an)合(he)成(cheng)蛋(dan)白(bai)質，在(zai)缺少(shao)谷(gu)氨酰(xian)胺(an)時，細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)不(bu)良而(er)死(si)亡。所以(yi)，各(ge)種(zhong)培(pei)養(yang)液中都(dou)含(han)有(you)較(jiao)大(da)量的谷(gu)氨酰(xian)胺(an)。谷(gu)氨酰(xian)胺(an)在(zai)溶液中很(hen)不(bu)穩(wen)定，應置(zhi)-20 ?C冰(bing)凍(dong)保存，用前加入培(pei)養(yang)基中。加有(you)谷(gu)氨酰(xian)胺(an)的液體(ti)培(pei)養(yang)基4 ?C 冰(bing)箱(xiang)儲(chu)存兩周以(yi)上時(shi)，應重(zhong)新(xin)加入原(yuan)來(lai)量的谷(gu)氨酰(xian)胺(an)。基礎醫(yi)學(xue)細(xi)胞(bao)中心(xin)在(zai)其(qi)服務項目(mu)中配制分裝了高(gao)濃(nong)度（100倍(bei)）的谷(gu)氨酰(xian)胺(an)溶液（1ml/支）。每(mei)支1ml的谷(gu)氨酰(xian)胺(an)加到(dao)99ml*培養(yang)基中，其(qi)終(zhong)濃(nong)度為2mM/ml培(pei)養(yang)基。包裝為粉(fen)紅(hong)色，-24?C保存。

　　Q3.細(xi)胞(bao)計(ji)數及存活(huo)測(ce)試(shi)
1、原(yuan)理(li)：
(1)計(ji)算細(xi)胞(bao)數目(mu)可用血球計數盤或(huo)是(shi)Coultercounter粒子計數器自動計數。
(2)血球計數盤壹(yi)般有(you)二(er)個(ge)chambers，每(mei)個(ge)chamber中細(xi)刻(ke)9個(ge)1mm2大(da)正方形(xing)，其(qi)中4個(ge)角(jiao)落之(zhi)正方形(xing)再細(xi)刻(ke)16個(ge)小(xiao)格(ge)，深度均(jun)為0.1mm。當chamber上(shang)方蓋上蓋玻片後(hou)，每(mei)個(ge)大(da)正方形(xing)之(zhi)體積(ji)為1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使(shi)用時，計(ji)數每(mei)個(ge)大(da)正方形(xing)內之(zhi)細(xi)胞(bao)數目(mu)，乘以(yi)稀釋(shi)倍數，再乘以(yi)104，即為每(mei)ml中之(zhi)細(xi)胞(bao)數目(mu)。
(3)存活(huo)測(ce)試(shi)之(zhi)步驟(zhou)為dyeexclusion，利(li)用染料(liao)會滲入(ru)死(si)細(xi)胞(bao)中而(er)呈(cheng)色，而(er)活(huo)細(xi)胞(bao)因(yin)細(xi)胞(bao)膜(mo)完整，染(ran)料(liao)無(wu)法(fa)滲入(ru)而(er)不(bu)會呈(cheng)色。壹(yi)般使(shi)用藍色之(zhi)trypan blue染料(liao)，如(ru)果(guo)細(xi)胞(bao)不(bu)易吸(xi)收trypan blue，則用紅(hong)色之(zhi)Erythrosin bluish。計算(suan)細(xi)胞(bao)活(huo)率(lv)：活(huo)細(xi)胞(bao)數/(活(huo)細(xi)胞(bao)數+死細(xi)胞(bao)數)×100%。計數應在(zai)臺(tai)盼(pan)蘭(lan)染(ran)色後(hou)數分鐘(zhong)內完成(cheng)，隨時間(jian)延長，部(bu)分活(huo)細(xi)胞(bao)也(ye)開(kai)始(shi)攝取(qu)染料;因(yin)為臺(tai)盼(pan)蘭(lan)對(dui)蛋(dan)白(bai)質有(you)很(hen)強(qiang)的親和(he)力(li)，用不(bu)含(han)血清的稀釋(shi)液(ye)，可以(yi)使染(ran)色計(ji)數更為準確(que)。

　　Q4.細(xi)胞(bao)特性
在(zai)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)之(zhi)前，我(wo)們要了(le)解壹(yi)下(xia)妳(ni)所要養(yang)細(xi)胞(bao)的基本特性，這(zhe)點(dian)可以(yi)從細(xi)胞(bao)的產(chan)品(pin)說(shuo)明書或(huo)者從ATCC細(xi)胞(bao)庫(ku)查(zha)詢。除(chu)此之(zhi)外(wai)我們還(hai)要知道每(mei)管細(xi)胞(bao)的數量，建議分裂(lie)或(huo)傳代的比例，和(he)已(yi)知細(xi)胞(bao)的傳代代次等信息(xi)。

