人腦膠質(zhi)母(mu)細胞瘤(liu)細胞

迷人的(de)實驗，放(fang)心的(de)選擇(ze)

我司細胞近(jin)3000種(zhong)，來(lai)源於(yu)美(mei)國(guo)ATCC,細胞都是(shi)經過(guo)嚴格質(zhi)量(liang)控制，在中國大陸(lu)努(nu)力搭建(jian)正(zheng)牌(pai)細胞與(yu)國(guo)內廣大(da)科(ke)研(yan)人員之(zhi)間(jian)的溝通(tong)橋梁(liang)。為您提(ti)供人腦膠質(zhi)母(mu)細胞瘤(liu)細胞外(wai)，還有(you)更(geng)多相關(guan)實驗產品(pin)，標(biao)準品(pin)，細胞株和(he)實驗技(ji)術(shu)服務等(deng)等(deng)前(qian)期後續服務(wu)。 

人腦膠質(zhi)母(mu)細胞瘤(liu)細胞的(de)產品(pin)介紹(shao)

由我司*銷售。

細胞株

　　Q1. 液體培(pei)養基的保(bao)存是冷藏(zang)好？還(hai)是冷凍好(hao)？

　　要(yao)冷藏(zang)！！因為液體培(pei)養基經冷凍後再(zai)經溶化時，其(qi)溶(rong)液(ye)的(de)pH值會(hui)發(fa)生(sheng)改(gai)變(bian)，溶液(ye)往往(wang)變(bian)堿，某(mou)些成(cheng)分溶解也(ye)會(hui)受(shou)到影(ying)響對細胞生(sheng)長(chang)不(bu)利。故液(ye)體培(pei)養基壹定(ding)要(yao)存放(fang)在冷藏(zang)箱(xiang)中，通(tong)常(chang)液體培(pei)養基在冷藏(zang)條件(jian)下可(ke)存放(fang)6個(ge)月(yue) ~ 壹年(nian)。

人神(shen)經系統(tong)周邊(bian)細胞http://www.chem17.com/st98541/product_14903148.html

　　Q2. 液體培(pei)養基中谷(gu)氨酰胺的作用，及使用方(fang)法(fa)。

　　幾(ji)乎所(suo)有的(de)細胞對(dui)谷氨酰胺有較(jiao)高的(de)要(yao)求，細胞需(xu)要(yao)谷(gu)氨酰胺合成蛋白(bai)質(zhi)，在(zai)缺少(shao)谷氨酰胺時，細胞生(sheng)長(chang)不(bu)良(liang)而(er)死亡。所以(yi)，各(ge)種(zhong)培(pei)養液(ye)中都含有較(jiao)大(da)量(liang)的谷(gu)氨酰胺。谷氨酰胺在溶(rong)液(ye)中很不(bu)穩(wen)定(ding)，應(ying)置(zhi)-20 ?C冰凍保(bao)存，用前(qian)加入培(pei)養基中。加(jia)有谷(gu)氨酰胺的液(ye)體培(pei)養基4 ?C 冰箱(xiang)儲存兩周(zhou)以(yi)上時，應(ying)重新(xin)加入原(yuan)來(lai)量(liang)的谷(gu)氨酰胺。基礎醫學細胞中(zhong)心在(zai)其服(fu)務項目中配(pei)制分裝了高濃(nong)度（100倍）的谷(gu)氨酰胺溶液(ye)（1ml/支(zhi)）。每(mei)支(zhi)1ml的(de)谷(gu)氨酰胺加到(dao)99ml*培(pei)養基中，其(qi)終(zhong)濃(nong)度為2mM/ml培(pei)養基。包裝(zhuang)為粉(fen)紅色(se)，-24?C保存。

　　Q3.細胞計(ji)數(shu)及存活測(ce)試(shi)
1、原(yuan)理：
(1)計(ji)算(suan)細胞數(shu)目可用血球計(ji)數(shu)盤或是(shi)Coultercounter粒(li)子計(ji)數(shu)器自動(dong)計(ji)數(shu)。
(2)血球計(ji)數(shu)盤壹般(ban)有(you)二(er)個(ge)chambers，每(mei)個(ge)chamber中細刻9個(ge)1mm2大正(zheng)方(fang)形，其中(zhong)4個(ge)角落(luo)之(zhi)正(zheng)方(fang)形再(zai)細刻16個(ge)小格，深度均(jun)為0.1mm。當(dang)chamber上(shang)方(fang)蓋上蓋(gai)玻片(pian)後，每(mei)個(ge)大正(zheng)方(fang)形之(zhi)體積為1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使用時，計(ji)數(shu)每(mei)個(ge)大正(zheng)方(fang)形內之(zhi)細胞數(shu)目，乘(cheng)以(yi)稀釋(shi)倍(bei)數(shu)，再(zai)乘(cheng)以(yi)104，即(ji)為每(mei)ml中(zhong)之(zhi)細胞數(shu)目。
(3)存活測(ce)試(shi)之(zhi)步驟(zhou)為dyeexclusion，利用染(ran)料(liao)會(hui)滲(shen)入死細胞中(zhong)而(er)呈(cheng)色，而(er)活(huo)細胞因(yin)細胞膜(mo)完(wan)整，染(ran)料(liao)無法(fa)滲(shen)入而(er)不(bu)會(hui)呈(cheng)色(se)。壹般(ban)使用藍色(se)之(zhi)trypan blue染(ran)料(liao)，如(ru)果細胞不(bu)易吸收trypan blue，則用紅色(se)之(zhi)Erythrosin bluish。計(ji)算(suan)細胞活(huo)率(lv)：活(huo)細胞數(shu)/(活細胞數(shu)+死細胞數(shu))×100%。計(ji)數(shu)應在臺盼蘭(lan)染(ran)色(se)後數(shu)分鐘內完(wan)成，隨時(shi)間(jian)延(yan)長(chang)，部(bu)分(fen)活(huo)細胞也(ye)開始(shi)攝取染(ran)料(liao);因(yin)為臺盼蘭(lan)對(dui)蛋白(bai)質(zhi)有(you)很強的(de)親和(he)力，用不(bu)含血清的稀釋(shi)液(ye)，可以(yi)使染(ran)色(se)計(ji)數(shu)更(geng)為準確(que)。

