人腦瘤(liu)細胞(bao)

迷人的實(shi)驗，放心(xin)的選擇(ze)

我(wo)司(si)細胞(bao)近(jin)3000種，來源於(yu)美國(guo)ATCC,細(xi)胞都(dou)是(shi)經(jing)過嚴(yan)格(ge)質(zhi)量(liang)控制，在(zai)中(zhong)國(guo)大(da)陸(lu)努(nu)力(li)搭(da)建正牌細胞(bao)與國(guo)內廣(guang)大科(ke)研(yan)人員之間(jian)的溝通橋(qiao)梁。為(wei)您(nin)提供(gong)人腦瘤(liu)細胞(bao)外(wai)，還有(you)更多相關實(shi)驗產(chan)品，標準(zhun)品，細(xi)胞(bao)株和實(shi)驗技(ji)術服務等(deng)等(deng)前期後(hou)續(xu)服務。 

人腦瘤(liu)細胞(bao)的產(chan)品介(jie)紹

由(you)我(wo)司(si)*銷售(shou)。

細(xi)胞(bao)株

　　Q1. 液(ye)體培(pei)養(yang)基的保存(cun)是(shi)冷藏(zang)好(hao)？還是(shi)冷凍(dong)好？

　　要(yao)冷(leng)藏(zang)！！因(yin)為(wei)液(ye)體培(pei)養(yang)基經(jing)冷凍後(hou)再(zai)經(jing)溶(rong)化(hua)時，其溶(rong)液(ye)的pH值(zhi)會發生(sheng)改(gai)變，溶(rong)液(ye)往(wang)往(wang)變堿(jian)，某(mou)些成分溶(rong)解也會受到影(ying)響(xiang)對細(xi)胞生(sheng)長(chang)不(bu)利。故液(ye)體培(pei)養(yang)基壹(yi)定(ding)要(yao)存(cun)放在(zai)冷藏(zang)箱(xiang)中(zhong)，通(tong)常液體培(pei)養(yang)基在(zai)冷藏(zang)條(tiao)件下(xia)可(ke)存(cun)放6個(ge)月(yue) ~ 壹(yi)年(nian)。

人T細胞性白(bai)血(xue)病細(xi)胞(bao)http://www.chem17.com/st98541/product_9258120.html

　　Q2. 液(ye)體培(pei)養(yang)基中(zhong)谷(gu)氨(an)酰(xian)胺的作(zuo)用，及(ji)使(shi)用(yong)方(fang)法(fa)。

　　幾(ji)乎所有的細胞對(dui)谷(gu)氨(an)酰(xian)胺有(you)較(jiao)高的要求，細(xi)胞需要谷(gu)氨(an)酰(xian)胺合(he)成蛋白(bai)質(zhi)，在(zai)缺少(shao)谷(gu)氨(an)酰(xian)胺時(shi)，細(xi)胞生長(chang)不(bu)良而(er)死亡(wang)。所以，各(ge)種(zhong)培(pei)養(yang)液中(zhong)都(dou)含(han)有較(jiao)大量(liang)的谷(gu)氨(an)酰(xian)胺。谷(gu)氨(an)酰(xian)胺在(zai)溶(rong)液(ye)中(zhong)很(hen)不(bu)穩定，應置-20 ?C冰(bing)凍(dong)保(bao)存(cun)，用前加入(ru)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)。加有(you)谷(gu)氨(an)酰(xian)胺的液體培(pei)養(yang)基4 ?C 冰(bing)箱儲存(cun)兩(liang)周以上(shang)時(shi)，應重(zhong)新(xin)加入(ru)原(yuan)來量(liang)的谷(gu)氨(an)酰(xian)胺。基(ji)礎(chu)醫學細胞中(zhong)心(xin)在(zai)其服務項(xiang)目(mu)中(zhong)配(pei)制(zhi)分(fen)裝了高濃(nong)度(du)（100倍(bei)）的谷(gu)氨(an)酰(xian)胺溶(rong)液(ye)（1ml/支(zhi)）。每支(zhi)1ml的谷(gu)氨(an)酰(xian)胺加到(dao)99ml*培(pei)養基(ji)中(zhong)，其終(zhong)濃度(du)為(wei)2mM/ml培(pei)養(yang)基(ji)。包(bao)裝為(wei)粉(fen)紅(hong)色，-24?C保(bao)存(cun)。

