人(ren)腦(nao)膠(jiao)質(zhi)細(xi)胞瘤(liu)細(xi)胞

迷(mi)人的(de)實驗，放(fang)心(xin)的(de)選(xuan)擇(ze)

我司(si)細(xi)胞近(jin)3000種，來(lai)源於(yu)美國ATCC,細(xi)胞都(dou)是(shi)經(jing)過嚴格(ge)質(zhi)量(liang)控制，在(zai)中國(guo)大(da)陸努力搭(da)建正(zheng)牌(pai)細(xi)胞與(yu)國(guo)內廣大(da)科研(yan)人(ren)員(yuan)之(zhi)間的(de)溝通橋(qiao)梁(liang)。為您(nin)提(ti)供人(ren)腦膠質(zhi)細(xi)胞瘤(liu)細(xi)胞外(wai)，還(hai)有(you)更(geng)多相(xiang)關實驗產(chan)品(pin)，標(biao)準品，細(xi)胞株和實驗技術(shu)服務(wu)等等前期(qi)後(hou)續(xu)服務(wu)。 

人腦(nao)膠(jiao)質(zhi)細(xi)胞瘤(liu)細(xi)胞的(de)產品(pin)介紹

由我司(si)*銷(xiao)售(shou)。

細(xi)胞株

　　Q1. 液體培養(yang)基(ji)的(de)保(bao)存是冷藏好？還(hai)是冷凍好？

　　要(yao)冷藏！！因為液體培養(yang)基(ji)經(jing)冷凍後再經(jing)溶(rong)化時(shi)，其(qi)溶(rong)液的(de)pH值(zhi)會發(fa)生(sheng)改變，溶(rong)液往往變堿(jian)，某些成(cheng)分(fen)溶(rong)解(jie)也(ye)會(hui)受(shou)到(dao)影響(xiang)對細(xi)胞生(sheng)長(chang)不(bu)利。故(gu)液體培養(yang)基(ji)壹定(ding)要(yao)存放(fang)在(zai)冷藏箱(xiang)中，通常液體培養(yang)基(ji)在(zai)冷藏條件下(xia)可(ke)存放(fang)6個月 ~ 壹年。

人臍帶(dai)動脈(mai)平滑肌(ji)細(xi)胞http://www.chem17.com/st98541/product_15971678.html

　　Q2. 液體培養(yang)基(ji)中谷(gu)氨酰胺(an)的(de)作用(yong)，及(ji)使(shi)用(yong)方法。

　　幾(ji)乎(hu)所(suo)有(you)的(de)細(xi)胞對谷氨酰胺(an)有(you)較(jiao)高(gao)的(de)要(yao)求，細(xi)胞需(xu)要(yao)谷(gu)氨酰胺(an)合(he)成(cheng)蛋(dan)白質(zhi)，在(zai)缺(que)少(shao)谷氨酰胺(an)時(shi)，細(xi)胞生(sheng)長(chang)不(bu)良而死亡。所以(yi)，各(ge)種(zhong)培(pei)養(yang)液中都(dou)含(han)有(you)較(jiao)大(da)量(liang)的(de)谷氨酰胺(an)。谷(gu)氨酰胺(an)在(zai)溶(rong)液中很(hen)不(bu)穩定，應(ying)置-20 ?C冰凍(dong)保(bao)存，用前加入培(pei)養基(ji)中。加有(you)谷(gu)氨酰胺(an)的(de)液體培養(yang)基(ji)4 ?C 冰箱(xiang)儲存兩周以(yi)上時(shi)，應(ying)重新(xin)加入原(yuan)來(lai)量(liang)的(de)谷氨酰胺(an)。基(ji)礎醫學(xue)細(xi)胞中(zhong)心(xin)在(zai)其(qi)服務(wu)項(xiang)目(mu)中(zhong)配(pei)制分裝(zhuang)了(le)高(gao)濃(nong)度（100倍）的(de)谷氨酰胺(an)溶(rong)液（1ml/支）。每支1ml的(de)谷氨酰胺(an)加到(dao)99ml*培(pei)養基(ji)中，其(qi)終(zhong)濃(nong)度為2mM/ml培(pei)養(yang)基(ji)。包(bao)裝(zhuang)為粉紅(hong)色，-24?C保(bao)存。