　　Q4.細胞特(te)性
在細胞培(pei)養之(zhi)前(qian)，我們(men)要(yao)了(le)解(jie)壹下妳(ni)所要(yao)養(yang)細胞的(de)基本特(te)性，這點可(ke)以(yi)從(cong)細胞的(de)產品(pin)說明(ming)書(shu)或者(zhe)從(cong)ATCC細胞庫(ku)查詢(xun)。除(chu)此之(zhi)外(wai)我們(men)還要(yao)知(zhi)道每(mei)管(guan)細胞的(de)數(shu)量(liang)，建議分裂或傳代(dai)的比例(li)，和已(yi)知細胞的(de)傳代(dai)代次(ci)等信息。

　　Q5.準備(bei)培(pei)養基
復蘇細胞時(shi)需要(yao)準(zhun)備(bei)合適的培(pei)養基，血清和細胞生(sheng)長(chang)所(suo)需(xu)的(de)添加劑。大(da)部分(fen)培(pei)養細胞所(suo)用的培(pei)養體系，可以(yi)在訂(ding)購細胞系(xi)時獲(huo)得。
雖(sui)然大(da)多數(shu)細胞系(xi)可以(yi)在(zai)不(bu)止(zhi)壹種(zhong)培(pei)養基中生(sheng)長(chang)，但(dan)是(shi)當(dang)培(pei)養基改(gai)變(bian)時，細胞的(de)性質(zhi)也(ye)會(hui)變(bian)化。因(yin)此，使用細胞庫(ku)推(tui)薦的培(pei)養基來(lai)培(pei)養細胞會(hui)獲(huo)得的(de)效果。

　　Q6.開啟凍存管
1.準(zhun)備(bei)壹個(ge)培(pei)養瓶(ping)，加入適宜(yi)細胞培(pei)養的(de)培(pei)養基，液體體積按(an)照說明(ming)書(shu)的推(tui)薦配(pei)置(zhi)，並平衡(heng)培(pei)養基的溫(wen)度和pH（CO2）。　
2.在37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)或細胞的(de)正(zheng)常(chang)生(sheng)長(chang)溫(wen)度下將(jiang)凍存管輕(qing)輕(qing)搖動(dong)。解凍要(yao)快，約(yue)2分鐘或直(zhi)到(dao)冰(bing)晶融化(hua)即(ji)可。
3.從(cong)水(shui)浴(yu)中(zhong)取(qu)出(chu)凍存管並用浸泡或噴(pen)灑70%乙(yi)醇的方(fang)式來(lai)消(xiao)毒(du)。進(jin)壹步的操作均(jun)需在無菌操作臺中嚴格無菌條件下進(jin)行(xing)。
4.擰(ning)開(kai)凍存管的(de)管(guan)帽並將(jiang)內容物轉移到壹個(ge)含有9 ml推(tui)薦培(pei)養基的無菌離心管(guan)中。通(tong)過(guo)溫(wen)和離心（125×g 10 min）除(chu)去冷凍保(bao)護(hu)劑（DMSO）。棄(qi)去上清，並用1或2 ml*培(pei)養基重懸細胞。將(jiang)這些(xie)細胞懸(xuan)液轉移到含有*培(pei)養基的培(pei)養瓶(ping)中並輕輕(qing)搖動(dong)以*混(hun)勻。
5.培(pei)養24小(xiao)時後檢(jian)查細胞狀(zhuang)態(tai)並在需(xu)要(yao)時(shi)進(jin)行(xing)傳代(dai)。

　　Q7. 培(pei)養用液pH對(dui)細胞生(sheng)長(chang)的(de)影(ying)響(xiang)

　　由於，大(da)多數(shu)細胞適宜(yi)pH為7.2~7.4，偏離此範圍(wei)對(dui)細胞將(jiang)產生(sheng)有(you)害(hai)的影(ying)響。各種(zhong)細胞對(dui)pH的要(yao)求也(ye)不(bu)*相同，原(yuan)代培(pei)養細胞壹般(ban)對(dui)pH變(bian)動(dong)耐受(shou)差(cha)，無限細胞系(xi)耐受(shou)力強(qiang)。

　　但(dan)總體來(lai)說(shuo)，細胞耐酸(suan)性比耐堿(jian)性強壹些，偏酸(suan)環境中(zhong)更(geng)利於細胞生(sheng)長(chang)。因(yin)此，我們(men)在配(pei)制培(pei)養用液時(shi)，可(ke)把液體的pH稍微(wei)調(tiao)得偏(pian)酸(suan)壹些。液體在經過(guo)0.10um或0.22um濾膜(mo)過(guo)濾時(shi)，溶(rong)液的(de)pH還會(hui)向(xiang)上(shang)浮(fu)動(dong)0.2左(zuo)右。

　　質(zhi)量(liang)可靠(kao)，售後有(you)保(bao)障（編(bian)輯(ji)：tanxi）