　　Q3.細(xi)胞(bao)計數及(ji)存(cun)活測(ce)試
1、原理(li)：
(1)計算(suan)細胞(bao)數目(mu)可(ke)用血(xue)球(qiu)計數盤或(huo)是(shi)Coultercounter粒子計數器(qi)自(zi)動計數。
(2)血(xue)球(qiu)計數盤壹(yi)般有(you)二個(ge)chambers，每個(ge)chamber中(zhong)細(xi)刻(ke)9個(ge)1mm2大(da)正方(fang)形，其中(zhong)4個(ge)角落(luo)之(zhi)正(zheng)方(fang)形再細刻16個(ge)小(xiao)格，深(shen)度(du)均為(wei)0.1mm。當(dang)chamber上方(fang)蓋(gai)上(shang)蓋(gai)玻(bo)片後，每個(ge)大(da)正方(fang)形之體積(ji)為(wei)1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使(shi)用(yong)時，計數每個(ge)大(da)正方(fang)形內之細胞數(shu)目(mu)，乘(cheng)以稀(xi)釋(shi)倍(bei)數(shu)，再乘以104，即(ji)為(wei)每ml中(zhong)之(zhi)細(xi)胞(bao)數目(mu)。
(3)存(cun)活測(ce)試之步(bu)驟為(wei)dyeexclusion，利(li)用(yong)染料(liao)會滲入(ru)死細胞中(zhong)而(er)呈(cheng)色，而(er)活(huo)細(xi)胞(bao)因細(xi)胞膜(mo)完(wan)整，染料(liao)無(wu)法(fa)滲(shen)入(ru)而(er)不(bu)會呈(cheng)色。壹(yi)般使(shi)用(yong)藍色之(zhi)trypan blue染料(liao)，如(ru)果(guo)細(xi)胞不(bu)易(yi)吸收trypan blue，則(ze)用紅(hong)色之(zhi)Erythrosin bluish。計算(suan)細胞(bao)活率：活細胞數(shu)/(活(huo)細胞數(shu)+死細胞數)×100%。計數應在(zai)臺盼蘭(lan)染色後(hou)數(shu)分(fen)鐘(zhong)內完(wan)成(cheng)，隨(sui)時(shi)間(jian)延(yan)長(chang)，部分活細胞(bao)也(ye)開(kai)始(shi)攝(she)取(qu)染料(liao);因(yin)為(wei)臺盼蘭(lan)對蛋白(bai)質(zhi)有(you)很(hen)強的親和力(li)，用(yong)不(bu)含(han)血(xue)清的稀(xi)釋(shi)液，可(ke)以使(shi)染色計數更為(wei)準(zhun)確。

　　Q4.細(xi)胞(bao)特(te)性
在(zai)細胞(bao)培養之前，我(wo)們(men)要了解壹(yi)下(xia)妳所要養(yang)細(xi)胞(bao)的基本特(te)性，這點(dian)可(ke)以從(cong)細胞的產(chan)品說明書(shu)或者從(cong)ATCC細胞庫查(zha)詢。除此之外(wai)我們(men)還要(yao)知(zhi)道(dao)每管細胞的數量(liang)，建議分(fen)裂或(huo)傳(chuan)代(dai)的比例，和已(yi)知(zhi)細胞的傳(chuan)代(dai)代(dai)次(ci)等(deng)信(xin)息。

　　Q5.準(zhun)備培(pei)養(yang)基(ji)
復(fu)蘇細胞時(shi)需要準(zhun)備合(he)適(shi)的培養基(ji)，血(xue)清和細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)所需的添(tian)加劑(ji)。大(da)部分培養細(xi)胞(bao)所用的培養體系(xi)，可(ke)以在(zai)訂購(gou)細(xi)胞(bao)系(xi)時(shi)獲(huo)得(de)。
雖(sui)然大多(duo)數細(xi)胞(bao)系(xi)可(ke)以在(zai)不(bu)止壹(yi)種(zhong)培(pei)養(yang)基中(zhong)生(sheng)長(chang)，但(dan)是(shi)當(dang)培養(yang)基改(gai)變時(shi)，細胞(bao)的性質(zhi)也(ye)會變化(hua)。因此(ci)，使(shi)用(yong)細胞(bao)庫推薦(jian)的培養基(ji)來培養細胞會獲得(de)的效果。