　　Q3.細(xi)胞計(ji)數(shu)及(ji)存活測試
1、原(yuan)理(li)：
(1)計(ji)算細(xi)胞數(shu)目(mu)可(ke)用(yong)血球計(ji)數(shu)盤(pan)或(huo)是Coultercounter粒(li)子計(ji)數(shu)器(qi)自動計(ji)數(shu)。
(2)血(xue)球(qiu)計(ji)數(shu)盤(pan)壹(yi)般有(you)二(er)個chambers，每個chamber中細(xi)刻9個1mm2大(da)正(zheng)方形，其(qi)中(zhong)4個角(jiao)落之正(zheng)方形再細(xi)刻16個小格(ge)，深(shen)度均為0.1mm。當chamber上方蓋上蓋玻片(pian)後，每個大(da)正(zheng)方形之體積(ji)為1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使(shi)用(yong)時(shi)，計(ji)數(shu)每(mei)個大(da)正(zheng)方形內之(zhi)細(xi)胞數(shu)目(mu)，乘(cheng)以(yi)稀(xi)釋倍數(shu)，再乘(cheng)以(yi)104，即(ji)為每(mei)ml中(zhong)之細(xi)胞數(shu)目(mu)。
(3)存活測試之(zhi)步(bu)驟(zhou)為dyeexclusion，利用染(ran)料(liao)會(hui)滲(shen)入死細(xi)胞中(zhong)而(er)呈(cheng)色，而(er)活(huo)細(xi)胞因細(xi)胞膜完整(zheng)，染(ran)料(liao)無法(fa)滲入(ru)而(er)不(bu)會呈色。壹(yi)般使(shi)用(yong)藍(lan)色之(zhi)trypan blue染(ran)料(liao)，如果細(xi)胞不(bu)易(yi)吸收(shou)trypan blue，則用紅(hong)色之(zhi)Erythrosin bluish。計(ji)算細(xi)胞活(huo)率(lv)：活細(xi)胞數(shu)/(活(huo)細(xi)胞數(shu)+死(si)細(xi)胞數(shu))×100%。計(ji)數(shu)應(ying)在(zai)臺(tai)盼(pan)蘭染(ran)色後(hou)數(shu)分(fen)鐘內完(wan)成(cheng)，隨(sui)時(shi)間延(yan)長，部分活細(xi)胞也(ye)開(kai)始(shi)攝取染(ran)料(liao);因為臺(tai)盼(pan)蘭對蛋(dan)白質(zhi)有(you)很(hen)強的(de)親和力，用(yong)不(bu)含血清的(de)稀釋液，可(ke)以(yi)使(shi)染(ran)色計(ji)數(shu)更(geng)為準確。

　　Q4.細(xi)胞特(te)性(xing)
在(zai)細(xi)胞培(pei)養(yang)之(zhi)前，我們(men)要(yao)了(le)解(jie)壹(yi)下(xia)妳(ni)所要(yao)養(yang)細(xi)胞的(de)基(ji)本(ben)特(te)性，這點可(ke)以(yi)從(cong)細(xi)胞的(de)產品(pin)說(shuo)明書(shu)或(huo)者(zhe)從ATCC細(xi)胞庫查詢。除(chu)此之外我們(men)還(hai)要(yao)知(zhi)道(dao)每(mei)管(guan)細(xi)胞的(de)數(shu)量(liang)，建議(yi)分裂或(huo)傳(chuan)代(dai)的(de)比(bi)例(li)，和已知(zhi)細(xi)胞的(de)傳(chuan)代(dai)代次(ci)等信息。

　　Q5.準備(bei)培養基(ji)
復蘇(su)細(xi)胞時(shi)需要(yao)準備(bei)合(he)適(shi)的(de)培養(yang)基(ji)，血清(qing)和細(xi)胞生(sheng)長(chang)所(suo)需的(de)添(tian)加劑。大(da)部分培養細(xi)胞所(suo)用(yong)的(de)培養(yang)體系(xi)，可(ke)以(yi)在(zai)訂(ding)購(gou)細(xi)胞系(xi)時(shi)獲得(de)。
雖然(ran)大(da)多數(shu)細(xi)胞系(xi)可(ke)以(yi)在(zai)不(bu)止壹種培養(yang)基(ji)中生(sheng)長，但是當培(pei)養基(ji)改變時(shi)，細(xi)胞的(de)性質(zhi)也(ye)會(hui)變化。因此，使(shi)用(yong)細(xi)胞庫推薦(jian)的(de)培養(yang)基(ji)來(lai)培養(yang)細(xi)胞會(hui)獲(huo)得(de)的(de)效果。

