人腦多(duo)型膠(jiao)質(zhi)母(mu)細(xi)胞(bao)瘤(liu)細(xi)胞(bao)

迷(mi)人的(de)實(shi)驗(yan)，放(fang)心(xin)的(de)選(xuan)擇

我司細(xi)胞(bao)近(jin)3000種，來源(yuan)於(yu)美國ATCC,細(xi)胞(bao)都(dou)是(shi)經過(guo)嚴(yan)格(ge)質(zhi)量(liang)控制，在中國(guo)大(da)陸(lu)努力搭(da)建(jian)正(zheng)牌(pai)細(xi)胞(bao)與(yu)國內(nei)廣大(da)科研(yan)人員(yuan)之(zhi)間的溝通橋(qiao)梁(liang)。為您(nin)提(ti)供人腦多(duo)型膠(jiao)質(zhi)母(mu)細(xi)胞(bao)瘤(liu)細(xi)胞(bao)外，還(hai)有(you)更(geng)多(duo)相關(guan)實(shi)驗(yan)產(chan)品，標準(zhun)品，細(xi)胞(bao)株(zhu)和實驗(yan)技術服(fu)務等等前期後續服(fu)務。 

人腦多(duo)型膠(jiao)質(zhi)母(mu)細(xi)胞(bao)瘤(liu)細(xi)胞(bao)的(de)產(chan)品介紹(shao)

由我司*銷(xiao)售。

細(xi)胞(bao)株(zhu)

　　Q1. 液體培養(yang)基(ji)的保存是(shi)冷(leng)藏好？還(hai)是(shi)冷(leng)凍好？

　　要冷(leng)藏！！因(yin)為液體培養(yang)基(ji)經冷(leng)凍後再(zai)經溶(rong)化(hua)時(shi)，其溶液的(de)pH值會發(fa)生改變，溶液往(wang)往變堿，某(mou)些成(cheng)分溶解也會受(shou)到影響對細(xi)胞(bao)生長不(bu)利(li)。故液體培養(yang)基(ji)壹定(ding)要(yao)存放在(zai)冷(leng)藏箱(xiang)中(zhong)，通常液體培養(yang)基(ji)在冷(leng)藏條(tiao)件(jian)下(xia)可存放6個(ge)月(yue) ~ 壹(yi)年。

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　　Q2. 液體培養(yang)基(ji)中谷(gu)氨酰(xian)胺(an)的作(zuo)用(yong)，及使(shi)用(yong)方(fang)法(fa)。

　　幾乎(hu)所(suo)有(you)的(de)細(xi)胞(bao)對谷氨酰(xian)胺(an)有(you)較(jiao)高的(de)要求，細(xi)胞(bao)需(xu)要谷氨酰(xian)胺(an)合成(cheng)蛋(dan)白質(zhi)，在缺(que)少(shao)谷氨酰(xian)胺(an)時，細(xi)胞(bao)生長不(bu)良(liang)而(er)死(si)亡。所以，各種培(pei)養液中(zhong)都含(han)有(you)較(jiao)大(da)量(liang)的谷(gu)氨酰(xian)胺(an)。谷氨酰(xian)胺(an)在溶(rong)液中(zhong)很(hen)不(bu)穩(wen)定(ding)，應(ying)置(zhi)-20 ?C冰(bing)凍保存，用(yong)前加(jia)入(ru)培養(yang)基(ji)中。加(jia)有(you)谷(gu)氨酰(xian)胺(an)的液體培養(yang)基(ji)4 ?C 冰箱(xiang)儲(chu)存兩周以上(shang)時，應(ying)重新(xin)加(jia)入(ru)原(yuan)來量(liang)的谷(gu)氨酰(xian)胺(an)。基(ji)礎(chu)醫學細(xi)胞(bao)中(zhong)心(xin)在(zai)其服(fu)務項目(mu)中配制分裝了高濃度(du)（100倍）的(de)谷氨酰(xian)胺(an)溶液（1ml/支(zhi)）。每支(zhi)1ml的谷(gu)氨酰(xian)胺(an)加到99ml*培養(yang)基(ji)中，其終濃度(du)為2mM/ml培(pei)養(yang)基(ji)。包裝為粉(fen)紅(hong)色(se)，-24?C保存。