　　Q5.準備(bei)培養(yang)基
復蘇(su)細(xi)胞(bao)時(shi)需要準備(bei)合(he)適(shi)的培養(yang)基，血清和(he)細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)所需的添(tian)加劑。大部(bu)分培養(yang)細(xi)胞(bao)所用的培養(yang)體系，可以(yi)在(zai)訂購細(xi)胞(bao)系(xi)時獲(huo)得。
雖(sui)然(ran)大多(duo)數細(xi)胞(bao)系(xi)可以(yi)在(zai)不(bu)止壹(yi)種(zhong)培(pei)養(yang)基中生(sheng)長(chang)，但是(shi)當培(pei)養(yang)基改變時，細(xi)胞(bao)的性質(zhi)也(ye)會(hui)變(bian)化(hua)。因(yin)此，使用細(xi)胞(bao)庫(ku)推薦(jian)的培養(yang)基來培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)會(hui)獲得的效果(guo)。

　　Q6.開(kai)啟(qi)凍(dong)存管
1.準備(bei)壹(yi)個(ge)培(pei)養(yang)瓶，加入適(shi)宜細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)的培養(yang)基，液體(ti)體(ti)積(ji)按(an)照說(shuo)明書的推薦(jian)配置，並平衡(heng)培(pei)養(yang)基的溫度和(he)pH（CO2）。　
2.在(zai)37℃水(shui)浴中或(huo)細(xi)胞(bao)的正常(chang)生(sheng)長(chang)溫度下(xia)將(jiang)凍(dong)存管輕輕(qing)搖動。解凍要快(kuai)，約2分鐘(zhong)或(huo)直(zhi)到(dao)冰(bing)晶(jing)融化即(ji)可。
3.從水浴中取(qu)出凍存管並用浸泡(pao)或(huo)噴灑(sa)70%乙醇的方式(shi)來消(xiao)毒(du)。進(jin)壹(yi)步(bu)的操(cao)作(zuo)均(jun)需在(zai)無(wu)菌操(cao)作(zuo)臺(tai)中嚴格(ge)無(wu)菌條(tiao)件下(xia)進(jin)行。
4.擰開(kai)凍(dong)存管的管帽並將(jiang)內容物轉(zhuan)移到(dao)壹(yi)個(ge)含(han)有(you)9 ml推薦(jian)培(pei)養(yang)基的無(wu)菌離(li)心(xin)管中。通(tong)過溫和(he)離(li)心(xin)（125×g 10 min）除(chu)去(qu)冷(leng)凍保護劑（DMSO）。棄(qi)去(qu)上(shang)清，並用1或(huo)2 ml*培養(yang)基重懸(xuan)細(xi)胞(bao)。將(jiang)這(zhe)些(xie)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液轉(zhuan)移到(dao)含(han)有(you)*培(pei)養(yang)基的培養(yang)瓶中並輕(qing)輕搖動以(yi)*混勻(yun)。
5.培(pei)養(yang)24小(xiao)時(shi)後(hou)檢查(zha)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)並在(zai)需要時(shi)進(jin)行傳代。

　　Q7. 培(pei)養(yang)用液pH對(dui)細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)的影響(xiang)

　　由(you)於，大多(duo)數細(xi)胞(bao)適(shi)宜pH為7.2~7.4，偏(pian)離(li)此範圍(wei)對(dui)細(xi)胞(bao)將(jiang)產(chan)生(sheng)有(you)害(hai)的影響(xiang)。各(ge)種(zhong)細(xi)胞(bao)對(dui)pH的要求(qiu)也不(bu)*相(xiang)同(tong)，原(yuan)代培養(yang)細(xi)胞(bao)壹(yi)般對(dui)pH變動耐受差(cha)，無(wu)限(xian)細(xi)胞(bao)系(xi)耐受力(li)強(qiang)。

　　但(dan)總(zong)體來說(shuo)，細(xi)胞(bao)耐酸(suan)性比(bi)耐堿性(xing)強(qiang)壹(yi)些(xie)，偏酸(suan)環境中更利於細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)。因(yin)此，我們在(zai)配制培(pei)養(yang)用液時(shi)，可把(ba)液體的pH稍微(wei)調得偏(pian)酸(suan)壹(yi)些(xie)。液體(ti)在(zai)經(jing)過0.10um或(huo)0.22um濾膜(mo)過濾時(shi)，溶液的pH還會(hui)向(xiang)上(shang)浮動0.2左(zuo)右。

　　質(zhi)量可靠(kao)，售後(hou)有(you)保障（編輯：tanxi）