　　Q6.開(kai)啟(qi)凍存管(guan)
1.準備(bei)壹個培養瓶，加入適(shi)宜細(xi)胞培(pei)養(yang)的(de)培養(yang)基(ji)，液體體積(ji)按(an)照(zhao)說(shuo)明書(shu)的(de)推薦(jian)配(pei)置，並平衡培(pei)養基(ji)的(de)溫(wen)度和pH（CO2）。　
2.在(zai)37℃水浴(yu)中(zhong)或(huo)細(xi)胞的(de)正(zheng)常生長(chang)溫(wen)度下(xia)將(jiang)凍(dong)存管(guan)輕輕搖動。解(jie)凍(dong)要(yao)快(kuai)，約2分(fen)鐘或(huo)直到(dao)冰(bing)晶(jing)融化即(ji)可(ke)。
3.從(cong)水浴(yu)中(zhong)取出凍存管(guan)並用(yong)浸泡或(huo)噴灑(sa)70%乙(yi)醇的(de)方式來(lai)消毒。進(jin)壹步(bu)的(de)操作均需(xu)在(zai)無菌操作臺(tai)中(zhong)嚴格(ge)無菌條件下(xia)進(jin)行。
4.擰開(kai)凍(dong)存管(guan)的(de)管(guan)帽(mao)並將(jiang)內容(rong)物轉移到(dao)壹(yi)個含有(you)9 ml推(tui)薦(jian)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)無菌離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)。通(tong)過(guo)溫(wen)和離(li)心(xin)（125×g 10 min）除(chu)去冷凍保(bao)護(hu)劑(ji)（DMSO）。棄(qi)去上清，並用(yong)1或(huo)2 ml*培養(yang)基(ji)重懸細(xi)胞。將(jiang)這些細(xi)胞懸液轉移到(dao)含(han)有(you)*培(pei)養(yang)基(ji)的(de)培養(yang)瓶(ping)中(zhong)並輕輕搖動以(yi)*混(hun)勻(yun)。
5.培(pei)養(yang)24小時(shi)後檢(jian)查細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)並在(zai)需要(yao)時(shi)進(jin)行傳(chuan)代(dai)。

　　Q7. 培養(yang)用(yong)液pH對細(xi)胞生(sheng)長(chang)的(de)影響(xiang)

　　由於(yu)，大(da)多數(shu)細(xi)胞適(shi)宜pH為7.2~7.4，偏(pian)離(li)此範圍對細(xi)胞將(jiang)產(chan)生(sheng)有(you)害(hai)的(de)影響(xiang)。各(ge)種(zhong)細(xi)胞對pH的(de)要(yao)求也(ye)不(bu)*相同(tong)，原(yuan)代(dai)培(pei)養(yang)細(xi)胞壹(yi)般對pH變動耐(nai)受(shou)差(cha)，無限(xian)細(xi)胞系(xi)耐(nai)受(shou)力(li)強。

　　但總(zong)體來(lai)說(shuo)，細(xi)胞耐(nai)酸(suan)性(xing)比(bi)耐(nai)堿(jian)性強壹些，偏酸環境中(zhong)更(geng)利於(yu)細(xi)胞生(sheng)長(chang)。因此，我們(men)在(zai)配制培養(yang)用(yong)液時(shi)，可(ke)把液體的(de)pH稍微調得(de)偏(pian)酸壹(yi)些。液體在(zai)經(jing)過0.10um或(huo)0.22um濾膜過濾(lv)時(shi)，溶(rong)液的(de)pH還(hai)會向(xiang)上浮動0.2左右。

　　質(zhi)量(liang)可(ke)靠(kao)，售(shou)後有(you)保(bao)障（編(bian)輯：tanxi）