　　Q3.細(xi)胞(bao)計數(shu)及存活(huo)測(ce)試(shi)
1、原(yuan)理：
(1)計算(suan)細(xi)胞(bao)數(shu)目(mu)可用(yong)血球(qiu)計數(shu)盤或(huo)是(shi)Coultercounter粒子計數(shu)器自動(dong)計數(shu)。
(2)血球(qiu)計數(shu)盤壹(yi)般(ban)有(you)二個chambers，每(mei)個chamber中(zhong)細(xi)刻(ke)9個1mm2大(da)正(zheng)方(fang)形(xing)，其中4個(ge)角(jiao)落(luo)之(zhi)正(zheng)方(fang)形(xing)再(zai)細(xi)刻(ke)16個小格，深度均(jun)為0.1mm。當(dang)chamber上(shang)方(fang)蓋(gai)上(shang)蓋(gai)玻(bo)片(pian)後，每個大(da)正(zheng)方(fang)形(xing)之(zhi)體積為1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使(shi)用(yong)時，計數(shu)每(mei)個大(da)正(zheng)方(fang)形(xing)內(nei)之(zhi)細(xi)胞(bao)數(shu)目(mu)，乘以稀釋(shi)倍數(shu)，再(zai)乘以104，即為每(mei)ml中(zhong)之(zhi)細(xi)胞(bao)數(shu)目(mu)。
(3)存活(huo)測(ce)試(shi)之(zhi)步驟(zhou)為dyeexclusion，利(li)用(yong)染料(liao)會滲(shen)入(ru)死(si)細(xi)胞(bao)中(zhong)而(er)呈色(se)，而(er)活(huo)細(xi)胞(bao)因(yin)細(xi)胞(bao)膜(mo)完(wan)整(zheng)，染料(liao)無(wu)法(fa)滲(shen)入(ru)而(er)不(bu)會呈色(se)。壹(yi)般(ban)使(shi)用(yong)藍色之(zhi)trypan blue染(ran)料(liao)，如(ru)果(guo)細(xi)胞(bao)不(bu)易吸(xi)收(shou)trypan blue，則(ze)用(yong)紅(hong)色(se)之(zhi)Erythrosin bluish。計算(suan)細(xi)胞(bao)活(huo)率(lv)：活(huo)細(xi)胞(bao)數(shu)/(活(huo)細(xi)胞(bao)數(shu)+死(si)細(xi)胞(bao)數(shu))×100%。計數(shu)應(ying)在臺盼(pan)蘭(lan)染(ran)色(se)後(hou)數(shu)分鐘內(nei)完(wan)成(cheng)，隨時(shi)間延長，部分活(huo)細(xi)胞(bao)也(ye)開(kai)始(shi)攝(she)取(qu)染料;因(yin)為臺盼(pan)蘭(lan)對蛋白質(zhi)有(you)很(hen)強的親和(he)力(li)，用(yong)不(bu)含(han)血清的稀釋液，可(ke)以使(shi)染(ran)色計數(shu)更(geng)為準(zhun)確(que)。

　　Q4.細(xi)胞(bao)特性(xing)
在細(xi)胞(bao)培(pei)養之(zhi)前，我們要了解壹下(xia)妳(ni)所(suo)要(yao)養(yang)細(xi)胞(bao)的(de)基(ji)本特性(xing)，這點可以從(cong)細(xi)胞(bao)的(de)產(chan)品說明書(shu)或(huo)者(zhe)從(cong)ATCC細(xi)胞(bao)庫(ku)查詢。除此(ci)之(zhi)外我們還(hai)要知(zhi)道每管細(xi)胞(bao)的(de)數(shu)量(liang)，建(jian)議分裂(lie)或(huo)傳代(dai)的比(bi)例，和已(yi)知(zhi)細(xi)胞(bao)的(de)傳代(dai)代(dai)次等信息(xi)。