　　Q6.開(kai)啟凍存(cun)管
1.準(zhun)備壹(yi)個(ge)培(pei)養瓶，加入(ru)適(shi)宜細(xi)胞(bao)培(pei)養的培養基(ji)，液體體積(ji)按照說明書(shu)的推薦配(pei)置，並(bing)平衡(heng)培(pei)養(yang)基的溫度(du)和pH（CO2）。　
2.在(zai)37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)或(huo)細(xi)胞(bao)的正常生長(chang)溫度(du)下將(jiang)凍(dong)存(cun)管輕(qing)輕搖(yao)動(dong)。解凍要(yao)快(kuai)，約2分鐘(zhong)或直到(dao)冰晶融化(hua)即(ji)可(ke)。
3.從(cong)水(shui)浴(yu)中(zhong)取(qu)出(chu)凍(dong)存(cun)管並(bing)用浸(jin)泡(pao)或(huo)噴(pen)灑(sa)70%乙(yi)醇(chun)的方(fang)式(shi)來消毒(du)。進(jin)壹(yi)步(bu)的操(cao)作(zuo)均需在(zai)無菌(jun)操(cao)作(zuo)臺中(zhong)嚴(yan)格(ge)無(wu)菌(jun)條件下(xia)進(jin)行。
4.擰開凍存(cun)管的管帽(mao)並(bing)將(jiang)內容物轉(zhuan)移到壹(yi)個(ge)含(han)有9 ml推(tui)薦培(pei)養基的無菌(jun)離(li)心管(guan)中(zhong)。通(tong)過(guo)溫和離(li)心（125×g 10 min）除(chu)去冷凍保護劑(ji)（DMSO）。棄去(qu)上(shang)清，並(bing)用1或(huo)2 ml*培養(yang)基重(zhong)懸(xuan)細胞(bao)。將(jiang)這些細(xi)胞(bao)懸液轉(zhuan)移到含(han)有*培(pei)養基(ji)的培養瓶中(zhong)並(bing)輕輕(qing)搖動(dong)以*混(hun)勻(yun)。
5.培(pei)養24小時後(hou)檢(jian)查(zha)細胞狀(zhuang)態並(bing)在(zai)需要時(shi)進(jin)行傳(chuan)代(dai)。

　　Q7. 培(pei)養(yang)用液(ye)pH對細胞生長(chang)的影(ying)響(xiang)

　　由(you)於(yu)，大多(duo)數細(xi)胞適(shi)宜pH為(wei)7.2~7.4，偏(pian)離(li)此範(fan)圍對細胞將(jiang)產(chan)生有(you)害(hai)的影(ying)響(xiang)。各(ge)種(zhong)細(xi)胞(bao)對pH的要求也(ye)不(bu)*相同，原(yuan)代(dai)培(pei)養(yang)細(xi)胞壹(yi)般對(dui)pH變動(dong)耐(nai)受差，無限(xian)細胞(bao)系(xi)耐(nai)受力(li)強。

　　但(dan)總體來說，細胞(bao)耐(nai)酸性比耐(nai)堿(jian)性強壹(yi)些(xie)，偏(pian)酸環(huan)境(jing)中(zhong)更利於(yu)細胞(bao)生長(chang)。因(yin)此，我們(men)在(zai)配制(zhi)培養用液時，可(ke)把(ba)液(ye)體的pH稍微(wei)調得(de)偏(pian)酸壹(yi)些(xie)。液(ye)體在(zai)經(jing)過0.10um或0.22um濾(lv)膜(mo)過(guo)濾時(shi)，溶(rong)液(ye)的pH還會向上(shang)浮動(dong)0.2左右。

　　質(zhi)量(liang)可(ke)靠，售(shou)後有(you)保障(zhang)（編(bian)輯：tanxi）