　　Q5.準(zhun)備(bei)培(pei)養(yang)基(ji)
復(fu)蘇細(xi)胞(bao)時(shi)需要準(zhun)備(bei)合(he)適(shi)的(de)培(pei)養基(ji)，血清和細(xi)胞(bao)生長所(suo)需的添(tian)加劑。大(da)部分培養細(xi)胞(bao)所(suo)用(yong)的培(pei)養(yang)體系，可(ke)以(yi)在訂(ding)購細(xi)胞(bao)系(xi)時獲得。
雖(sui)然(ran)大(da)多(duo)數(shu)細(xi)胞(bao)系(xi)可以在不(bu)止壹(yi)種培(pei)養基(ji)中生長，但(dan)是(shi)當(dang)培(pei)養基(ji)改變時，細(xi)胞(bao)的(de)性質(zhi)也會變化(hua)。因(yin)此(ci)，使(shi)用(yong)細(xi)胞(bao)庫(ku)推薦的培(pei)養基(ji)來培(pei)養細(xi)胞(bao)會獲得的(de)效(xiao)果(guo)。

　　Q6.開(kai)啟凍存管
1.準(zhun)備(bei)壹(yi)個(ge)培(pei)養(yang)瓶，加入(ru)適宜細(xi)胞(bao)培(pei)養的培養(yang)基(ji)，液體體積按(an)照(zhao)說明書(shu)的推(tui)薦配置，並(bing)平(ping)衡培養基(ji)的溫(wen)度(du)和(he)pH（CO2）。　
2.在37℃水(shui)浴(yu)中或(huo)細(xi)胞(bao)的(de)正(zheng)常生長溫(wen)度下將凍存管輕輕(qing)搖動(dong)。解凍要快(kuai)，約2分鐘或(huo)直(zhi)到冰晶(jing)融(rong)化(hua)即可(ke)。
3.從水浴中取出凍存管並(bing)用(yong)浸(jin)泡或(huo)噴灑70%乙醇(chun)的方(fang)式來消(xiao)毒。進(jin)壹步的(de)操作均(jun)需在(zai)無(wu)菌(jun)操作臺中(zhong)嚴(yan)格(ge)無(wu)菌(jun)條件下進(jin)行。
4.擰(ning)開(kai)凍存管的管帽並(bing)將內(nei)容物轉(zhuan)移到壹個(ge)含(han)有(you)9 ml推(tui)薦培養(yang)基(ji)的無(wu)菌(jun)離心(xin)管中。通過溫(wen)和離心(xin)（125×g 10 min）除去(qu)冷(leng)凍保護劑（DMSO）。棄去上(shang)清，並(bing)用(yong)1或(huo)2 ml*培(pei)養(yang)基(ji)重懸細(xi)胞(bao)。將這些(xie)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液轉(zhuan)移到含有(you)*培(pei)養基(ji)的培(pei)養(yang)瓶中並(bing)輕(qing)輕搖動以(yi)*混(hun)勻。
5.培養24小時(shi)後(hou)檢(jian)查細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)並(bing)在(zai)需要時進(jin)行傳代(dai)。

　　Q7. 培養(yang)用(yong)液pH對細(xi)胞(bao)生長的(de)影響

　　由於(yu)，大(da)多(duo)數(shu)細(xi)胞(bao)適(shi)宜pH為7.2~7.4，偏(pian)離此(ci)範(fan)圍對細(xi)胞(bao)將產(chan)生有(you)害(hai)的影(ying)響。各種細(xi)胞(bao)對pH的要求也不(bu)*相同(tong)，原(yuan)代(dai)培養(yang)細(xi)胞(bao)壹(yi)般(ban)對pH變動耐(nai)受(shou)差，無(wu)限(xian)細(xi)胞(bao)系(xi)耐(nai)受(shou)力(li)強(qiang)。

　　但總(zong)體來說(shuo)，細(xi)胞(bao)耐(nai)酸(suan)性比耐(nai)堿(jian)性強壹(yi)些，偏(pian)酸(suan)環境(jing)中(zhong)更(geng)利(li)於(yu)細(xi)胞(bao)生長。因(yin)此，我們在配制培養用(yong)液時(shi)，可把(ba)液體的pH稍(shao)微調(tiao)得偏(pian)酸(suan)壹(yi)些(xie)。液體在經過(guo)0.10um或(huo)0.22um濾(lv)膜(mo)過濾(lv)時(shi)，溶(rong)液的(de)pH還(hai)會向(xiang)上(shang)浮動(dong)0.2左(zuo)右。

　　質(zhi)量(liang)可靠(kao)，售後(hou)有(you)保障（編(bian)輯：tanxi）